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许良树: 作品数：37 被引量：158H指数：7; 供职机构：厦门大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学理学自然科学总论更多>>

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光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶小亚基基因的克隆被引量：8: 2000年; 光合细菌 C.vinosum可溶性氢酶由 52 k Da和 2 1.5k Da两个亚基组成 .该酶大亚基 N-末端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基 N末端氨基酸序列为 :STQPKITVATXL DG.根椐大、小亚基 N-末端氨基酸序列设计两套引物 ,Primer1:5′g AT(g/ C) g T g AT(g/ C) g T(g/ A) Cg3′和 Primer2 :5′A g C AC(C/ g) CAg CC(C/ g) AA(g/ A) ATC3′,通过 PCR扩增获得 0 .6 kb的扩增片段 .克隆并对该片段序列进行分析 ,结果表明 ,该片段包含小亚基基因的全序列 .可溶性氢酶小亚基由 179个氨基酸残基组成 ,分子量为 2 1.8k Da,含有 Ni Fe-氢酶保守的序列框 :Cxx C......Gx Cxxx G......; 龙敏南苏文金S P J Albracht吴健民张凤章许良树; 关键词：VINOSUM 可溶性氢酶基因克隆光合细菌小亚基

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的EPR研究被引量：3: 2001年; 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 5次柱层析 ( DE-2 3,TSK-DEAE( ) ,Ultragel Ac A-4 4 ,TSK-DEAE( ) ,Superdex TM75 )分离后被纯化 365倍 ,得率为 32 % ,其催化放氢的活性为 8.4μmol H2 /( min· mg prot) .氧化态可溶性氢酶在 4 5 K下 ,产生了 Ni( )的典型 EPR信号 ( gx,y,z=2 .37,2 .1 6,2 .0 1 6和 gx,y,z=2 .30 ,2 .2 3,2 .0 1 6) ;在 1 0 K下 ,没有出现膜结合态氢酶中存在的 [3Fe-4 S]簇特征 EPR信号 .可溶性氢酶被 H2 还原后 ,Ni( )的特征 EPR信号消失 ,同时出现一个 [4 Fe-4 S]簇的特征 EPR信号 ( gx,y,z=1 .88,1 .90 ,2 .0 4 5 ) .研究结果表明 ,C.vinosum可溶性氢酶在结构和功能上不同于膜结合态氢酶 ,是一种新的催化放氢的 Ni; 龙敏南苏文金Albracht S.P.J张凤章许良树; 关键词：CHROMATIUM VINOSUM 可溶性氢酶 EPR谱光合细菌

根瘤菌吸氢酶基因转移的研究被引量：2: 2001年; 通过三亲本杂交将含有花生根瘤菌吸氢基因的质粒pZ 55(Tcr)转入不吸氢的花生根瘤菌Ra 34等菌株 (Hup- ,Nif+,Apr)中 ,筛选到既具有吸氢又具有固氮能力的花生根瘤菌结合株Rz34 2。在自生和共生条件下 ,结合株均可表达高吸氢和高固氮活性。以结合株Rz34 2接种的花生植株叶片的干重比不接种的、接种受体株Ra34(Hup- )和接种对照菌株L8 3(Hup+,Nif+)的分别高 6 2 %、7 6%和 6 3% ;种子的含氮量分别高 8 9%、1 0 0 %和 6 0 % ;产量分别高 1 8 8%、1 0 5%和 1 0 7%。研究结果表明 ,以含吸氢基因的结合株接种花生能提高根瘤菌与花生的共生固氮效率 ,增加作物的产量。; 王振宇龙敏南刘月英张风章许良树朱天赐蒋水柳; 关键词：花生根瘤菌吸氢酶固氮酶基因转移

花生根瘤菌L_(8-3)菌株氢酶活性的表达及化能自养生长被引量：4: 1989年; 本文研究了花生根瘤菌L_(8-3)菌株氢酶活性的诱导、表达。在吸氢培养基(H-UM)中,氢酶表达的最佳O_2浓度是5％,诱导氢酶活性的最佳H_2浓度也是5％,H_2浓度继续增大到20％时,氢酶活性基本保持恒定,CO_2对氢酶活性没有影响。在无机盐/维生素培养基和5％O_2、10％H_2、5％CO_2及80％N_2的混合气体条件下,花生根瘤菌能进行化能自养生长。生长15天后,培养液中的菌体光密度、细菌数、菌体蛋白质含量及有机碳含量明显提高,氢酶活性比异养液体HUM培养时高10倍,比斜面HUM培养高35倍。用N_2分剐代替混合气体中的H_2或CO_2,菌体则不能生长,光密度、细菌数、蛋白质含量及吸氢活性没有变化。; 吕荣富许良树曾定; 关键词：花生根瘤菌

花生根瘤菌在自生条件下固氮和吸氢相关性被引量：3: 1992年; 花生根瘤菌x_(-1)菌株在自生条件下和合适的培养基中,可诱导固氮酶及氢酶的活性,固氮酶反应产生的H_2(内源H_2)能直接诱导氢酶,氢酶活性表达的时间进程是在固氮反应之后,在外源H_2的存在下,固氮酶和氢酶则可同时表达,不同有机碳化合物对固氮酶与氢酶的影响不同,丙酮酸明显提高固氮活性,但对氨酶没有促进作用,蔗糖对固氮活性没有促进作用但对吸氢表现促进作用,分子H_2明显提高固氮活性,2.4-二硝基苯酚抑制需H_2的固氮活性,在外源H_2存在下其抑制作用更明显,铵抑制固氮酶的形成、固氮酶受铵抑制时氢酶也相应受到抑制。; 许良树刘伟敏曾定张凤章; 关键词：花生根瘤菌固氮吸氢

