陈日升
- 作品数：10 被引量：145H指数：5
- 供职机构：福建省农业科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 日本鳗鲡败血腹水病病原研究被引量：52
- 2002年
- 20 0 0年 3月中旬 ,自福建仙游某日本鳗鲡 (Anguillajaponica)养殖场患败血腹水症的发病日本鳗鲡的肝脏及腹水处分离到四株细菌 ,经鉴定其中一株为迟钝爱德华氏菌 (Edwardsiellatarda) ,一株温和气单胞菌(Aeromomassobria)和两株嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)溶血试验 ,小鼠攻毒试验显示 ,上述四株细菌都有较强的毒力 ,综合分析 。
- 董传甫林天龙陈日升陈强
- 关键词：日本鳗鲡温和气单胞菌迟钝爱德华氏菌
- 嗜水气单胞菌单克隆抗体的制备及特性分析被引量：18
- 2003年
- 利用杂交瘤单克隆抗体技术制备了AHYT 1和AH105012株嗜水气单胞菌的菌体单抗,筛选出11个能稳定分泌抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的细胞株,并对这些单抗进行了特性分析。经单抗类型测定,这些单抗分属IgM、IgG2α2个亚类,且均具有ELISA反应特性,腹水抗体效价在1∶104～1∶106,其中单抗4G4、2H4、GH9具有免疫荧光特性。ELISA特异性分析结果表明,4G4、2H4、FA4、GH9、CF2为嗜水气单胞菌血清型特异性单抗,4G4、2H4识别同一种血清型的嗜水气单胞菌分离株,而FA4、GH9、CF2却识别另外一种血清型的嗜水气单胞菌,并且与其他血清型的嗜水气单胞菌、温和气单胞菌以及鳗弧菌、爱德华氏菌、克鲁氏耶尔森菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌均不反应。Western blot结果表明,单抗4G4、2H4、FA4所针对的抗原是菌体脂多糖(LPS),且它们所识别的LPS抗原表位不同。菌体单抗研究结果表明,4G4、2H4和GH93株单抗可应用于嗜水气单胞菌的诊断和血清分型。本研究目的旨为建立一种快速诊断鱼类嗜水气单胞菌病的方法和血清分型方法。
- 陈红燕林天龙陈日升杨金先陈强
- 关键词：嗜水气单胞菌单克隆抗体特性分析抗体效价血清分型
- 嗜水气单胞菌β-hemA重组菌的优化培养及其生长曲线的测定被引量：3
- 2003年
- 用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌β-hemA重组菌E.coliDH5α(PCB)基因产物表达量的影响,通过优化培养,选择最佳培养条件,显著提高了β的溶血素基因(β-hemolysisgene,β-hemA)产物的产量。实验结果表明:该重组菌株在100mlTSB(添加0.05%酵母浸提物,1.8μg/mlZnCl2),37℃培养30h收获,其毒素蛋白含量为3258μg,毒素溶血价为17.44hu/μg,而在LB(100ml)和营养肉汤(100ml)中最高蛋白量和溶血活性分别为1260μg,14hu/μg和1199μg,8.22hu/μg。所选择的三个因子中对毒素蛋白质含量影响最大的是培养基,其次是温度;而对溶血素影响最大的则是温度,其次为时间。最佳生长曲线测定结果表明,在培养基预热至37℃的情况下,PCB6h能进入对数期。
- 方勤美林天龙龚晖陈红燕陈日升欧阳岁东
- 关键词：嗜水气单胞菌
- 欧洲鳗夏季暴发性疾病病因及其综合防治研究
- 林天龙俞伏松龚晖陈强杨金先许斌福陈振海陈日升林能锋钱午巧吴城
- 该项目确定了嗜水气单胞菌是欧洲鳗夏季暴发病的主要病原。建立了先进、实用的免疫学和分子生物学快速诊断系列检测技术：制备了抗嗜水气单胞菌的单克隆抗体用于嗜水气单胞菌的精确分型；建立了嗜水气单胞菌的菌体凝集、ELISA、DOT...
