龚春梅
- 作品数:76 被引量:216H指数:7
- 供职机构:深圳市慢性病防治中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学一般工业技术更多>>
- 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1在苯并(a)芘诱导人支气管上皮细胞DNA甲基化改变中的作用被引量:7
- 2011年
- 目的 观察苯并(a)芘[benzo(a)pyrene,B(a)P]诱导体外细胞DNA甲基化水平改变,探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP1]在该过程中的作用.方法 以1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、30.0 μmol/L浓度B(a)P分别处理人支气管上皮细胞(16HBE)及其PARP1缺陷细胞(16HBE-shPARP1)72 h.采用免疫荧光和高效毛细管电泳检测其基因组DNA整体甲基化水平改变,同时动态监测PARP1和DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferases 1,DNMT1)表达的变化.结果 16HBE和16HBE-shPARP1细胞基因组整体甲基化百分比(mCpG%)分别为(4.04±0.08)%和(9.69±0.50)%.经5-氮杂脱氧胞苷(DAC)处理72 h后,mCpG%值分别下降为(3.15±0.14)%、(6.07±0.54)%.经B(a)P染毒72 h后,16HBE细胞基因组mCpG%值[B(a)P浓度由低到高]分别为(5.10±0.13)、(4.25±0.10)、(3.91±0.10)、(4.23±0.27)、(3.70±0.15)、(3.08±0.07);16HBE-shPARP1细胞基因组mCpG%值(浓度由低到高)分别为(10.63±0.60)、(13.08±0.68)、(9.75±0.55)、(7.32±0.67)、(6.90±0.49)、(6.27±0.21).两种细胞不同处理组间mCpG%差异有统计学意义(F值分别为61.67、60.91,P值均<0.01).16HBE细胞各剂量组[B(a)P浓度由低到高]PARP1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的141.0%、158.0%、167.0%、239.0%、149.0%、82.9%,差异均有统计学意义(t值分别为11.45、17.32、32.24、33.44、20.21、9.87,P值均<0.01);16HBE-shPARP1细胞各剂量组(浓度由低到高)PARP1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的169.0%、217.0%、259.0%、323.0%、321.0%、256.0%,差异有统计学意义(t值分别为9.06、15.92、22.68、26.23、37.19、21.15,P值均<0.01).当B(a)P染毒剂量达5.0 μmol/L后,16HBE细胞各剂量组(浓度由低到高)DNMT1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的125.0%、162.0%、275.0%、233.0%,差异有统计学意义(t值分别为12.74、24.92、55.1
- 陶功华龚春梅杨淋清刘庆成刘建东吴德生胡辛楠黄海燕刘建军柯跃斌庄志雄
- 关键词:DNA甲基化
- 结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变被引量:4
- 2010年
- 目的 探讨结晶型硫化镍(NiS)对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响.方法 分别以0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2结晶型NiS处理人支气管上皮细胞系(16HBE)24 h,隔天再次进行相同处理,共处理3次;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理72 h的正常细胞为阳性对照.应用免疫荧光法和SssI甲基转移酶法定性、定量分析结晶型NiS处理细胞和恶性转化细胞(NSTC)基因组DNA总体甲基化的变化.结果 结晶型NiS处理细胞DNA甲基化免疫荧光的强度均有不同程度降低,转化细胞DNA甲基化免疫荧光的强度明显降低.定量分析结果显示,对照组基因组总体甲基化率(mCpG%)为(81.9±7.3)%,0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2的结晶型NiS处理3次的细胞(NiS0.25、NiS0.50、NiS1.00、NiS2.00)基因组总体mCpG%则分别为(77.9±6.2)%、(75.3±6.8)%、(59.5±4.9)%、(67.4±5.1)%.经单因素方差分析显示,不同组间总体mCpG%差异有统计学意义(F=124.95,P<0.01),两两比较发现NiS1.00和NiS2.00组与对照组相比,差异均有统计学意义(t值分别为7.64、4.89,P值均<0.01);恶性转化细胞(NSTC1、NSTC2)基因组总体mCpG%分别为(46.2 ±4.1)%、(43.6±4.3)%,低于对照组,差异有统计学意义(t值分别为12.79、13.56,P值均<0.01).结论 结晶型NiS诱发细胞恶性转化过程中,整体基因组DNA甲基化水平降低.
