黄华
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学医药卫生更多>>
- 组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶重组大肠杆菌发酵条件研究被引量：3
- 2006年
- 目的:对重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)进行了发酵条件研究。方法:在摇瓶和5L发酵罐中研究了(NH4)2SO4和葡萄糖浓度对质粒的分离稳定性及青霉素G酰化酶表达的影响。结果:该工程菌质粒具有分离不稳定性,培养基中无(NH4)2SO4时发酵过程中pH和糊精水解生成葡萄糖的浓度变化较小,细胞前期(0h-12h)的生长速率降低,质粒分离稳定性和青霉素G酰化酶的表达水平提高。发酵过程中维持低葡萄糖水平可以限制细胞的生长速率,提高质粒稳定性和促进青霉素G酰化酶的合成。采用混合碳源发酵,发酵培养基含糊精2g/L,12h后以1g/L.h恒速流加葡萄糖至35h,控制流加过程葡萄糖浓度0.1g/L左右,平均比生长速率为0.06h-1,发酵结束时质粒稳定性为86%,青霉素G酰化酶的表达水平达23 000U/L。结论:重组大肠杆菌组成型表达青霉素G酰化酶的研究对工业生产有一定指导意义。
- 黄华苟斌全王永红储炬庄英萍张嗣良袁中一
- 关键词：青霉素G酰化酶质粒稳定性葡萄糖
- 重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素g酰化酶发酵条件研究
- 青霉素酰化酶(pga)是医药工业上的一个关键酶，它不但可以用来生产6-氨基青霉烷酸(6-apa)，7-氨基脱乙酰氧头孢烷酸(7-acda)，而且还可以合成新的半合成青霉素和头孢霉素。粪产碱杆菌(alcaligenesfa...
- 黄华
- 关键词：青霉素G酰化酶质粒稳定性葡萄糖
- 文献传递网络资源链接
- 增强组成型重组大肠杆菌质粒稳定性的发酵策略被引量：1
- 2008年
- 质粒稳定性是影响基因工程菌外源蛋白表达的重要因素,同时,外源蛋白的表达又影响着质粒稳定性。与诱导型表达系统相比,在组成型表达系统中,由于外源蛋白的持续表达,导致细胞代谢负担加重,质粒稳定性的控制更加困难。通过对组成型大肠杆菌DH5α/pKKFPGA发酵过程的优化,增强了质粒稳定性,发酵结束时,仍然维持在85%左右,表达产物粪产碱杆菌青霉素酰化酶的酶活单位达到23 384 U.L-1。
- 苟斌全张嗣良储炬王永红庄英萍黄华李震袁中一
- 关键词：质粒稳定性
