- 丙型肝炎病毒复合多价疫苗基因的合成与克隆
- 本发明是一种丙型肝炎病毒(HCV)复合多价疫苗基因。丙型肝炎是国际上研究的热点之一，但由于HCV的高度变异性，目前尚无有效的HCV候选疫苗。本发明从HCV表达产物中优选了5个高度保守的T/B细胞表位，与一个破伤风类毒素(...
- 黄建生任大明林元凯解咏梅
- 文献传递
- 口服携带细胞因子基因的减毒沙门氏菌对小鼠肿瘤的预防作用被引量：2
- 2001年
- 将真核表达载体EGFPN1, pCMVhIL-12, pCMVhGM-CSF, pCMVmIL-12和pCMVmGM-CSF分别导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中, 扩增后经由胃管饲予BALB/c和C57BL/6小鼠, 6周后用Lewis肺癌细胞和4T1乳腺癌细胞对上述小鼠进行攻击. 在小鼠的肝脏、脾脏、肾脏、小肠和肿瘤等组织器官中均可观察到绿色荧光蛋白的表达和相应真核表达载体的整合. 小鼠血清中相应的细胞因子水平升高, CD8+/CD4+比率增大, 细胞免疫功能增强. 各实验组肿瘤的生长较对照组缓慢, 部分小鼠肿瘤消退, 小鼠生存时间明显延长. 该研究为减毒沙门氏菌作为口服基因治疗载体用于肿瘤的预防和治疗提供了实验依据.
- 李玉华陈慧郭坤元解咏梅王丰谢匡诚黄建生任大明
- 关键词：口服减毒沙门氏菌小鼠肿瘤预防绿色荧光蛋白基因
- 恶性疟SPf66疫苗的过去与现在被引量：11
- 1998年
- Patarroyo研制的SPf66杂合多肽疫苗是第一个成功的疟疾疫苗。在南美洲及非洲的广大疟区,已经证实其对恶性疟及间日疟具有一定的保护性。尽管SPf66疫苗问世已有10年,但对该疫苗的有效性还存在激烈的争论。SPf66疫苗保护性的地区差异,可能与SPf66疫苗的化学组成、免疫人群对疟原虫的暴露程度以及不同地区疟原虫的变异程度的不同有关。
- 黄建生解咏梅
- 关键词：疟疾疫苗
- 丙型肝炎病毒复合多价疫苗基因的合成与克隆
- 本发明是一种丙型肝炎病毒(HCV)复合多价疫苗基因。丙型肝炎是国际上研究的热点之一,但由于HCV的高度变异性,目前尚无有效的HCV候选疫苗。本发明从HCV表达产物中优选了5个高度保守的T/B细胞表位,与一个破伤风类毒素(...
- 黄建生任大明林元凯解咏梅
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合多表位抗原基因与谷胱甘肽转硫酶基因的融合表达及其在小鼠中免疫应答的研究被引量：4
- 1999年
- 目的：探讨复合多表位丙型肝炎病毒（ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）及恶性疟原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ，Ｐｆ）双价疫苗的可行性。方法：将人工合成的复合多表位ＨＣＶ基因ＰＣＸ及Ｐｆ抗原基因ＡＢ（ＳＰｆ６６＋ＳＰｆ１０５）克隆到谷胱甘肽转硫酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴ）表达载体ｐＧＥＸ２Ｔ中，并在大肠杆菌中高效表达ＧＳＴＨＣＶＰｆ复合抗原（ＧＳＴＣＡＢ），分析表达产物的免疫特异性、免疫原性及安全性。结果：ＧＳＴＣＡＢ可被ＨＣＶ患者血清、鼠抗ＧＺＰＣＸ及鼠抗Ｐｆ抗体特异识别，可诱发小鼠产生针对ＧＳＴＣＡＢ、ＧＺＰＣＸ及ＰｆＡｇ的特异性体液免疫应答及针对ＧＳＴＣＡＢ、ＧＺＰＣＸ的迟发性超敏反应，免疫后ＣＤ８＋Ｔ细胞比例略为升高，免疫小鼠未见明显的毒副作用。结论：ＧＳＴＣＡＢ融合蛋白具有良好的ＨＣＶ及Ｐｆ免疫特异性，可诱发理想的体液及细胞免疫应答，可望成为ＨＣＶＰｆ双价疫苗的候选抗原。
- 黄建生钟雄林毕惠祥毕惠祥张潜董文其袁纪军解咏梅董宁任大明
- 关键词：丙型肝炎恶性疟原虫免疫应答
- 丙型肝炎病毒与恶性疟原虫复合多表位抗原基因在小鼠及家兔中免疫应答的研究被引量：3
- 2000年
- 目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)及恶性疟原虫 (Pf)复合DNA疫苗的可行性。方法 :把HCV复合多表位抗原基因PCX与Pf复合基因AB克隆到带CMV启动子的真核表达载体pcDNA3中 ,构建真核表达载体pcDNA3 CAB ,肌肉注射免疫小鼠及家兔 ,检测其诱发特异性免疫应答水平及安全性。结果 :小鼠及家兔分别于免疫后第 6周及第 8周可检测到抗GZ PCX抗体 ,于第 10周达最高 ,滴度分别为 1:40 0及 1:3 2 0 0 ,但持续时间较短 ;免疫血清可识别Pf抗原 ;免疫动物还可产生针对GZ PCX融合蛋白的迟发性超敏反应 ;免疫后小鼠体重正常 ,肝脾脏未见明显肿大 ,具有良好的安全性。结论 :HCV Pf双价多表位DNA抗原基因在小鼠及家兔中可诱发特异性免疫应答 ,但抗体的持续时间较短。
- 黄建生解咏梅张潜沈先荣钟雄林张丽芸郭明秋任大明
- 关键词：丙型肝炎病毒恶性疟原虫多表位抗原DNA疫苗
- HCV复合多表位抗原基因表达及免疫原性的研究被引量：10
- 1999年
- 分类号Ｑ７８１文献标识码Ａ文章编号０００１６２０９（１９９９）０３０２６８７１丙型肝炎是常见的传染病之一，易于慢性化及发展为肝硬化，且与肝癌的发生关系密切，目前尚无理想的防治手段。国内外对丙型肝炎疫苗的研究仍处于克隆表达ＨＣＶ部分基因产物或合成...
