董轲
- 作品数：51 被引量：127H指数：6
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 不同截短型癌基因AEG-1启动子活性分析
- 2016年
- 目的:分析不同截短型癌基因AEG-1启动子活性,证实与E6/E7表达相关的转录调控因子对AEG-1启动子活性的影响。方法:以宫颈癌He La细胞基因组DNA为模版,扩增AEG-1启动子全长序列(-2710/-491),并应用本实验室改造的启动子活性研究专用绿色荧光蛋白报告载体构建p GL3-basicEGFP/AEG-1质粒,通过转染He La细胞及血管内皮细胞ECV304检测启动子活性。同时,根据AEG-1启动子序列上与E6/E7作用相关的转录调控因子结合位点位置,设计不同截短型AEG-1启动子序列引物,应用p GL3-basic-EGFP载体构建不同截短型AEG-1启动子载体,并分别转染细胞检测启动子活性。结果:AEG-1启动子全长序列p GL3-basic-EGFP/AEG-1载体转染He La细胞可见明显绿色荧光蛋白表达,而在血管内皮细胞ECV304中表达为痕量。包含不同转录调控因子C-Myc、SP1、NF-κB、E_2F结合位点的不同截短型AEG-1启动子载体在肿瘤细胞中有活性但存在差异。结论:AEG-1启动子为肿瘤特异性启动子,含有与E6/E7表达相关的转录调控因子NF-κB、E_2F结合位点的启动子序列为影响AEG-1基因启动子活性的关键区域。
- 代瑛龙敏张喆刘丽张惠中董轲
- 关键词：C-MYCSP1E2F
- 结核性胸膜炎诊断方法在临床应用中的对比研究被引量：31
- 2017年
- 目的探讨结核性胸膜炎的病理学检查、影像学(CT)特征及试验检测指标特点,以达到早诊断、早治疗的目的。方法选取该院2014年7月至2015年12月收治的86例结核性胸膜炎患者作为试验组,80例非结核性胸膜炎患者作为对照组,均行胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、结核杆菌DNA(TB-DNA)、抗酸染色,同时联合结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)和影像学检查,并与病理学检查进行对比分析,比较各种检查方法的应用价值。结果 86例结核性胸膜炎患者中,ADA、TB-DNA、抗酸染色、T-SPOT.TB和影像学检查的灵敏度分别为53.48%(46/86)、6.98%(6/86)、11.62%(10/86)、84.88%(73/86)、37.21%(32/86),特异度分别为95.00%(76/80)、100.00%(80/80)、100.00%(80/80)、61.25%(49/80)、98.75%(79/80)。ADA、TB-DNA、T-SPOT.TB和影像学检查与病理检查的符合度分别为83.02%(44/53)、11.32%(6/53)、88.68%(47/53)、60.38%(32/53)。结论影像学和试验检测指标上的差异,对于结核性胸膜炎的的临床诊断具有一定的指导意义,临床上除常规检查外,应尽可能完善其他检查,进行综合分析以提高诊断准确性。
- 刘昕阳李锐成沈建军董轲张惠中
- 关键词：胸腔积液腺苷脱氨酶乳酸脱氢酶结核性胸膜炎
- 人羧肽酶A突变基因的构建、表达及突变羧肽酶A//抗精浆蛋白抗体融合基因的构建
- 高选择性肿瘤化疗是目前研究的重要课题之一，大多化疗药物
缺乏对肿瘤组织的高选择性，往往在对肿瘤组织发挥作用的同时也
对身体正常组织产生毒副作用。为了解决这些问题，人们希望通过
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- 董轲
- 关键词：基因突变测序
- 文献传递
- AEG-1肺归巢域与Flagellin融合基因的杆状病毒制备及鉴定
- 2018年
- 目的通过重叠PCR方法获得AEG-1C-Flic融合基因,采用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统获得重组AEG-1C-Flic杆状病毒,为后续AEG-1C-Flic病毒样颗粒疫苗的制备奠定基础。方法从鼠伤寒沙门菌的基因组中PCR扩增细菌鞭毛蛋白Flagellin,采用重叠PCR的方法将AEG1肺归巢域段基因与Flagellin融合,并添加猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)包膜蛋白gp41信号肽与跨膜区,构建AEG-1C-Flic pFastBacTM重组表达载体,转座大肠杆菌E.coliDH10Bac感受态细胞后获得重组杆粒,重组杆粒转染昆虫细胞Tn5,获得AEG-1CFlic重组杆状病毒,并采用Western Blot方法对该病毒进行鉴定。结果构建的AEG-1C-Flic杆状病毒表达载体经双酶切及测序正确,通过转化E.coli DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,经PCR鉴定大小正确,Western Blot结果显示Bacmid转染Tn5细胞后成功获得重组杆状病毒rBv AEG-1C-Flic。结论成功构建的AEG-1C-Flic杆状病毒可用于新型AEG1-病毒样颗粒疫苗的制备。
