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人Cu,Zn-SOD基因在毕赤酵母中的表达及稳定性被引量：4: 2008年; 目的构建人Cu,Zn-SOD基因的真核表达载体,转化毕赤酵母,并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性,合成人Cu,Zn-SOD基因,克隆至真核表达载体pPIC9k中,转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。优化表达条件,并检测粗酶液的稳定性。结果经SDS-PAGE和Western blot检测,表达的目的蛋白相对分子质量为18000左右;最佳表达条件为pH6.0,甲醇浓度1.5%,持续培养96h;目的蛋白占分泌蛋白总量的27%,最高表达量为91mg/L;最佳条件下培养液上清的酶活性最高达334U/ml,粗酶对氯仿和乙醇稳定,对H2O2不稳定,对温度有一定的耐受性,pH在6和8时较稳定。结论在毕赤酵母GS115中成功表达了具备酶活性的人Cu,Zn-SOD基因。; 迟春萍隋红李雨桐薛向光王志武牛灵刘畅王艳芳吴晓娟郭立君盛军李校堃; 关键词：真核表达毕赤酵母稳定性

破伤风抗毒素细菌内毒素检查方法的建立被引量：1: 2006年; 目的建立破伤风抗毒素细菌内毒素的检测方法。方法确定内毒素限值和供试品溶液的最大有效稀释倍数,制备供试品溶液;用细菌内毒素工作标准品作鲎试剂灵敏度复核试验,用供试品溶液在最大有效稀释倍数下作干扰试验,在前者试验有效,且后者试验无干扰作用时,在该浓度下对供试品进行凝胶限量试验,并与热原检查法比较。结果检测的10批破伤风抗毒素细菌内毒素的限量与热原检查法热原的限度完全相符。结论凝胶限量法可以替代热原检查法,对破伤风抗毒素进行细菌内毒素的限量检测。; 白春杰夏天瑶薛向光张梅柳春红杨琳; 关键词：破伤风抗毒素细菌内毒素检查热原检查

改进生产工艺后的精破抗的质量: 1989年; 改进的步骤和措施如下;(1)去掉原工艺的末次沉淀、压干、包袋、透析等工艺,用大型日产富士盒式超滤器来代替浓缩、脱盐等工艺,达到精制提纯的目的。(2)加大明矾稀释倍数,以加强吸附杂蛋白的作用。(3)明矾沉淀改用大罐加压滤过,明矾吸附液及时转入浓缩、脱盐和超滤,整个生产周期由7天缩短到4天。(4)采用 A 血型物质含量低的高活力胃蛋白酶进行生产、控制 A 血型物质含量。; 叶枫树薛向光; 关键词：血型物质超滤器包袋热原质

不同狂犬病毒抗原免疫马匹的效价比较: 2008年; [目的]对不同狂犬病毒抗原免疫马匹的效价进行比较。[方法]采用狂犬病毒aG株羊脑抗原和vero细胞培养的CTN株抗原分别免疫马匹,采用小鼠法分别进行病毒毒力和中和抗体效价检测。[结果]狂犬病毒aG株羊脑抗原毒力为6.0～7.5 logLD50/ml,免疫马匹后的中和抗体效价平均可达1∶30000以上;vero细胞培养的CTN株抗原毒力为4.5～6.0 logLD50/ml,免疫马匹后的中和抗体效价平均可达1∶10000以上,但狂犬病毒aG株羊脑抗原免疫马匹易引起变态反应,马匹淘汰率高。[结论]狂犬病毒aG株羊脑抗原与vero细胞培养的CTN株抗原相比,前者毒力强,免疫效价高,但易引起变态反应。; 薛向光柳春红岳强林洪娟徐光磊任志霞; 关键词：佐剂

狂犬病病毒抗原ELISA检测方法的建立及其应用被引量：2: 2009年; 目的建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,并进行初步应用。方法采用狂犬病病毒CTN-1V纯化抗原免疫家兔,制备多克隆抗体,作为酶标抗体,马抗狂犬血清纯化抗体作为包被抗体,建立双抗体夹心ELISA法。对该方法进行验证,检测狂犬病病毒原液毒力和疫苗效力,并与小鼠(NIH)法检测结果进行对比。结果双抗体夹心ELISA检测方法的最低检出限为0.17 IU/ml,最佳线性范围为0.17～2.00 IU/ml,相关系数R>0.97;批间及试验内变异系数均小于10%,特异性、稳定性均良好;检测20批病毒原液毒力及疫苗效力,结果与NIH法相比,差异无统计学意义。结论已建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,可用于生产过程中狂犬病疫苗原液和半成品的检定。; 王亚军戚凤春薛向光李晓波王丽娜谢琳王宇夏青娟隋波张梅魏涛郭立君; 关键词：狂犬病疫苗病毒抗原 ELISA 效力

抗狂犬病马血清效价ELISA检测试剂的制备被引量：2: 2008年; 目的制备检测抗狂犬病马血清效价的ELISA试剂。方法采用ELISA间接法。先用抗狂犬病病毒IgY包被酶标板,并确定其最适包被浓度;制备酶标二抗,并确定其最佳使用浓度。对试剂的灵敏度、特异性、精密性、稳定性及与小鼠中和试验结果的相关性进行考核。结果抗狂犬病病毒IgY和酶标二抗的最适浓度分别为10!g/ml和1∶1500,试剂灵敏度为0.072IU/ml,特异性良好,批间及试验间变异系数均小于11%,37℃放置3和5d检测样品结果与放置前差异无显著意义,与小鼠中和试验结果呈正相关。结论所制备的抗狂犬病马血清效价ELISA检测试剂盒,可用于抗狂犬病马血清效价的检测。; 薛向光柳春红贾媛张梅匡科伟李文娟郭立君郭凤云; 关键词：狂犬病病毒效价 ELISA

破伤风抗毒素制备方法的改进被引量：3: 2004年; 目的:改进破伤风抗毒素的制备方法,提高破伤风抗毒素中F(ab’)2片段含量。方法:常规方法免疫马匹,通过延长胃酶消化时间、调整胃蛋白酶比例及pH值处理免疫血浆,经硫酸铵沉淀、明矾吸附、超滤及除菌后,测定F(ab’)2片段含量。结果:通过调整上述生产条件,破伤风抗毒素中F(ab’),含量与总蛋白比由60％增至90%。结论:改进后的方法提高了破伤风抗毒素F(ab’)2含量。; 颜淑芹薛向光柳春红; 关键词：效价稳定性

破伤风抗毒素细菌内毒素检查方法的建立: ：研究细菌内毒素检查法与热原检查法检测破伤风抗毒素结果的相关性，建立检测破伤风抗毒素细菌内毒素的检查方法.方法：供试品溶液的制备，包括内毒素限值的确定，计算供试品溶液的最大有效稀释倍数;用细菌内毒素检查用水作试剂灵敏度复...; 白春杰夏天瑶薛向光张梅柳春红杨琳迟春萍; 关键词：破伤风抗毒素细菌内毒素检查热原检查法

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薛向光