赵珺
- 作品数：12 被引量：23H指数：2
- 供职机构：青海大学医学院更多>>
- 发文基金：青海省自然科学基金国家自然科学基金青海大学中青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胃癌组织中胃癌相关成纤维细胞、胃正常成纤维细胞的分离鉴定及增殖情况观察被引量：2
- 2018年
- 目的从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能。方法3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织。采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜组织中的胃NFs。原代培养胃CAFs、胃NFs,差速贴壁传代法分离并纯化细胞,差速贴壁20 min。倒置显微镜下观察胃CAFs、胃NFs细胞形态,采用免疫细胞化学染色法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK18)、波形蛋白(Vimentin)。取3个来源分离的胃CAFs、胃NFs,分别于细胞贴壁24 h、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d采用MTT法测算细胞光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线。结果胃癌CAFs细胞大小不一,呈梭形或星形,排列不规则并呈重叠生长;胃NFs细胞均匀一致,呈长梭形,排列规则。胃CAFs细胞存在α-SMA、Vimentin阳性表达,CK18阴性表达,胃NFs细胞存在Vimentin阳性表达,α-SMA、CK18阴性表达。培养3~6天,各来源胃CAFs细胞OD值均高于胃NFs(P均<0.05)。结论成功分离胃CAFs、胃NFs。胃CAFs、胃NFs均存在Vimentin表达。胃CAFs增殖能力优于胃NFs。
- 封兰兰孙伟朱吉海刘珺赵珺刘燕
- 关键词：胃癌癌相关成纤维细胞细胞角蛋白18波形蛋白Α-平滑肌肌动蛋白细胞增殖
- 一种多基因串联共表达载体的构建被引量：11
- 2011年
- 为了构建一种可用于串联共表达多个基因的原核表达载体,通过PCR引入点突变,对商业载体pET-22b的酶切位点进行定向改造,设计独特的XbaⅠ/SpeⅠ模块。获得改造成功的载体pET-m22b,测序结果显示启动子、核糖体结合位点、多克隆位点及终止子均位于XbaⅠ和SpeⅠ两酶切位点间。选取不同来源的基因进行串联组合及表达鉴定,四个基因成功组合于同一载体中,表达效果良好,各基因表达效率不受明显影响。研究构建的载体pET-m22b,使多基因的共表达更加便捷,为蛋白复合物的表达与纯化、代谢通路的异源重建及其优化等研究奠定了良好的基础。
- 何彰华王洋赵珺刘晓杰张丽华王东师明磊黄芬尤平赵志虎
- 关键词：共表达串联组合
- 胃泌素及线粒体途径凋亡相关蛋白在胃癌组织中的表达及意义被引量：8
- 2017年
- 目的研究胃泌素及线粒体途径凋亡相关蛋白在胃癌组织中的表达,探讨其相关性及临床意义。方法通过组织芯片技术和免疫组织化学染色法,检测胃癌组织及癌旁组织内胃泌素及线粒体途径凋亡相关蛋白Bcl2、胱天蛋白酶9(caspase-9)及caspase-3的表达,采用Spearman等级相关分析及卡方检验分析它们之间的相关性及其与临床病理特征的关系。结果胃泌素及Bcl2在胃癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织;caspase-9及caspase-3在胃癌组织中的阳性表达率均显著低于癌旁组织。其中,胃泌素与Bcl2在胃癌组织中的表达呈显著正相关(r=0.237)。胃泌素的表达与肿瘤部位相关,Bcl2的表达与肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移有关。结论胃癌组织胃泌素与Bcl2高表达且与临床病理特征有一定相关性。
- 封兰兰朱吉海孙伟赵珺刘燕
- 关键词：胃癌胃泌素线粒体BCL2
- 含有分裂型内含肽DnaE基因的表达盒设计、合成及高效表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的:建立一种简便、快捷的基因从头设计、优化与合成策略,进行含有分裂型内含肽DnaE基因的表达盒全合成并构建高效表达载体。方法:以免费软件GeneDesign 3.0为主要平台,同时结合Tandem Repeats Finder、UNAFold等不同生物信息学软件,对含有DnaE基因、合适酶切位点的表达盒进行设计与分段合成;合成寡核苷酸片段通过重叠PCR进行组装与克隆。结果:利用建立的设计流程,合成了大小为44～64 nt的14段寡核苷酸片段,通过重叠PCR,实现了14段寡核苷酸片段的一次性组装,经过克隆、酶切鉴定、序列分析得到了序列完全正确的表达载体。结论:建立了一套有效的、基于免费软件的基因从头设计与合成的策略,构建了可以用于环肽小分子文库表达与筛选的表达载体。
- 赵珺王洋师明磊王东田靖耿排力赵志虎
- 关键词：生物信息学
- NK细胞在常见寄生虫病免疫中的研究进展
- 2019年
- 自然杀伤(NK)细胞作为机体固有免疫系统的重要效应细胞,在寄生虫感染免疫中的作用备受关注。我们主要总结了寄生虫感染后NK细胞数目稳态的变化、NK细胞与其他实质细胞或免疫细胞之间的相互作用及细胞能动性改变、NK细胞活化性和抑制性信号与细胞内部效应通路改变、细胞激活后细胞毒性功能改变、对其他免疫细胞功能和后续适应性免疫应答类型的影响等,关注NK细胞与寄生虫感染结局之间的关系以及其对相关疫苗效价的影响,以便全面地了解NK细胞参与抗寄生虫感染的机制及其意义,为以NK细胞为靶点的寄生虫防治提供理论依据。
- 赵珺宣岩唐超群朱吉海刘燕
- 关键词：寄生虫病免疫自然杀伤(NK)细胞
- 用于表达环形肽的表达盒及其应用
- 本发明公开了一种用于表达环形肽的表达盒及其应用。本发明提供了(a)或(b)或(c)的DNA分子：(a)序列2自5’末端第6至510位核苷酸所示的DNA分子；(b)序列表的序列2所示的DNA分子；(c)将氯霉素乙酰基转移酶...
