鞠小丽
- 作品数：12 被引量：39H指数：4
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：江苏省科技厅基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 幽门螺杆菌47kDa微孔蛋白基因的克隆表达及特性鉴定
- 2007年
- 目的对人幽门螺杆菌（H．pylori）编码47kDa外膜微孔蛋白基因omp47克隆表达及特性鉴定，探索研制H．pylori疫苗的新途径。方法培养和收集H．pylori标准菌株NTTCll637及临床菌株，采用酚：氯仿抽提、纯化基因组DNA。设计上下游引物，并以该基因组为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增omp47基因片断。将目的基因和与克隆载体PGEM-T连接后，转化至EcoliDH5a及BL21，碱裂解提取质粒经BamHl和Xhol双酶切鉴定并进行序列分析。重组蛋白采用IPTG诱导表达后，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）鉴定、镍亲和层析纯化检测抗原活性。结果经酶切、测序分析表明，插入的基因片断为1284bp，编码427个氨基酸。与GenBank公布的H．pylori标准株26695、43504及J99序列比对，核苷酸同源性高达94%～96％，编码氨基酸同源性96%～99%。经SDS-PAGE检测，电泳图谱上显示一条相对分子量为47kda的新生蛋白带。Westernblot检测表明重组蛋白有较好的抗原性。结论成功克隆了外膜微孔蛋白OMP47的编码基因，为H．pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础。
- 郝渭滨邵世和鞠小丽李良菊王华
- 关键词：幽门螺杆菌蛋白纯化
- 幽门螺杆菌外膜蛋白hopX基因克隆表达及生物信息学分析
- 2008年
- 目的：构建幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）hopX外膜蛋白编码基因的重组质粒,并进行生物信息学分析,探索筛选Hp疫苗的新途径。方法：应用PCR技术从Hp基因组扩增hopX外膜蛋白编码基因片段,TA克隆后测序分析,用信息学软件分析其物理化学特性,并构建表达载体hopX-pQE30转化E.coliM15,IPTG诱导表达,SDS-PAGE及Western blot鉴定表达蛋白。结果：测序分析表明hopX基因全长为1284bp,与Gene Bank公布的其他Hp菌株的基因序列同源性为96%～97%,氨基酸同源性为97%～99%,软件预测显示有多个明显的具有抗原活性的结构域。SDS-PAGE检测表明,47kD处有一新生的蛋白带,Western blot检测重组蛋白具有良好的抗原活性。结论：首次获得HpNCTC11637菌株hopX基因,其表达产物为外膜蛋白生物学功能和疫苗的研究奠定了基础。
- 鞠小丽邵世和郝渭滨
- 关键词：幽门螺杆菌生物信息学分析
- PGC-1α研究进展被引量：13
- 2018年
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1（peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1,PGC-1）是核激素受体过氧化物酶体增殖物激活受体γ（atherosclerosis peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ）的转录共激活因子,最早是在小鼠棕色脂肪组织（brown adipose tissues,BATs）中被发现.
- 周峥嵘唐伟红鞠小丽邵根宝沈蓉黄攀
- 关键词：炎症代谢恶性肿瘤
- 基础医学整合课程体系构建与学生评价被引量：11
- 2022年
- 目的:分析临床医学本科专业基础医学整合课程体系的建设方案和成效,为培养高素质医学人才提供理论参考。方法:通过专家反复论证制定基础医学整合课程方案,方案实施后,采取便利抽样法选取临床医学专业300名本科生进行纸质问卷调查。结果:问卷调查发现已完成基础医学相关课程学习的286名本科生中90%对基础医学整合课程体系有一定程度的了解,还有10%的本科生对整合课程体系不了解;调查还发现约80%本科生认同整合课程教学有利于提高基础课程学习兴趣、利于系统掌握基础医学知识、利于书本知识联系临床诊疗和深入学习基础知识。结论:基础医学整合课程有利于提高学习效果,培养学生自主学习的能力,但课程体系整合和实施方案还有待进一步完善。
- 黄攀王琪任才芳周峥嵘许潇张娣鞠小丽邵根宝龚爱华
- 关键词：专业基础课整合课程
- 血红素加氧酶-1在消化系统疾病中的作用被引量：1
- 2016年
- 血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是血红素分解代谢过程中的限速酶。HO-1及其降解产物(CO、胆绿素及Fe^(2+))能够通过各种途径调节机体免疫功能、抑制炎症反应和细胞凋亡,在消化系统疾病中发挥潜在的保护作用。该文综述了HO-1基因的表达和调节及其在胃肠道和肝病中的作用。
- 黄攀安珂张庄鞠小丽罗凯陶梦灵莫宇熙周峥嵘
- 关键词：血红素加氧酶-1CO胆绿素
- EIF2AK2和NLRP3相互作用影响细胞分泌IL-1β的研究被引量：5
- 2016年
- 目的研究真核细胞翻译起始因子2AK2(EIF2AK2)蛋白对Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症体激活及细胞分泌IL-1β的影响。方法在HEK-293细胞中,通过转染凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和促白细胞介素-1β(pro-IL-1β)基因构建NLRP3炎症体,并检测EIF2AK2蛋白过表达对细胞分泌炎症性细胞因子IL-1β的影响;通过免疫共沉淀研究EIF2AK2蛋白和NLRP3蛋白相互作用。最后在人单核THP-1细胞中通过siRNA干扰验证EIF2AK2对IL-1β分泌水平的影响。结果在HEK-293细胞中,过表达EIF2AK2蛋白能激活NLRP3炎症体后诱导细胞分泌IL-1β,并且IL-1β分泌水平随EIF2AK2表达水平提高而增加。免疫共沉淀结果显示EIF2AK2蛋白能和NLRP3蛋白发生相互作用。THP-1细胞中siRNA干扰抑制EIF2AK2表达后发现细胞分泌IL-1β减少。结论 EIF2AK2蛋白能调控NLRP3炎症体的激活从而影响细胞分泌促炎症因子IL-1β。
