高健潜
- 作品数：12 被引量：9H指数：2
- 供职机构：佛山科学技术学院生命科学学院动物医学系更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金佛山市科技发展专项基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- CSFV对猪树突状细胞表面分子表达的影响
- 本研究通过分离猪外周静脉血，用贴壁法获得单核细胞，体外联合应用重组猪源GM-CSF和IL-4诱导培养DC。用CSFV感染和灭活CSFV作用于DC，用流式细胞术检测猪DC表面MHC-Ⅱ-DR、CD1和CD172a的表达，分...
- 王伟芳沈海燕赵明秋琚春梅高健潜陈立军陈金顶
- 关键词：猪瘟病毒病毒感染免疫学检验树突状细胞
- 文献传递
- 鸡Mx基因的原核表达及表达蛋白抗病毒活性初步研究被引量：1
- 2011年
- 将鸡Mx基因克隆入pET-32a载体,筛选鉴定后将重组阳性质粒转化到大肠埃希菌株BL21进行诱导表达,表达产物用Western blot鉴定,并经镍亲和层析法纯化及透析复性,得到的蛋白用微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性。结果显示,构建的载体经PCR扩增得到长度为2 118 bp的特异片段,测序结果证实与鸡Mx基因同源性99.95%,Western blot结果显示在78 ku处检测到特异性蛋白条带,微量细胞病变抑制试验结果显示,表达产物经8倍和256倍稀释后可分别保护50%鸡胚成纤维细胞免受新城疫病毒(NDV)和水疱性口炎病毒(VSV)的感染。结果表明,成功表达了鸡Mx蛋白,且表达产物具有一定的抗DNV和VSV活性。
- 陈胜锋王丙云高健潜陈志胜计慧琴陈金顶
- 关键词：MX蛋白原核表达抗病毒活性
- 鸭胚胎干细胞分离与鉴定被引量：1
- 2010年
- 采用药勺法分离仙湖3号肉鸭鸭胚的胚盘细胞,并以鸭胚成纤维细胞作为饲养层,培养鸭胚胎干细胞。在此基础上,通过对体外培养的鸭胚胎干细胞形态观察,碱性磷酸酶染色(AKP)以及胚胎阶段表面特异性抗原(SSEA-1)免疫组化等方法,分离与鉴定鸭胚胎干细胞。结果表明传至第3代的鸭胚胎干细胞经AKP和SSEA-1鉴定均为阳性,AKP染色为深蓝色,SSEA-1染色呈绿色荧光,表明培养至第3代的鸭胚胎干细胞仍保持干细胞未分化特性,具有胚胎干细胞的特征。结果提示本试验分离、培养的鸭胚盘细胞为鸭胚胎干细胞。
- 高健潜张春红王丙云陈金顶
- 关键词：胚胎干细胞
- 鸡Mx基因的原核与真核表达及其产物抗病毒活性的研究
- Mx基因是Lindenmann在研究A2G小鼠对流感病毒具有天然抵抗力这一现象时发现，因能抵抗黏液病毒而命名为Mx(Myxovirus-resistant)基因，即抗黏液病毒基因。
Mx蛋白属于大GTPase的Dy...
- 高健潜
- 关键词：MX蛋白原核表达真核表达抗病毒活性
- 胶体金对小鼠外周血血清和脾脏淋巴细胞诱导白介素2含量的影响被引量：2
- 2007年
- 实验设计了4种直径和3种剂量12个组合的胶体金对小白鼠进行注射处理;采用放射性免疫法,测定了外周血血清和脾脏淋巴细胞诱导白介素2含量,结果表明:不同直径和剂量的CG对机体有不同程度的影响,其中直径15 nm,10 nm的CG的0.3 mL和0.2 mL剂量组可显著提高外周血血清和脾脏淋巴细胞诱导白介素2含量,0.1 mL剂量组虽有提高但不显著;直径5 nm,20 nm各个剂量组效果的波动较大,中、高剂量组对4项指标起促进作用但不显著,低剂量组则没有促进作用。证明了15 nm和10 nm中高剂量的胶体金可显著提高外周血血清和脾脏淋巴细胞诱导白介素2含量。
- 娄华田野高健潜邓森源
- 关键词：胶体金淋巴细胞白细胞介素2
- 真核表达鸡Mx蛋白抗新城疫病毒活性的研究
- 为检测真核表达鸡Mx蛋白抗新城疫病毒的活性,本试验将转染pEGFP-Mx质粒的293T细胞培养48 h,超声波裂解细胞,提取细胞裂解液,纯化及稀释后处理鸡胚成纤维细胞,12 h后感染100 TCID的新城疫病毒,培养2～...
