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米曲霉(Aspergillus oryzae)果胶酸内切水解酶(PGA)在原核系统中重组表达被引量：1: 2007年; 果胶酶具有广阔的商业用途,在食品工业上主要用于果汁和酒类的澄清、提高植物油的提取率、提高水果的硬度和植物纤维脱胶。米曲霉(Aspergillusoryzae)一直用于传统发酵食品的生产,自然条件下其果胶酶的产量较低。文献报道的果胶酶的重组表达成功的例子较少,且活性较低。通过RT-PCR的方法,获得不含信号肽的果胶酸内切水解酶A(polygalacturonaseA,PGA)的cDNA,PGAcDNA连入pET-28a(+)载体,构建pET-28a(+)-pga质粒。pET-28a(+)-pga转化Turner(DE3)placⅠ细胞,得到转化子pET-28a(+)-pga-Turner(DE3)placⅠ,首次实现了米曲霉PGA在大肠杆菌系统中过表达,进一步对PGA在大肠杆菌系统中表达的条件进行了研究。在37℃、220r/min条件培养pET-28a(+)-pga-Turner(DE3)placⅠ细胞,OD600至0·8左右时,用500μmol/Lisopropylβ-D-thiogalactogalactopyranoside(IPTG)进行诱导表达,在15℃和170r/min条件下继续培养24h,表达效果最好,相对于每毫升培养基而言,产酶可达到70u/mL,是米曲霉自然条件产酶量的87·5倍,远优于文献报道的重组表达的PGA酶活。; 张宇玲赵庆新朱泓孙静韩丰敏袁生; 关键词：米曲霉原核表达

产果胶酸裂解酶的耐盐碱性菌株分离及培养条件被引量：7: 2007年; 从江苏省沿海滩涂国家丹顶鹤自然保护区盐碱土样中,分离得到一株果胶酸裂解酶产生菌ZQX8,经形态、生理生化特征和16SrDNA鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.该株菌的最佳培养条件为37℃、pH6.5、0.1～0.25mol/LNaCl,但在pH7～9之间,0.5～1.0mol/LNaCl浓度下仍然能较好的生长,表现出一定的耐盐性和耐碱性.该菌分泌的胞外果胶酸裂解酶的最佳底物为果胶酸,在培养基中酶活达到4U/mL.该果胶酸裂解酶在40～60℃,pH8～10的碱性条件下酶活较高,在600mmol/LNaCl存在的条件下,也能保持较高的酶活,显示该酶具有一定的耐碱性和耐盐性.; 赵庆新韩丰敏; 关键词：盐碱土枯草芽孢杆菌耐盐性耐碱性

嗜盐细菌的分离、鉴定与应用研究: 对采自江苏省盐城市射阳盐场和灌东盐场的样品进行嗜盐细菌的分离，共得到了31株嗜盐细菌。首先对分离自射阳盐场的12株菌的菌体和菌落表型特征、生长条件、生理生化特征和部分菌株的基因组DNA的G+Cmol％含量等进行研究;其次...; 韩丰敏; 关键词：嗜盐细菌细菌分离细菌鉴定; 文献传递

1株产耐盐碱高温淀粉酶嗜盐菌的筛选和鉴定被引量：7: 2008年; [目的]研究极端嗜盐菌SYM菌株的形态和生理生化特点及其所产胞外淀粉酶性质。[方法]从江苏省盐城市射阳盐场筛选得到1株极端嗜盐菌SYM菌株,对其进行形态、生理生化和分子水平的鉴定,并对其产生的淀粉酶部分酶学性质进行研究。[结果]SYM菌株能在饱和NaCl浓度下生长,菌体细胞壁含有嗜盐古细菌特征性的甘油二醚衍生物,菌体形态为球状,菌落显橙红,经生理生化和16 SrD-NA基因序列同源性分析鉴定为嗜盐古细菌嗜盐深红菌属。SYM菌株淀粉酶最佳反应条件为1.15 mol/L NaCl、pH值7.0和温度70℃。NaCl浓度为2.65 mol/L时,酶活可以保持最高酶活的61%;80℃时,酶活可保持最高酶活的69%;pH值13.0时,酶活可保持最高酶活的76%。[结论]SYM菌株产生的淀粉酶是一种能耐受高盐高碱高温的极端酶。; 韩丰敏赵庆新袁生蔡信之; 关键词：嗜盐菌淀粉酶酶活

一株嗜盐菌产耐盐碱高温淀粉酶的初步研究: 从江苏省射阳盐场分离到一株嗜盐古细菌SYM菌株,杆状,运动,好氧,革兰氏阴性,菌落圆形、较小、光滑、橙红色,能在饱和NaCl条件下生长,含有嗜盐古细菌特征性的甘油二醚衍生物。经生理生化测定和16SrRNA序列同源性分析等...; 韩丰敏赵庆新蔡信之袁生; 文献传递

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韩丰敏