- 赵志虎王洋赵珺
- c-FLIP基因在青海地区藏族、汉族、回族3个民族宫颈癌组织中表达的差异性及意义
- 2019年
- 目的探讨c-FLIP基因在青海地区藏族、汉族、回族3个民族宫颈癌组织中表达的差异性及其意义,为临床诊治提供参考依据.方法收集青海地区藏族、汉族、回族3个民族宫颈癌组织蜡块各20例,共60例,SP免疫组化方法检测c-FLIP在3个民族宫颈癌组织中的表达水平,并对各民族病例c-FLIP阳性率进行统计分析;对3个民族宫颈癌新鲜手术标本进行c-FLIPmRNA表达水平的检测.结果c-FLIP蛋白检测显示汉族阳性率为65.0%,其中强阳性率为45.0%;藏族阳性率为65.0%,其中强阳性率为25.0%;回族阳性率为40.0%,其中强阳性率占10.0%;mRNA表达水平显示c-FLIP在不同民族的宫颈癌组织和癌旁组织均有表达,在汉族宫颈癌组织表达量最高,藏族次之,回族最低;3个民族的癌旁组织也有一定量c-FLIP表达,但藏族最高;3个民族宫颈癌癌组织c-FLIP表达均高于癌旁组织;不同年龄段3个民族c-FLIP表达呈现不同表达水平.结论不同民族整体c-FLIP表达存在一定差异性,不同民族癌组织c-FLIP表达均高于癌旁组织,提示c-FLIP可能与宫颈癌的发生发展有一定的关系.但是同一年龄段不同民族c-FLIP表达差异性尚不能确定.
- 唐超群宣岩封兰兰胡蕾王春梅王芳刘燕赵珺
- 关键词：不同民族宫颈癌C-FLIP
- 胃腺癌组织微管解聚蛋白1和突变型P53的表达及意义
- 2017年
- 目的应用免疫组化方法检测胃腺癌中微管解聚蛋白(Stathmin)1和突变型P53(TP53)的表达,分析二者的关系及意义。方法确诊为胃腺癌的患者共72例为A组,经病理学确诊为胃黏膜高级别上皮内瘤变的术后组织32例为B组,经病理学确诊为胃黏膜低级别上皮内瘤变的内镜咬检组织32例为C组,距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织15例为D组,均留取蜡块组织,应用免疫组化SP法检测4组Stathmin1和TP53的表达。结果 4组Stathmin1和TP53表达的阳性率差异均有统计学意义(P<0.01)。A组Stathmin1和TP53的表达与肿瘤最大径、增殖指数密切相关;Stathmin1的表达与肿瘤脉管侵犯密切相关,二者均与肿瘤的淋巴结转移和神经侵犯无相关性。相关分析显示A组Stathmin1和TP53呈正相关。结论胃腺癌中Stathmin1和TP53高表达对肿瘤形成和进展有重要作用。Stathmin1和TP53有明显的正向协同作用。
- 王芳赵珺杨生森马臻奇张洪芳绽永华郜茜
- 关键词：胃腺癌
- 细胞转染中单克隆与混克隆干扰基因效率的比较
- 2016年
- 目的比较细胞转染中单克隆与混克隆干扰基因效率。方法采用胃泌素特异干扰载体转染人胃癌原代细胞株L25,经G418抗性筛选获得混克隆和单克隆细胞,应用RT-PCR、Western blot和免疫荧光三种方法对混克隆细胞和单克隆细胞干扰胃泌素基因的效率进行比较。结果 RT-PCR结果显示混克隆细胞胃泌素mRNA表达水平被明显抑制。在挑取的10株单克隆细胞中,胃泌素的表达均受到干扰,其效果有差异,其中有2株单克隆细胞pshRNA-1、pshRNA-10胃泌素mRNA表达水平抑制率达到86%,抑制效率与混克隆细胞相同,其他8株单克隆细胞的平均抑制率为31%。Western blot和免疫荧光结果均显示单克隆细胞pshRNA-1、pshRNA-10与混克隆细胞在胃泌素蛋白水平的干扰效果相同。结论采用混克隆细胞进行生物学特性鉴定和后续基因表达水平研究,实验信息量大、周期短、污染几率小、可重复性强,是一种省时、简便、高效的方法。
- 刘燕朱吉海孙伟赵珺
- c-FLIP在胃癌中的表达及其对凋亡的影响
- 2013年
- 目的检测c-FLIP在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达,探讨其对胃癌细胞凋亡的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测6株胃癌细胞系和32例配对的胃癌组织及癌旁形态学正常组织中c-FLIP的表达;应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测下调c-FLIP表达对细胞凋亡的影响。结果 6个胃癌细胞系中存在c-FLIP的差异表达,其中BGC823高表达c-FLIP基因。在32例胃癌组织中有27例(84.4%)高表达c-FLIP基因,而在32例配对的癌旁形态学正常组织中仅有13例(40.6%)表达且表达水平明显低于胃癌组织。shR-NA干扰c-FLIP表达后明显抑制了细胞的凋亡。结论胃癌组织和细胞中存在c-FLIP的高表达,且其与细胞的凋亡相关,提示c-FLIP可能在抑制胃癌细胞凋亡中发挥重要作用。
- 刘燕赵珺刘彦平永胜耿排力
- 关键词：基因胃癌凋亡