- 杨淋清纪卫东陶功华张文娟龚春梅周丽刘建军柯跃斌庄志雄
- 关键词:DNA甲基化荧光免疫测定细胞转化硫化物
- 一种甲基化CpG位点的应用以及试剂盒
- 本申请涉及生物医学检测技术领域,提供了一种甲基化CpG位点的应用以及试剂盒。本申请甲基化CpG位点作为生物标志物在诊断和/或预后评估糖尿病视网膜病变中的应用,甲基化CpG位点选自以下甲基化CpG位点中任何一种或两种以上的...
- 龚春梅洪文旭杨慧徐远飞胡黎明李雅琪彭爱宇
- 河南省农村64名艾滋病患者生存质量评价被引量:25
- 2006年
- 目的了解河南省艾滋病(AIDS)患者生存质量现状,为采取相应措施提高生存质量提供参考依据。方法采用多阶段抽样的方法,利用WHO的QOL-HIV量表对64名艾滋病患者进行入户调查。结果64名AIDS患者生存质量6个维度的得分及与常模比较的结果分别为,生理维度:10.84±2.68(t=12.71,P=0.001);心理维度:11.74±2.11(t=8.50,P=0.001);独立性维度:10.96±2.47(t=2.98,P=0.004);社会关系维度:13.09±2.16(t=3.12,P=0.003);环境维度:12.15±1.61(t=0.032,P=0.974);精神支柱和个人信仰维度:10.45±2.52(t=1.89,P=0.063)。结论AIDS患者在生理、心理、独立性和社会关系等4个维度的生存质量得分低于常模,在环境与精神支柱个人信仰2个维度的生存质量得分与常模比较差异无统计学意义。
- 谢婧施学忠王芳龚春梅常亮乐梦芝
- 关键词:艾滋病影响因素
- 深圳市2321例企事业单位体检人群体成分的调查研究被引量:8
- 2016年
- 目的了解近期深圳市机关和企、事业单位员工体成分的变化规律和超重、肥胖现状。方法采用便利取样法对2013年7月-2014年1月期间在深圳市某体检中心体检的深圳市机关和企、事业单位员工2321例进行体成分(骨矿物质含量、内脏脂肪区域、体脂肪、体脂百分比、腹部肥胖程度、身体水分含量、去脂体重及身体不同部位体脂百分比)和身高、体重的调查。结果男、女的超重率分别为46.41%和18.94%(标化超重率分别为44.02%和14.51%),差异有统计学意义(χ^2=201.01,P=0.000)。男女的肥胖率分别为12.13%和3.57%(标化肥胖率分别为11.11%和2.63%),差异有统计学意义(χ^2=48.45,P=0.000)。骨矿物质含量、内脏脂肪区域、体脂肪、体脂百分比、腹部肥胖程度、身体水分含量及去脂体重随着体重的增加而增加并且在正常体重、超重及肥胖组间差异有统计学意义(P=0.000)。男、女骨矿物质量都是在30~40岁的时候最高,分别为(3.03±0.46)kg和(2.27±0.30)kg,且男女差异有统计学意义(P=0.000)。内脏脂肪区域在同一性别不同年龄段之间差异有统计学意义(P=0.000),女性各年龄段中50~59岁组体脂百分比[(34.24.4-5.39)%]和40~49岁身体水分含量[(28.53±3.77)%]最高;男性体脂百分比[(27.08±5.01)%]在60~岁年龄组最高;男性(0.91±0.06)和女性(0.90±0.05)腹部肥胖程度在60岁~组开始没有差异。男、女性内脏脂肪区域随着年龄的增长而增大,但同年龄的男女之间差异无统计学意义。身体各部位的体脂百分比在正常体重与超重组之间差异无统计学意义,但两组与肥胖组差异有统计学意义(P=0.000)。结论深圳市机关和企、事业单位员工超重率、肥胖率随年龄逐渐升高,体成分随着体重的增加而增加。
- 刘小立周继昌孙仕强深圳市麒麟山疗养院许佳章周小英黄昌华深圳市麒麟山疗养院何山刘灿徐健龚春梅
- 关键词:体脂百分比体质指数去脂体重
- 双酚A对小鼠胚胎干细胞两种干性因子表达水平的影响
- 目的探讨双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠胚胎干细胞的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响。方法采用小鼠胚胎干细胞系S6,小鼠胚胎干细胞暴露于BPA24h,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,CCK-8法检...