- 关键词：
- 鱼源气单胞菌的分离鉴定及血清学调查被引量：18
- 2004年
- 应用生化鉴定和PCR技术对1999～2001年主要分离自福建省患典型败血症鳗鲡的气单胞菌进行精细的鉴定,结果共得到气单胞菌115株,其中嗜水气单胞菌69株,温和气单胞菌29株,豚鼠气单胞菌2株和未定种气单胞菌15株。45株可被典型分型于5个主要血清型;福建鳖源嗜水气单胞菌优势血清型为O∶Ah10501,鳗源气单胞菌分离株主要分布于O∶Ah10501、O∶YT-1、O∶CHS-3和O∶CQ-1等4个血清型。非福建分离株则集中分布在O∶Ah9617(O∶9)。LPSs免疫印迹法既能用于不同血清型菌株脂多糖的结构分析,又能对常规血清学分型结果进行校正,其结果更直观、准确。
- 董传甫林天龙俞伏松陈日升龚晖陈振海
- 关键词：嗜水气单胞菌血清学分型免疫印迹法分离株血清学调查
- RNA干扰禽流感(AI)治疗的新策略被引量：1
- 2005年
- 近年来,禽流感病毒(AIV)在亚洲多个国家的爆发引起了WHO的广泛关注,因此寻求高效低毒病毒治疗药物成为目前研究的重点,许多研究工作表明RNA干扰(RNAi)可以靶向敲降AIV的基因,抑制病毒的复制与增殖,RNAi显示出抗病毒的治疗潜力与良好的应用前景。
- 陈日升俞伏松林天龙
- 关键词：RNA干扰(RNAI)靶向治疗
- 鳗源嗜水气单胞菌β-溶血素基因的克隆及表达被引量：24
- 2003年
- 应用PCR技术,从1株鳗源嗜水气单胞菌ML316中扩增得到β 溶血素基因AHL316HEM,将AHL316HEM克隆到pGEM TEasyVector,经分析验证后重组到pcDNA3.0中,构建了重组质粒PDLH。转化重组质粒PDLH的大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5α能在血琼脂培养皿中形成明显的β 溶血斑,重组菌纯化的胞外产物溶血价为1.28×104HU·mg-1,同时重组菌的胞外产物能被原始菌株的高免血清特异性地识别。结果证实,克隆到鳗源嗜水气单胞菌β 溶血素基因,重组质粒PDLH能够表达具有天然生物学活性的β 溶血素,为构建嗜水气单胞菌核酸疫苗奠定了基础。
- 龚晖林天龙俞伏松董传甫陈日升杨金先陈振海
- 关键词：基因克隆疫苗鱼类暴发性疾病致病菌
- 嗜水气单胞菌β-hemA重组菌的优化培养及其生长曲线的测定被引量：2
- 2004年
- 用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌 β -hemA重组菌E coliDH5α(PCB)基因产物表达量的影响 ,通过优化培养 ,选择最佳培养条件 ,显著提高了 β溶血素基因 (β-hemolysisgene ,β -hemA)产物的产量。实验结果表明 :该重组菌株在 10 0mlTSB(添加 0 0 5 %酵母浸提物 ,1 8μg/mlZncl2 ) ,37℃培养 30h收获 ,其毒素蛋白含量为 32 5 8μg ,毒素溶血价为 17 4 4hu/ μg ,而在LB(10 0ml)和营养内汤 (10 0ml)中最高蛋白量和溶血活性分别为 12 6 0 μg ,14hu/ μg和 1199μg ,8 2 2hu/ μg。所选择的三个因子中对毒素蛋白质含量影响最大的是培养基 ,其次是温度 ;而对溶血素影响最大的则是温度 ,其次为时间。最佳生长曲线测定结果表明 ,在培养基预热至 37℃的情况下 ,PCB 6h能进入对数期。
- 方勤美林天龙龚晖陈红燕陈日升欧阳岁东
- 关键词：嗜水气单胞菌重组菌
- 欧鳗嗜水气单胞菌的分离、鉴定和特性分析被引量：31
- 2001年
- 20 0 0年夏季福建地区许多鳗场养殖的欧洲鳗暴发以脱粘、败血为主要症状的疫病 ,从不同来源的濒死鳗鱼体内分离到 4株细菌。细菌的形态学、生化分析和补充试验结果符合嗜水气单胞菌的各项指标 ,PCR检测 4株分离菌均扩增出特异性的气溶素基因 (aer A) 2 0 9bp片段及脂酶基因 (L ip) 76 0 bp片段 ,进一步证实这些分离菌为嗜水气单胞菌并存在毒力基因。人工造病实验结果表明 ,分离株 M0 0 0 812 0 5 1的菌体纯培养物和胞外产物对昆明小白鼠和欧洲鳗分别具有中等和高度的致病力 。
- 林天龙陈日升董传甫俞伏松杨金先陈红燕陈振海
- 关键词：嗜水气单胞菌欧鳗生理特性生化特性
- 嗜水气单胞菌β-hemA重组菌的优化培养及其生长曲线的测定
- 用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌β-hemA重组菌E.coliDH5α（PCB）基因产物表达量的影响,通过优化培养,选择最佳培养条件,显著提高了β的溶血素基因（β-hemolysisgene,β-h...
- 方勤美林天龙龚晖陈红燕陈日升欧阳岁东
- 关键词：嗜水气单胞菌
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