陈洪岩
- 作品数：310 被引量：857H指数：15
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原的研制及应用被引量：15
- 2009年
- 研制了禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原,检测了该抗原的效价和特异性,并用该抗原对人工感染鸡沉淀抗体的变化以及现地血清样本进行了检测。结果显示,该抗原不与其他主要禽类病原体阳性血清反应,可与1∶8稀释的禽腺病毒Ⅰ型阳性血清反应。对3月龄SPF鸡进行人工感染后,第7 d可检测到沉淀抗体,血清中的沉淀抗体可持续3个月以上。抗原在-20℃条件下可保存2年。经对现地38个鸡场进行检测,其中阳性场14个,阳性率为36.84%,表明我国的禽腺病毒感染率很高。结果证实,研制的禽腺病毒Ⅰ型琼脂扩散抗原敏感、特异,可用于禽腺病毒感染的血清学检测。
- 智海东解生亮杨志王云峰张宇辉王牟平孙建宏陈洪岩
- 关键词：禽腺病毒感染率
- TLR3基因敲除对小鼠免疫功能影响的初步分析
- 目的 通过对TLR3 基因敲除小鼠免疫相关指标分析,研究TLR3 基因敲除对小鼠免疫功能影响,为应用敲除小鼠模型研究TLR3 在病毒感染引发的天然免疫反应中的作用及病毒致病的分子机制奠定基础。方法 PCR、测序分析敲除小...
- 姜雪婷王伟李永青庞中兵孙海阳陈洪岩孟庆文
- 关键词：免疫功能
- 原核系统表达的鸡白细胞介素-10的鼠抗血清体内研究的初步分析
- 2017年
- 目的获得鸡白介素-10(chIL-10)的原核表达产物,制备鼠抗血清,分析与真核系统表达的chIL-10的反应原性。方法采用RT-PCR从经脂多糖(LPS)体外刺激的鸡外周血淋巴细胞中扩增编码成熟IL-10的基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),成功构建原核重组质粒pET-chIL-10;转化至大肠杆菌DH5α中IPTG诱导表达,切下含有重组蛋白的SDS-PAGE胶条,免疫制备鼠抗血清;分别与包含信号肽和去除信号肽的chIL-10真核表达细胞系CHO-euchIL-10F和CHO-euchIL-10M进行间接免疫荧光抗体试验(IFA)和蛋白免疫印迹试验(Western blot),验证有无反应性。结果成功构建chIL-10的原核表达载体pET-chIL-10,获得了高效价的鼠抗血清,能与表达chIL-10的真核细胞系反应。结论原核表达的chIL-10特异性鼠抗血清将能用于体内研究的检测。
- 王丽廷王兴童杨柳彭蔚宇孟兴陈洪岩高文伟韩凌霞
- 关键词：原核表达
- 不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究被引量：3
- 2014年
- 目的探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(Avian leukosis,AL)的抗性差异,为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据。方法选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染白血病病毒A亚群(Avian leukosis virus,ALV-A)RAV-1毒株实验,G8系雏鸡(6羽)作为对照。攻毒后对各鸡系的死亡率、病变率、血液中抗体水平以及外周血淋巴细胞的病毒载量等与抗性相关指标进行动态评估与统计学分析,最终确定抗性较强和较弱的鸡系。结果 G5系病变率和死亡率均明显高于其它攻毒鸡系,G1系最低,G6和G8系居中;G1系在攻毒后第5周开始,抗体效价一直高于其它鸡系,而G5系则最低,并且在攻毒后第8周至11周和第15周至18周,G1系的抗体效价显著高于G5系(P<0.05);G1系的病毒载量在攻毒后第7周至15周,低于其它鸡系,而G5系自攻毒后第9周至13周,极显著高于G1系(P<0.01)。结论 G1系在感染ALV后,死亡率较低,病变轻微,抗体保护力较强,且病毒的增殖较慢,因而其对AL具有较强的抗性,而G5系则相反较为易感。本研究不仅为建立AL抗性较强和较易感的鸡系提供了实验依据,而且对进一步阐明鸡主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex,MHC)多态性与AL抗病性的关系有重要作用。
- 廉传江周刚司昌德文辉强陈洪岩韩凌霞
- 关键词：SPF鸡禽白血病抗性
- 国内外不同体制下实验动物管理机制的实践与启示被引量：3
- 2020年
- 在对国内外不同体制下实验动物管理机制发展形成进行分析的基础上,阐述我国现行管理机制优势,找出存在的不足,提出完善与强化我国实验动物管理体制和机制的对策与建议。
- 刘晓宇卢选成陈洪岩卢胜明李根平贺争鸣
- 关键词：实验动物
- 常州市金坛区畜禽免疫抗体监测的情况分析
- 2016年