- 杨淋清罗凌凤吴德生龚春梅黄海燕周丽杨细飞刘建军庄志雄
- 关键词:双酚A小鼠胚胎干细胞OCT4SOX2
- 文献传递
- 一种基于qPCR分析大鼠硒蛋白基因表达谱的方法
- 本发明适用于生物技术领域,提供了一种基于qPCR分析大鼠硒蛋白基因表达谱的方法。该方法包括以下步骤:分别设计大鼠各硒蛋白基因以及内参基因Actb、Gapdh的mRNA的qPCR引物,除不具内含子的基因外,其他所述各基因的...
- 周继昌刘小立朱玉梅郑世杰龚春梅莫俊銮许佳章
- 文献传递
- 纳米二氧化硅对HaCaT细胞谷胱甘肽还原酶表达及活力的影响被引量:2
- 2010年
- 目的探讨经不同粒径纳米二氧化硅处理后,HaCaT细胞内谷胱甘肽还原酶(GR)的表达及其活力的变化。方法将对数生长期HaCaT细胞经15μg/ml的15、30、100nm纳米二氧化硅处理24h后,采用实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)检测GR基因mRNA的表达水平,采用Westernblotting检测GR蛋白的表达水平,采用试剂盒检测GR活力变化。结果不同粒径纳米二氧化硅对GR基因的mRNA水平具有明显影响,纳米二氧化硅粒径越小,mRNA表达水平越低,但均低于对照组;GR蛋白表达量随纳米二氧化硅粒径增大而增大,且15、30nm纳米二氧化硅抑制GR表达,100nm纳米二氧化硅促进GR表达;GR活力随纳米二氧化硅粒径的增大而升高。结论纳米二氧化硅可能通过影响GR的表达及酶活力的变化促进氧化应激反应。
- 张兵杨细飞王晓梅刘建军何浩伟龚春梅蒋英芝郑波庄志雄
- 关键词:纳米二氧化硅谷胱甘肽还原酶氧化应激
- 短期暴露于纳米SiO2对HaCaT细胞基因组DNA甲基化的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探讨纳米SiO2对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响。方法分别以2.5、5、10μg/ml纳米SiO2溶液和10μg/ml微米级SiO2处理人皮肤表皮细胞系(HaCaT)24h;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理48 h的10μg/ml组为阳性对照,并设立溶剂对照组。应用高效毛细管电泳(HPCE)定量分析纳米SiO2处理细胞24h后,基因组DNA总体甲基化的变化,用Q-PCR和Western Blot方法检测甲基化相关蛋白mRNA和蛋白的表达变化,并用DNA甲基化转移酶活性试剂盒检测DNA甲基化转移酶的活性。结果 HPCE定量分析结果显示纳米SiO2可引起HaCaT细胞总体甲基化程度降低,呈剂量依赖性关系;与正常细胞相比,微米SiO2以及2.5、5和10μg/ml纳米SiO2组分别降低37.8%、43.9%、54.9%和52.8%,差异有显著性(P<0.05);对照组5-aza-dC处理后使HaCaT细胞甲基化程度减少27.3%。各组酶的蛋白表达与mRNA表达水平及DNMTs活性变化具有相同的变化趋势,经纳米SiO2处理的HaCaT细胞,DNMT1、DNMT3a及MBD2表达随着纳米SiO2剂量的上升而下降,DAC组表达水平最低。结论纳米SiO2能引起HaCaT细胞整体基因组DNA甲基化水平降低,可能与DNA甲基化转移酶的酶活性降低有关。
- 龚春梅杨淋清陶功华刘庆成刘建军庄志雄
- 关键词:DNA甲基化纳米SIO2
- 分子信标探针及引物对、GC基因SNPs位点检测方法
- 本发明属于基因检测技术领域,具体涉及一种分子信标探针及引物对、GC基因SNPs位点检测方法。该分子信标探针包括依次连接的上游序列、核心序列和下游序列,核心序列为:5’‑[G/T]GCCACACCCA[A/C]‑3’或5’...
- 周继昌朱玉梅刘小立冯铁建杨慧龚春梅莫俊銮车晓玲