魏然
- 作品数：46 被引量：94H指数：5
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 易致污染的支原体在固体培养基上的形态特征被引量：3
- 2015年
- 目的：研究不同条件下、不同生长期易致污染的支原体在固体培养基中的形态特征。方法通过改变支原体菌体浓度、培养时间及培养基组成，观察支原体在固体培养基中的形态变化。结果支原体菌体浓度小于103 cfu／mL时，培养至2～3天后可在固体培养基中形成典型的“油煎蛋”状形态，以蔗糖作为碳源培养支原体会导致葡萄糖发酵型支原体（肺炎支原体）不能在固体培养基中形成典型菌落，当使用牛血清代替马血清为支原体提供外源胆固醇时，猪鼻支原体在固体培养基中不能形成典型菌落。结论支原体的不同生长期、菌体浓度、培养基的组成都会使易致污染的支原体在固体培养基上的形态发生变化。
- 傅元欣魏然宣俊文于佳王轶峰姜宝芹刘晓凡
- 关键词：肺炎支原体固体培养基
- 流行性乙型脑炎病毒减毒株SA14-14-2E基因稳定性研究被引量：3
- 2006年
- 为研究乙脑病毒减毒株SA14-14-2 E蛋白基因稳定性,将乙脑病毒减毒株SA14-14-2在原代地鼠肾细胞(PHK)上传至18代,应用RT-PCR分别扩增PHK6代、PHK7代、PHK8代、PHK13代、PHK18代E蛋白基因并测序后,与Genebank中乙脑病毒减毒株SA14-14-2(D90195)进行比较分析。PHK6、PHK7、PHK8代病毒与D90195 E蛋白核苷酸和氨基酸序列完全相同。PHK13、PHK18代病毒与D90195E蛋白核苷酸序列同源性分别为99.8%、99.7%,与D90195E蛋白氨基酸序列同源性分别为99.6%、99.4%。各代次病毒E蛋白与减毒相关氨基酸未发生改变,同时所有突变的氨基酸均非SA14原有的,故不是恢复性突变。结果表明乙脑病毒减毒株SA14-14-2的遗传学特性稳定,从分子水平证明乙脑病毒减毒株SA14-14-2及其生产的疫苗具有安全性。
- 高雪军赵雅静刘晨鸣邹勇魏然郑学刚朱莉萍
- 关键词：E基因RT-PCR
- 麻疹减毒活疫苗检定用Vero细胞代次对病毒滴度稳定性试验的影响
- 2015年
- 目的 了解麻疹减毒活疫苗检定用Vero细胞代次的稳定性范围.方法 用DMEM培养液将Veto细胞137代连续传至173代,检测其细胞活力,并观察Vero细胞的形态,接种麻疹减毒活疫苗参考品进行病毒滴定及热稳定性试验.结果 170代以下Vero细胞形态良好,细胞活力在85％以上,麻疹减毒活疫苗病毒滴度热稳定性试验的结果：137～ 169代Vero细胞活力及原麻疹减毒活疫苗病毒滴度热稳定性试验无统计学差异（P＞0.05）,170代以上代次的Vero细胞活力及原麻疹减毒活疫苗热稳定性试验有明显统计学差异（P＜O.01）.结论 169代以下Vero细胞为检定用麻疹减毒活疫苗最佳细胞代次.