高产纤维素酶菌株的筛选及产酶条件研究被引量：77: 2005年; 从霉变的玉米芯中筛选到一株高产纤维素酶的菌株,经 18S rRNA基因序列分析和菌株形态特性分析,确定该菌株为灰绿曲霉(Aspergillus glaucus).利用固体纤曲培养产生纤维素酶,研究了培养基起始pH值、培养温度、培养时间、接种量、氮源、稻草粉与麸皮比例、表面活性剂等对菌株产酶的影响.在最适条件下菌株培养 72 h后,羧甲基纤维素酶(CM Case)活力高达6 812 U/g(干曲,下同),滤纸酶活力(FPA)达172 U/g.利用该菌株对蔗渣进行分解,其糖化率达36.4%.; 徐昶龙敏南邬小兵徐惠娟陈重安张凤章许良树; 关键词：高产株形羧甲基纤维素酶 FPA RRNA基因

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的某些理化性质被引量：1: 2001年; 光合细菌 Chromatium vinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶 .在培养基中加入终浓度为 1μmol/ L的 Se,细胞中可溶性氢酶的含量增加 1.7倍 .C.vinosum可溶性氢酶可以利用甲基紫精、苄基紫精和细胞色素 C为电子载体催化吸氢与放氢 ,但不能利用 NAD,NADH,NADP和NADPH等进行催化放氢和吸氢 .可溶性氢酶易被 CO所抑制 ,在反应系统中加入终浓度为 2 .5μmol/ L的 CO时 ,可抑制氢酶最大放氢活性的一半 .与 C.vinosum膜结合态氢酶相比 ,可溶性氢酶较易被胰蛋白酶降解而使氢酶催化吸氢和放氢的活性降低 .; 龙敏南苏文金S P J A lbracht张凤章许良树; 关键词：CHROMATIUM VINOSUM 可溶性氢酶理化特性光合细菌

棕色固氮菌细菌铁蛋白释放铁的动力学方程和性质被引量：6: 1998年; 棕色固氮菌细菌铁蛋白铁核中的磷铁组成存在非均匀性。细菌铁蛋白释放铁的动力学特性表现出复杂性。通过动力学曲线分析，提出蛋白壳自身调节能力起着限制释放铁速率关键步骤的观点，建立分析铁蛋白释放铁的动力学特性方程并用它较合理地阐明铁蛋白释放铁的动力学规律及储存铁的途径。用分光光度法和动力学方程研究细菌铁蛋白释放铁的全过程，其结果表明该蛋白以一级反应方式释放铁核表层的铁和以零级反应方式释放铁核内层的铁。外加磷酸盐能强烈地抑制释放铁的速率，引起释放铁的反应级数的转化，迫使铁蛋白以一级反应的方式释放铁核中的大多数铁。; 张凤章黄河清林庆梅林庆梅邱雪慧邱雪慧许良树曾定; 关键词：棕色固氮菌固氮菌铁蛋白铁释放动力学方程

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的分离提纯及特性被引量：3: 2000年; 光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 4次柱层析 (Whatman DE- 52 ,TSK- DEAE,Ultragel Ac A- 44 ,Mono Q)分离提纯后被纯化 630倍 ,得率为 33.5% .可溶性氢酶催化放氢比活性为 7.5μmol· min-1· mg-1.SDS- PAGE结果显示 ,可溶性氢酶由 52 k D和 2 1 .5k D两个亚基组成 .大亚基 N端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR;小亚基 N端氨基酸序列为 :STQPKIT-VATXLDG.氧化态可溶性氢酶在 54K时产生了典型的 Ni( )电子顺磁共振 (EPR)信号 (gxyz=2 .37、2 .1 6、2 .0 1 6和 gxyz=2 .30、2 .2 3、2 .0 1 6) .研究结果表明 ,C.vinosum可溶性氢酶是一种新的催化放氢的 Ni Fe-氢酶 .; 龙敏南苏文金S.P.J.ALBRACHT张凤章许良树; 关键词：可溶性氢酶纯化光合细菌

固氮酶中N_2和N_2O结合位的一种新的鉴定方法被引量：3: 1999年; 采用ＧＣ和ＧＣ－ＦＴＩＲ法，研究了Ｎ２和Ｎ２Ｏ对固氮酶催化Ｃ２Ｄ２还原活性及产物二氘代乙烯的反式－／顺式－异构体比值的影响，结果表明，Ｎ２和Ｎ２Ｏ均抑制Ｃ２Ｄ２的还原作用，并引起反式－／顺式－１，２－二氘代乙烯比值的增加．这一变化规律，与根据Ｃ２Ｈ２还原被Ｎ２和Ｎ２Ｏ抑制只发生在固氮酶铁钼辅基（ＦｅＭｏｃｏ）的笼内的假设而近似计算的结果相一致．实验结果和理论计算之间的一致性支持Ｎ２和Ｎ２Ｏ结合在ＦｅＭｏｃｏ的笼内。; 张凤章黄静伟邱雪慧曾润颖龙敏南曾润颖龙敏南万惠霖; 关键词：固氮酶钼铁蛋白氮一氧化二氮

许良树

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