- 鞠小丽王强
- 关键词：蛋白相互作用
- 幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统HP0527-C基因的克隆表达及其生物学功能的初步研究被引量：1
- 2008年
- 为克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 hp0527-c基因,探讨其生物学功能。设计引物扩增,T-A克隆,测序正确后构建表达载体pET-28a-hp0527-c,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后以Ni2+-NTA柱获得纯度为98%重组蛋白。经Western blot鉴定正确后,免疫新西兰大白兔获得了较高滴度的多克隆抗体;将重组蛋白作用于BGC-823细胞,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达增高;同时用MTT法来检测重组蛋白对细胞增殖的影响,结果表明其活性呈现一定量的时间和剂量依赖性。已成功克隆了HP0527-C的重组蛋白,初步探讨了其与细胞之间的相互作用,为进一步阐明H.pylori致病机制奠定了基础。
- 母润红邵世和马方王华崔蕾蕾钟桥鞠小丽董苏荣
- 关键词：幽门螺杆菌克隆表达细胞因子细胞增殖
- 程序性细胞死亡Pyroptosis最新研究进展被引量：6
- 2017年
- Pyroptosis是最近发现的一种依赖于半胱氨酸蛋白-1(Caspase-1)的程序性细胞死亡方式。这种死亡方式和细胞凋亡及其它程序性死亡在细胞学形态、分子机制上有着本质的区别。其主要特征为依赖于Caspase-1剪切激活和促炎症性细胞因子白介素(IL)-1β和IL-18的释放。而Caspase-1的活化受到胞内蛋白复合物炎症体的调控。该炎症体由NLRs蛋白(如NLRP3或NLRC4)、接头蛋白ASC以及Caspase-1构成。Pyroptosis最初是在伤寒沙门氏菌感染小鼠巨噬细胞的模型中被发现,随后研究显示Pyroptosis在细菌和病毒感染、自身免疫性疾病以及肿瘤发生中都起到关键性作用。对这种程序性死亡的深入研究将有助于对细菌感染防治和某些疾病的致病机制研究提供帮助,并最终为临床应用提供新思路。
- 鞠小丽陈亮陈克平王强
- 关键词：程序性细胞死亡PYROPTOSISCASPASE-1
- 幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表达、纯化及初步鉴定
- 2008年
- [目的]构建幽门螺杆菌(H.pylori)NCTC11637菌株36kDa(OMP36)外膜蛋白基因原核表达系统,探索研制H.pylori疫苗的新途径。[方法]培养和收集H.pylori NCTC11637菌株,提取基因组DNA,PCR扩增目的基因片断。将其克隆到T载体并测序,再将目的基因克隆入PET32a(+),构建重组表达载体PET32a-OMP36。转化E.coliBL21后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE鉴定、镍亲和层析纯化、Western blot检测表达蛋白。[结果]测序分析表明,插入的基因片断为987bp,表达的蛋白的相对分子质量(M r)约为36kDa,并显示具有良好的抗原性。SDS-PAGE检测表明,表达量占细菌总蛋白的37%,镍亲和层析纯化率约92%。Western blot检测表达蛋白具有良好的抗原活性。[结论]成功克隆了外膜蛋白OMP 36kDa的编码基因,其表达产物OMP36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H.py-lori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础。
- 鞠小丽邵世和郝渭滨董苏荣崔蕾蕾
- 关键词：幽门螺杆菌外膜蛋白基因表达蛋白纯化
- 幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagT基因的克隆表达及其重组蛋白对SGC-7901细胞增殖和分泌细胞因子功能的影响被引量：3
- 2008年
- 【目的】初步研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）NCTC 11637 cagT（HP0532）基因对SGC-7901细胞增殖和白细胞介素-8（IL-8）分泌的影响。【方法】应用PCR技术从H．pylori基因组DNA中扩增cagT编码基因片段，将其定向插入pQE30载体中，双酶切鉴定筛选阳性克隆。测序分析确认后，IPTG诱导表达，表达蛋白以Ni^2＋-NTA柱进行纯化，并经Western blot鉴定，纯化的蛋白作用于SGC-7901细胞，提取细胞总RNA，RT-PCR扩增IL-8，并用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响。【结果】成功克隆了cagT基因，全长843bp（GenBank登录号为EF114758），编码280个氨基酸，与GenBank公布的其他H．pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97％-99％。工程菌诱导后SDS-PAGE显示新生表达蛋白带，相对分子质量约为32kDa，经Ni^2＋-NTA柱纯化后可获得纯度为98％重组蛋白。经透析复性后的蛋白（终浓度10μg／mL）作用于SGC-7901细胞后，可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达。不同浓度CagT蛋白与SGC-7901细胞作用，细胞增殖的程度随着蛋白浓度的增加逐渐降低，细胞的增殖受到抑制。【结论】CagT蛋白可刺激SGC-7901细胞IL-8的表达，并抑制细胞增殖，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 崔蕾蕾邵世和李良菊王华母润红鞠小丽董苏荣钟桥
- 关键词：幽门螺杆菌白细胞介素-8