- 黄建生解咏梅林元凯任大明
- 关键词：丙型肝炎病毒免疫原性
- HCV多表位抗原基因与β-半乳糖苷酶基因融合表达、产物纯化及酶活性分析被引量：10
- 1998年
- 设计一个270bp的丙型肝炎病毒（HCV）复合多表位抗原基因（PCX），与β－半乳糖苷酶（GZ）基因融合后，在高浓度肉汤培养基中，于转接1％量后3．25h，用终浓度为1mmol／LIPTG诱导4h发酵表达，其表达量最高，约占50％总蛋白量，表达产量GZ－PCX以包含体形式存在．利用改良的包含体纯化及溶解方法，可获得溶解率＞90％，纯度为96．2％的产物GZ－PCX，且包含体溶解产物较好保存其蛋白酶活．对PBS／EDTA透析，GZ－PCX蛋白的β－半乳糖苷酶活性可升高4倍，对H2O／EDTA透析其活性则明显下降．
- 黄建生解咏梅沈先荣柯张潜任大明龚叶芳姚锡惠张伯生郭明秋张丽芸
- 关键词：PCXΒ-半乳糖苷酶丙型肝炎病毒
- 口服丙型肝炎复合多表位DNA减毒鼠伤寒沙门活菌苗的实验研究被引量：4
- 1999年
- 目的 利用减毒鼠伤寒沙门菌作为载体，探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ） 口服ＤＮＡ 疫苗的可行性。方法 把ＨＣＶ 复合多表位抗原基因ＰＣＸ 克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３（ＣＭＶ 启动子） ，构建ＨＣＶ 真核表达载体ｐｃＤＮＡ３／ＰＣＸ，转化减毒鼠伤寒沙门菌ＳＬ３２６１ ，获得ＨＣＶ 重组口服ＤＮＡ 活菌苗ＳＬ３２６１ （ｐｃＤＮＡ３／ＰＣＸ） ，免疫小鼠及家兔后，检测特异性免疫应答及安全性。结果 ＳＬ３２６１（ｐｃＤＮＡ３／ＰＣＸ） 在小鼠及家兔中均可诱发低水平的特异性体液免疫及细胞免疫应答，免疫动物未见明显的毒性反应。结论 ＨＣＶ 口服减毒鼠伤寒沙门菌ＤＮＡ 疫苗可诱发特异性的免疫应答，为ＨＣＶ
- 黄建生胡幼卿解咏梅许谆张明徽张丽芸陈立茵任大明
- 关键词：多表位疫苗
- HCV/HBV复合抗原基因的克隆、表达及免疫应答研究被引量：1
- 1999年
- 为探讨ＨＣＶ／ＨＢＶ 复合疫苗的可行性，将合成的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）复合多表位抗原基因ＰＣＸ与ＨＢｓＡｇ 基因连接成ＰＣＸＳ基因，与β－半乳糖苷酶（ＧＺ）基因融合后在大肠杆菌及减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得表达．目的蛋白ＧＺ－ＰＣＸＳ可被抗－ＨＢｓ 及抗－ＨＣＶ 抗体所特异识别．ＧＺ－ＰＣＸＳ抗原皮下注射免疫ＩＣＲ小鼠后，诱发了较高水平的抗－ＧＺ－ＰＣＸＳＩｇＧ反应．构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲ／ＰＣＸＳ）口服免疫小鼠后，诱发了高水平的ＣＤ８＋ Ｔ细胞增殖反应及抗ＧＺ－ＰＣＸＳＩｇＧ反应．所有免疫小鼠均未见明显的毒副作用．该研究揭示，ＨＣＶ／ＨＢＶ 复合抗原可诱发特异性体液免疫及细胞免疫应答，而活菌苗口服可能是理想的免疫途径，为ＨＣＶ／ＨＢＶ 双价疫苗研究提供了一定的理论及实验依据．
- 黄建生许谆SaidA.SALEH解咏梅张明徽任大明
- 关键词：免疫应答口服法双价疫苗HCVHBV
