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大肠癌组织库建立及质量控制的经验被引量：6: 2012年; 目的建立规范的大肠癌组织库,收集高质量的标本应用于肿瘤研究。方法筹备建立组织库所需资金并通过伦理委员会同意,建立标本收集、储存的标准操作流程;收集临床患者的术后病灶标本并冷冻储存;对组织库及标本进行严格的质量控制。结果本研究建立了标准的组织库操作流程;建库1年收集大肠癌患者组织标本587个、血浆标本549个;随机选取样本的质量检测显示样本DNA、RNA为高质量,癌组织中肿瘤细胞比例>80.0%;标本临床资料完整。结论质量控制显示收集的冰冻大肠癌组织其分子质量可靠,并有完整的病例临床资料,可充分满足研究的需要。; 王聪张大庆赵盈盈仇长青杜勇李海翟惠虹; 关键词：组织库

结肠癌细胞中CacyBP//SIP核转位后其下游信号分子的筛选: 目的：在结肠癌中，钙周期素结合蛋白（CacyBP//SIP）的入核可以促进结肠癌的发生发展，在人结肠癌SW480细胞中，筛选出CacyBP//SIP核转位后与其相互作用的蛋白质。方法：构建pGC-FU-CBP-...; 赵盈盈; 关键词：免疫沉淀; 文献传递

人钙周期素结合蛋白基因亚细胞定位载体的构建和鉴定被引量：1: 2011年; 目的构建编码人钙周期素结合蛋白(hCacyBP)基因的亚细胞定位载体并进行序列测定。方法 hCacyBP的模板来自人结肠癌细胞株HCT-116的cDNA序列,根据hCacyBP基因序列设计合成引物,采用PCR方法扩增编码hCacyBP的基因片段;将hCacyBP基因定向克隆到亚细胞定位载体pCMV/myc系列:pCMV/myc/nuc(胞核定位载体)、pCMV/myc/cyto(胞质定位载体)。转化E.coli DH5α感受态细胞,在氨苄青霉素阳性LB培养基平板上筛选出阳性克隆。重组质粒经PCR及双酶切鉴定并进行序列测定。结果从HCT-116的cDNA模板扩增684 bp的hCacyBP基因片段,分别构建重组质粒pCMV/myc/nuc-hCacyBP、pCMV/myc/cyto-hCacyBP,PCR及双酶切鉴定产物大小与预期值相符合,测序分析进一步表明所克隆的基因为编码hCacyBP的基因片段。结论成功构建hCacyBP基因亚细胞定位载体,这将为研究结肠癌胞核、胞质内的hCacyBP功能和研究该基因异常高表达与结肠癌发生发展的关系奠定实验基础。; 仇长青赵盈盈冯珊珊王聪杨博余月华刘朋伟翟惠虹; 关键词：基因克隆

二氯化钴致人结肠癌细胞系CacyBP/SIP核转位被引量：5: 2012年; 目的观察和探讨低氧可否引起人结肠癌细胞系CacyBP/SIP核转位。方法用人结肠癌细胞系HCT-116的cDNA序列,用分子克隆法构建过表达CacyBP/SIP的绿荧光慢病毒载体,转染至结肠癌SW480细胞,用CoCl2作为刺激因子,激光共聚焦显微镜和Western blot检测CacyBP/SIP的表达及定位。结果构建了过表达CacyBP/SIP的慢病毒载体,转染至结肠癌细胞,CoCl2刺激前CacyBP/SIP定位和表达主要在细胞胞质,刺激后CacyBP/SIP定位和表达在细胞胞质和胞核。结论 CoCl2刺激后可致CacyBP/SIP核转位。; 谢福利仇长青赵盈盈杨博冯珊珊翟惠虹; 关键词：核转位结肠癌

人结肠癌细胞中CacyBP/SIP核转位差异表达基因的验证被引量：2: 2014年; 目的验证细胞周期聚合酶链反应(PCR)芯片筛选出来的差异表达基因。方法胃泌素刺激的SW480细胞作为实验组,无胃泌素刺激的SW480细胞作为对照组。用蛋白免疫印迹(Western blot)法对胃泌素刺激前后的钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)表达定位进行检测;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对细胞周期PCR芯片筛选出的差异表达基因周期素依赖性蛋白激酶8(CDK8)和细胞周期蛋白依赖性激酶亚基2(CKS2)进行验证。结果胃泌素刺激前CacyBP/SIP主要表达于细胞质,刺激后可同时表达于细胞质和细胞核;同细胞周期PCR芯片结果一致,基因CDK8和CKS2在实验组的表达量较对照组明显上调(P<0.05)。结论胃泌素刺激可使CacyBP/SIP发生核转位;基因芯片筛选出的差异基因大体可靠,对筛选出的差异基因可以进行进一步研究。; 王安萍赵盈盈刘欣翟惠虹; 关键词：细胞周期蛋白质依赖激酶类胃泌素类钙周期素结合蛋白核转位

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赵盈盈