赵然
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：长春理工大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅科研项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- HBV/HEV融合基因大肠杆菌表达载体的构建与初步表达
- 2007年
- [目的]为构建一个能够表达出乙/戊型肝炎二价疫苗抗原的大肠杆菌高效表达载体。[方法]从乙型肝炎患者血清中提取adr型基因组,采用PCR方法扩增出S基因;从戊型肝炎患者的粪便中提取RNA,采用RT-PCR的方法扩增出ORF2编码区的羧基末端中的414-606aa的基因片段,经过T载体连接;菌落PCR;双酶切;测序鉴定后,将这两部分重组入含有Ω增强子的pTΩ-T7高效的E.coli表达载体中。[结果]构建了pTΩ-T7SE表达载体并且表达出相应的目的蛋白。[结论]该方法为同时预防乙型和戊型肝炎提供了一个较好的途径。
- 荀恒杰于源华张勇张晓赵然
- 关键词：HBVHEV基因重组
- Bcl-2/C-Raf双基因“敲低”抑制人结肠癌细胞增殖被引量：1
- 2007年
- RNA干扰是一种具有序列特异性的基因沉默,能够触发具有相应序列的mRNA的降解.构建具有双靶点的RNAi质粒表达载体,与单靶点表达载体比较,探讨其对结肠癌细胞增殖的抑制作用.本研究分别构建了针对Bcl-2、C-Raf和Bcl-2/C-Raf靶基因的质粒表达载体,通过LipofectamineTM2000介导转染人结肠癌细胞系HCT-8后,检测相应转染组靶基因的mRNA和蛋白质表达量,测定各组细胞活性,研究RNAi对各组癌细胞增殖的抑制率.结果表明,分别转染3种质粒表达载体后,3组结肠癌细胞中相应靶基因的mRNA和蛋白质表达量均降低;转染双靶点干扰质粒的试验组;其细胞活性低于单靶点组;对于针对Bcl-2,C-Raf和Bc-l2/C-Raf基因的3组干扰实验,RNAi对结肠癌细胞增殖的抑制率分别为43.87%,40.64%和63.85%.RNAi是结肠癌细胞中的一种功能途径,以质粒作为表达载体,同时具备Bc-l2/C-Raf双靶点的表达载体,对结肠癌细胞增殖的抑制作用要明显优于单靶点表达载体,双靶点质粒表达载体在结肠癌的基因治疗中是有潜力的.
- 杜柏权于源华赵然牛灵
- 关键词：RNA干扰BCL-2C-RAFHCT-8细胞