- 为检验春防畜禽免疫效果,查找目前免疫工作中存在的问题,为开展疫病综合防控提供依据,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的726份猪血清样品进行猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)、O型口蹄疫(FMD)的抗体检测,对采集的135份羊血清样品进行O型、亚洲Ⅰ型FMD和小反刍兽疫(PPR)的抗体检测;利用血凝抑制试验(HI)对采集的933份鸡血清样品进行高致病性禽流感(HPAI)、新城疫(ND)的抗体检测。结果表明:HPAI、ND、HP-PRRS免疫效果最好,平均免疫抗体合格率基本达到100%;HP-PRRS平均免疫抗体合格率超过99%;PPR、CSF、猪FMD免疫效果较好,平均免疫抗体合格率分别为93.33%、88.84%、88.84%;羊FMD免疫效果良好,O型和亚洲Ⅰ型FMD平均免疫抗体合格率分别为80.00%和82.22%。说明常州市金坛区2015年度春防畜禽免疫情况总体良好,但在免疫程序、动物饲养管理以及免疫技术等方面仍需改进。
- 蔡文博吴少莲徐荣军陆则基周娟杨文卫韩凌霞陈洪岩
- 关键词：免疫高致病性猪蓝耳病小反刍兽疫高致病性禽流感新城疫
- 畜禽疫病防控用SPF猪的开发被引量：5
- 2018年
- 本文就SPF猪在畜禽疫病防控研究中的重要性和国内外研究现状进行了阐述,分析了目前存在的问题,介绍了培育标准化SPF猪种群常用的方法,并探讨了SPF猪的应用前景,旨在为畜禽疫病防控研究用实验动物的开发提供一定的理论指导。
- 高彩霞辛畅陈洪岩
- 关键词：SPF猪
- 水貂阿留申病毒VP2基因TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：1
- 2020年
- 目的建立一种方便、灵敏的水貂阿留申病毒(AMDV)荧光定量PCR检测方法,从而实现临床样品中AMDV的快速定量检测。方法根据AMDV的结构蛋白VP2的基因保守区域设计一对特异性引物和探针,优化PCR反应条件,建立TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,绘制标准曲线,并进行特异性、敏感性和稳定性分析。结果建立的标准曲线在1.0×10^2拷贝/μL至1.0×10^8拷贝/μL之间具有良好的线性关系,相关系数(r^2)大于0.994。该方法检测的灵敏度为10^2拷贝/μL,且与犬细小病毒、犬腺病毒、犬瘟热病毒和水貂病毒性肠炎病毒均无明显交叉反应,特异性良好。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于3%,重复性良好。利用该方法对417份临床组织样品进行检测的结果显示,中国部分地区的AMDV阳性率为81.5%。结论本研究建立了一种重复性、特异性和敏感性良好的AMDV荧光定量PCR检测方法,可用于AMDV的临床检测和流行病学调查。
- 闫文卓陆涛峰周洁赵丽丽陈洪岩
- 关键词：水貂阿留申病水貂阿留申病毒VP2
- RIG-I遗传修饰鸡模型的抗病毒天然免疫机制研究
- 研究背景：RIG-I是识别病毒双链RNA的一种模式受体,在启动天然免疫反应中发挥重要作用。鸡缺失RIG-I,家禽转基因技术远远落后与哺乳动物,限制了家禽抗病毒天然免疫机制研究手段。本研究构建了RIG-I遗传修饰鸡模型,在...
- 孟庆文周长良王伟张雅春陈洪岩
- 关键词：RIG-I天然免疫蛋白质组转录组
- 猪氨基肽酶N病毒结合受体核心区对TGEV在ST细胞中复制影响的研究
- 2023年
- 为研究与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)结合的猪氨基肽酶N(pAPN)受体核心区对TGEV复制以及细胞功能的影响,本研究检索并分析pAPN与TGEV的结合位点,结果显示,敲除pAPN aa668~aa963对其酶活性无影响。因此,利用CRISPR/Cas9技术构建pAPN与TGEV结合位点敲除细胞系,经PCR和western blot鉴定结果显示,正确构建一株敲除pAPN aa668~aa963的ST细胞系,即敲除pAPN 15-21外显子,命名为KO-ST-15。采用CCK-8和细胞划痕方法检测KO-ST-15细胞的增殖和细胞迁移活性,结果显示,敲除pAPN 15-21外显子对ST细胞增殖和迁移活性均无显著影响。利用RT-qPCR和IFA检测KO-ST-15感染TGEV后病毒复制拷贝数和N蛋白的表达,结果显示,敲除pAPN 15-21外显子可极显著抑制TGEV在ST细胞系中的复制(P<0.001)。利用RT-qPCR检测KO-ST-15感染TGEV后炎症相关基因转录水平变化,结果显示,TGEV感染后KO-ST-15中的IL-6、IL-8和NLRP3(NOD-like receptor protein 3)mRNA转录水平无显著变化,但RIG-I和MDA5的转录水平显著上调(P<0.05)。上述结果首次表明,敲除pAPN15-21外显子能够极显著抑制TGEV在ST细胞中的复制,但细胞KO-ST-15的正常生理功能无变化,TGEV不能进入敲除pAPN 15-21外显子的细胞中引起炎症反应,该结果为进一步培育抗病育种猪提供参考依据和候选方案。
- 史鑫琪季朝阳陈晓彤张子博张鑫郭慧娟田璐王洪峰陈洪岩王靖飞冯力夏长友孟庆文
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒ST细胞