- 王希王琳张喆龙敏董轲张惠中
- 关键词：病毒样颗粒AEG-1FLAGELLIN
- 三种梅毒血清学检测方法的实验室评价被引量：15
- 2007年
- 目的比较RPR,ELISA,TPHA三种血清学实验诊断方法在临床诊断梅毒中的应用。方法将42例一期梅毒、61例二期梅毒、24例潜伏期梅毒患者及健康人的血清分别用RPR,ELISA,TPHA三种方法进行检测,结果进行统计学处理。结果RPR,ELISA,TPHA三种方法针对梅毒患者血清的敏感度分别为85.8%,94.5%,96.9%;特异性分别为87.3%,98.0%,100.0%。其中一期梅毒RPR,ELISA,TPHA三种检测方法的检出率分别为73.8%,92.9%,95.2%;二期梅毒的检出率分别为96.7%,100.0%,100.0%;潜伏期梅毒的检出率分别为79.1%,83.3%,91.7%。应用统计学处理后发现,RPR与TPHA,ELISA的检出率比较均有显著差异,而ELISA,TPHA两种方法之间的检出率无显著差异。结论ELISA,TPHA 2种检测方法与RPR比较,具有较高的灵敏度和特异性,考虑到ELISA较TPHA方法的试剂成本便宜,且操作简便,为目前梅毒血清学检测的首选方法。
- 董轲顾炳权韦三华张惠中
- 关键词：梅毒RPRELISATPHA
- HCV多表位基因重组BCG的筛选及对其诱导的免疫应答研究被引量：3
- 2007年
- 目的将丙型肝炎病毒（HCV）多表位基因的穿梭质粒pDE22-CtEm电转化BCG，筛选重组BCG（rBCG），免疫BALB／c小鼠，研究其诱导的免疫应答。方法培养并制备BCG感受态，将重组穿梭质粒pDE22-CtEm电转化BCG，筛选rBCG。rBCG免疫小鼠，同时进行基因免疫，测定血清中特异性抗体，分离小鼠脾淋巴细胞，体外测定淋巴细胞刺激指数、IFN-γ和进行CTL杀伤实验，观察rBCG在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答。结果筛选出HCV多表位基因rBCG，免疫小鼠后在小鼠体内诱导出特异性的体液和细胞免疫应答，免疫应答水平均高于重组的基因免疫。结论构建的HCV多表位抗原rBCG活疫苗优于基因疫苗。
- 韦三华尹文雷迎峰胡兴斌董轲李斌张青张利军张惠中
- 关键词：丙型肝炎病毒表位重组BCG
- 多发性骨髓瘤常用实验诊断方法评价被引量：5
- 2009年
- 目的:比较血清蛋白电泳(琼脂糖凝胶法)、尿本周氏蛋白、骨髓细胞学等实验室指标对多发性骨髓瘤的诊断价值,找出经济、简便、快速的敏感指标。方法:分析多发性骨髓瘤的诊断过程,计算血清蛋白电泳、尿本周氏蛋白、骨髓细胞学诊断的敏感度和特异度。结果:琼脂糖凝胶血清蛋白电泳的敏感度是96.6%,特异度96.4%;尿本周氏蛋白的敏感度是10.5%,特异度98.2%;骨髓细胞学的敏感度是51.7%,特异度100%。.结论:琼脂糖凝胶血清蛋白电泳的敏感度最高,且简便、快速、经济实用。
- 顾炳权苏海鹏董轲孙晓红张静张惠中
- 关键词：多发性骨髓瘤血清蛋白电泳敏感度特异度
- 不同选择剪接形式的小鼠Era在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：3
- 2005年
- 目的:对不同剪接形式的小鼠era基因(mera)进行克隆、原核表达,并进行纯化,检测抗人Era蛋白抗体对于两种剪接形式鼠Era蛋白的特异性,为以后鼠Era蛋白的研究奠定基础。方法:采用两种剪接形式era基因的MBP融合表达载体(pMAL-meraW,pMAL-meraS),在大肠杆菌中进行表达,对其进行纯化,并应用Westernblot鉴定了抗人Era蛋白抗体的特异性。结果:原核表达的MBP-mEraW、MBP-mEraS融合蛋白经过薄层扫描后发现其分别占菌体总蛋白的17%、19%;纯化后的融合蛋白纯度为67%和61%;用抗人Era蛋白抗体进行Westernblot发现抗体特异性较好,适合两种剪接形式的鼠Era蛋白的检测。结论:利用原核系统高效表达了不同剪切形式的鼠era基因,并检测了兔抗人Era蛋白抗体对不同剪接形式鼠Era蛋白的特异性,为以后对鼠era基因的研究奠定了基础。
- 董轲陈苏民纪宗玲郑玉陈南春
- 关键词：基因表达
- 血清标记物在急性心肌梗塞诊断中的研究进展被引量：1
- 1998年
- 董轲顾炳权刘茂贤
- 关键词：急性心肌梗塞血清标记物
- 血清一氧化氮测定肿瘤患者215例被引量：1
- 2002年
- 顾炳权明旭昌张青董轲
- 关键词：一氧化氮肿瘤血清
