袁兆尤
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
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- 单核细胞增多症李斯特菌InlC基因缺失株的构建与鉴定
- 2015年
- 为探讨单核细胞增生性李斯特菌(Lm)InlC基因在Lm致病性中的作用,本研究对其进行缺失。以单核细胞增多症李斯特菌4b血清型临床分离株LM-90SB2DNA为模板,扩增出用于缺失InlC基因的上、下游同源臂。运用SOE-PCR技术,将上、下游同源臂融合扩增得到△InlC基因缺失片段。将△InlC基因缺失片段与自杀性质粒p KSV-7连接,构建p KSV7-△InlC质粒。电转p KSV7-△InlC于LM-90SB2感受态细胞中,经过10μg/m L氯霉素和41℃下连续传代15代,获得单交换重组株,然后在41℃氯霉素中传至第108代,获得双交换重组株,菌液用旁侧引物进行PCR鉴定,然后30℃无氯霉素条件下连续传代培养30代丢失自杀性质粒并检测其遗传稳定性。结果显示:获得LM90SB2-△InlC缺失突变株,旁侧引物扩增只有1条1480 bp大小的片段,同时,对缺失片段进行测序验证,结果表明成功对InlC基因进行了缺失,并且缺失株遗传稳定。LM90SB2-△InlC的构建为进一步研究InlC基因在LM毒力中的作用奠定了基础。
- 袁兆尤马勋
- 关键词:基因缺失电转化
- 单核细胞增生李斯特菌InlC基因缺失株的构建及其毒力和环境耐受性的研究
- 单核细胞增生李斯特菌(listeria monocytogenes,LM)是一种常见的食源性致病菌,可以引起人类的李斯特菌病。此菌是一种兼性胞内寄生的革兰氏阳性菌,可以引起孕畜(妇)流产和脑膜炎等疾病,是对人畜具有较大危...
- 袁兆尤
- 关键词:李斯特菌胞内寄生菌株鉴定
- 文献传递
- 温和型猪瘟组织灭活苗的制作
- 2013年
- 猪瘟是养猪业中的一种毁灭性传染病。2012年,我国大部分省区发生了一种以猪瘟病毒的持续性感染(亚临床感染)、胎盘感染、初生仔猪抖抖病(先天性震颤)、妊娠母猪带毒综合征(母猪繁殖障碍)、急性病毒性出血症等为主要症状的温和型猪瘟,在新疆地区周边的一些养殖场中也发现了该病例,而且有较高的发病率与死亡率,可能原因与目前生产中使用的猪瘟兔化弱毒疫苗对该类型病例的免疫保护力不够有关。为此,对该地区流行的猪瘟病例进行采样,研制猪瘟组织灭活苗,并制定比较科学合理的免疫程序,以预防该地区该病的发生,并为猪瘟兔化弱毒苗的应用做好铺垫。
- 李不学王建锋杜军袁兆尤齐亚银
- 关键词:猪瘟组织灭活苗温和型猪瘟