- 周丽娟魏然刘晓凡冯德杰黄丽坤崔焰孙晓琳姜宝芹
- 关键词：麻疹减毒活疫苗VERO细胞热稳定性试验
- DTP-rHB联合疫苗的研制
- 1999年
- 本文对制备ＤＴＰ—ｒＨＢ联合疫苗的实验条件进行了初步探索，并优选最佳配方制备的三批连续中试产品经安全、效力试验测定，结果表明，联合疫苗中各组分均能达到相应规程要求，抗原间无干扰作用，相容性好。联合疫苗中的ｒＨＢ免疫应答较单价苗明显提高（Ｐ＜ ０．０５），有增强作用。ＨＢｓＡｇ含量以２０ μｇ／ｍ ｌ为宜，稳定性试验证明，该联合疫苗质量稳定、安全、有效。
- 任魁孙述学李玉陈爱荣魏然宋继萍郑菊梅何长民
- 关键词：百日咳白喉破伤风乙型肝炎联合疫苗
- 炭疽噬菌体国家参考品的研制被引量：1
- 2013年
- 目的研制炭疽鉴别试验及炭疽活疫苗纯菌检查用炭疽噬菌体国家参考品。方法制备炭疽噬菌体参考品,建立噬菌体参考品效价质量标准,组织4个实验室对该参考品进行协作验证,并对参考品稳定性进行分析。结果研制的炭疽噬菌体国家参考品,其效价质量标准应不低于1.0×108PFU/ml;经协作验证,该参考品可有效鉴别3批炭疽活疫苗;该参考品在4℃条件下稳定性较好,37℃稳定性较差。结论研制的炭疽噬菌体国家参考品已被国家有关部门正式批准,可用于炭疽鉴别试验及炭疽活疫苗纯菌检查。
- 魏东李恪梅肖丽华梁昊宇裴明玉庄新海魏然翟雷王国治
- 关键词：炭疽噬菌体效价参考品
- 离子色谱法测定脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中的1,4-丁二胺含量被引量：1
- 2015年
- 目的采用离子色谱法测定脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中的1,4-丁二胺含量,并对方法进行验证。方法采用Ion Pac CS17(4 mm×250 mm)分析柱,上样量25μl,以10 mmol/L甲基磺酸淋洗液进行等度洗脱,流速1.0 ml/min,电导检测器检测,Chromeleon色谱工作站记录并分析数据。对该方法进行专属性、线性、准确性、重复性验证,并确定该方法的最低检出限和最小定量限。结果该方法检测1,4-丁二胺专属性较强;在40μg/L^1 mg/L范围内,1,4-丁二胺浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,r2均大于0.999;向A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物原液中分别添加低、中、高浓度的1,4-丁二胺,重复测定5次的回收率在97.23%~104.94%之间,重复测定10次的相对标准偏差(RSD)在0.8%~1.8%之间;该方法的最低检出限为5μg/L(信噪比3∶1),最小定量限为40μg/L(信噪比10∶1)。结论离子色谱法简便、快速,灵敏度高,可用于检测脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中1,4-丁二胺的含量。
- 冯潇马庆华傅元欣魏然高雪军
- 关键词：离子色谱法
- HPLC法测定A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量被引量：1
- 2011年
- 建立了高效液相色谱法测定A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖的含量。样品经离心除去多糖后,采用阳离子交换柱分离,外标法定量分析。该法线性相关系数大于0.9999,回收率为98.8%,成品测定的CV值为1.2%(<2%),该法定量准确,重复性好,适于对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量进行快速检测。
- 雒丽红冯潇魏然朱莉萍
- 关键词：乳糖多糖疫苗
- 疫苗中残余CDAP检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- 为了对多糖活化剂———1-氰基-4-二甲基氨基-吡啶四氟化硼(CDAP)的残余水平进行有效监控,本研究建立了基于高效阳离子交换层析的简便易行的检测方法,进行验证后的结果表明,该法具有良好的专属性、准确度、精密度,检出限可低至16μg/L,在20～100μg/L的范围内具有良好的线性。
- 马庆华傅元欣冯潇魏然高雪军朱莉萍
- 关键词：结合疫苗
- 鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗浓度测定通用参考品的研制被引量：3
- 2015年
- 目的将现用鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗3套浓度测定参考品整合成一套通用参考品。方法确定通用参考品吸光度值,从3套鼠疫、布氏菌及炭疽疫苗浓度测定用参考品共9个浓度中选取代表性3个浓度参考品;利用现用3种活疫苗浓度测定用参考品的线性方程,计算通用参考品所代表各种疫苗的浓度;制备参考品并进行质量控制;观察参考品的长期稳定性;组织3个实验室进行协作验证。结果确定通用参考品吸光度值为0.350、0.494、0.665;确定通用参考品所代表各种疫苗浓度;完成通用参考品的制备,各项检定符合规定;对4℃冷藏保存参考品进行稳定性研究,变异系数小于2.0%;经3个实验室协作验证,各实验室使用2种参考品的测定结果误差均小于2.0%。结论在现有参考品的基础上整合成一套鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗分光光度法浓度测定通用参考品,并为以后建立分光光度法细菌浓度测定通用参考品奠定基础。
- 魏东尤明强裴明玉庄新海翟雷魏然王国治李恪梅
- 关键词：分光光度法
- 生物制品中支原体快速检测方法的建立被引量：1
- 2004年
- 目的建立生物制品中污染原体的快速、准确的检测方法 ;方法通过比较目前国内支原体测方案 ,利用正交试验设计选择最优化培养和检测条件 ;结果更新了支原体培养基中某些成份 ,确定了各组份的含量 ,检测的灵敏度比现行规程方法有所提高。结论新确立的牛心消化液液体培养基方法能够快速检测绝大多数的支原体 ,改午后培养基灵敏度高 ,检测周期短 ,可以用于生物制品中支原体的快速检测。
- 魏然张学锋刘红高红任雅萍魏嵬高雪军程夷
- 关键词：生物制品支原体灵敏度培养基