- 王丙云陈胜锋高健潜陈志胜计慧琴
- 文献传递
- 原核表达鸡Mx蛋白抗VSV及NAD病毒活性的研究
- 为检测原核表达的鸡Mx蛋白的抗病毒活性,本试验将原核表达的鸡Mx蛋白经亲和层析纯化及透析复性后,进行4倍或10倍梯度稀释,处理离体培养的鸡胚成纤维细胞,同时设置不加Mx蛋白溶液的细胞对照组和病毒对照组;细胞培养12 h后...
- 陈胜锋王丙云高健潜陈志胜计慧琴
- 文献传递
- 鸡Mx蛋白在293T细胞中的表达及其抗病毒活性被引量：2
- 2011年
- [目的]研究鸡Mx蛋白在293T细胞中的表达并检测其抗病毒活性。[方法]将鸡的Mx基因克隆入pEGFP-C1载体,经筛选鉴定后磷酸钙法转染293T细胞,并对转染细胞进行荧光分析以及RT-PCR与Western blot鉴定,同时提取细胞蛋白质,微量细胞病变试验检测其抗新城疫病毒的活性。[结果]试验构建的pEGFP-C1-cMx真核表达载体转染293T细胞后,在胞浆中可检测到绿色荧光,RT-PCR与Western blot结果进一步证实,pEGFP-C1-cMx可在293T细胞中表达,微量细胞病变试验显示,表达的融合蛋白可保护鸡胚成纤维细胞免受新城疫病毒感染。[结论]试验构建的pEGFP-C1-cMx表达载体可在293T细胞中表达具有抗新城疫病毒活性的鸡Mx蛋白。
- 陈胜锋王丙云高健潜陈志胜计慧琴陈金顶
- 关键词：真核表达抗病毒
- 猪瘟病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 通过对GenBank中注册的CSFV序列进行比对分析,针对CSFV Npro/C基因中的保守区域,设计合成了一套RT-LAMP引物,应用含有Npro/C基因的阳性质粒株对RT-LAMP引物进行验证。在成功扩增出特异片段的基础上,用CSFV RNA优化RT-LAMP反应体系和条件,建立了CSFV的可视化RT-LAMP快速检测方法。对建立的方法进行特异性和敏感性试验,结果显示,所建立的方法能够特异地检测出CSFV RNA,检测PRRSV、FMDV和JEV RNA均为阴性,并且可检测低至0.1pg/μL浓度的CSFV RNA。
- 赵明秋王伟芳王波康艳梅高健潜陈金顶
- 关键词：猪瘟病毒RT-LAMP
- 免疫胶体金对小鼠巨噬细胞和NK细胞活性的影响被引量：1
- 2008年
- 实验设计了4种直径和3种剂量12个组合的胶体金对小白鼠进行注射处理;采用MTT法和LDH短程释放法,测定了腹腔巨嗜细胞活性和脾脏NK细胞活性,结果表明:不同直径和剂量的CG对机体有不同程度的影响,其中直径15 nm,10 nmCG的0.3 mL和0.2 mL剂量组可显著提高腹腔巨噬细胞活性及脾脏NK细胞杀伤活性,0.1 mL剂量组虽有提高但不显著;直径5 nm,20 nm各个剂量组效果的波动较大,中、高剂量组对四项指标起促进作用但不显著,低剂量组则没有促进作用。证明了15 nm和10 nm中高剂量的胶体金可显著提高小鼠巨噬细胞功能和脾脏NK细胞活性。
- 娄华田野高健潜邓森源李建亮
- 关键词：胶体金
