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跨膜丝氨酸蛋白酶4诱导放疗后肝细胞癌转移的机制研究被引量：5: 2011年; 目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶4（transmembrane protease serine 4,TMPRSS4）在放疗后残余肝细胞癌转移中的作用及机制.方法建立具有肺转移潜能的人肝癌裸鼠原位模型,模拟临床分割放射治疗.将放疗后残余肝癌组织切除后再种植于正常裸鼠肝脏.6周后处死,测量放疗后再种植肝癌体积,计算其肝内移灶数目及肺转移率.HE染色观察放疗后肝癌组织学形态.Westernblot及RT-PCR检测放疗前后肝癌组织内上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关基因及TMPRSS4的表达.结果对照组肝癌切除再种植后42 d,其肿瘤大小及肺转移率分别为（2.25士0.52）cm3和66.7％,而放疗后2d和放疗后30 d残癌切除再种植组,肿瘤大小分别为（1.61±0.51）cm3 （P＜0.05）和（2.60±0.61）cm3 （P＞0.05）,肺转移率分别为12.5％（P＜0.05）和100％（P＜0.05）.对照组及放疗后2d残癌切除再种植组无肝内转移灶,放疗后30 d残癌切除再种植组肝内转移灶数为18±8.05（P＜0.05）.放疗后30 d残癌组织EMT相关蛋白N-cadherin、Vim-entin及TMPRSS4、SIP1的表达显著高于对照组及放疗结束后2d残癌组织,而E-cadherin表达则显著降低.结论放疗后残癌的转移潜能先降低后增强.放疗后残癌TMPRSS4表达增加进而诱导EMT的发生可能是后期转移潜能增强重要原因之一.; 李涛曾昭冲王鲁邱双键智绪亭周健炜于海华汤钊猷; 关键词：肝细胞放疗上皮间质转化

放射后肝癌细胞MMP-2表达、活性的变化及其对侵袭性的影响被引量：10: 2007年; 目的探讨放射后肝癌细胞侵袭潜能的变化及其机制。方法以不同剂量(0、4、8Gy)高能 X 线照射人肝癌低转移潜能细胞株 MHCC97L。明胶酶谱法检测放射后24、48、72、96 h 细胞培养上清液金属蛋白酶(MMP)-2活性,细胞免疫荧光法检测放射后24、48和72 h 细胞内 MMP-2蛋白表达,Transwell 法测定放射后48和96 h 细胞的侵袭能力。结果放射后细胞 MMP-2蛋白分泌及活性增强并与放射剂量及时间相关,8 Gy 放射后48 h MMP-2蛋白活性最高,达到对照组的2倍。0、4、8 Gy 放射后48 h 穿过 transwell 小室的细胞数分别为7.2±1.9、13.2±2.7和31.2±7.2(P<0.05),放射后96 h 组间差异无统计学意义。结论放射后肝癌细胞侵袭潜能短暂增强,放射诱导细胞 MMP-2分泌及活性增强是侵袭性增强的原因之一。; 李涛曾昭冲王鲁张振宇于海华邱双键汤钊猷; 关键词：肝细胞放疗侵袭性金属蛋白酶

小剂量阿司匹林协同干扰素-α抑制肝细胞肝癌生长转移的实验研究被引量：10: 2012年; 【摘要】目的探讨小剂量阿司匹林协同干扰素-α（IFN-α）抑制肝细胞癌（hepatocellulαr carcinoma，HCC）生长转移的作用及机制。方法培养具有肺转移潜能的人MHCC97L肝癌细胞。将MHCC97L肝癌组织块种植于BALB／c nu／nu雄性裸鼠肝脏，建立人肝癌裸鼠原位模型。以不同剂量组合的阿司匹林和IFN-α作用于荷瘤裸鼠，测量肿瘤体积，计算肺转移灶数目及肺转移率。用MTT及明胶酶谱实验检测阿司匹林对MHCC97L细胞增殖及金属蛋白酶2（matrix metalloprotein ases 2，MMP-2）活性的影响。用Western Blot及ELISA检测细胞及血清MMP-2及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白水平。结果对照组肿瘤体积为（3．12±0．85）am。，肺转移率为66．7％。大剂量阿司匹林[45mg／（kg·d）]治疗组肿瘤体积为（1.89±0．88）cm。（P〉0．05），肺转移率为58．3％（P〉0．05）。而大剂量IFN-α[1．5×10^7／（kg·d）]治疗组、大剂量IFN-α＋大剂量阿司匹林治疗组、小剂量IFN-α[7．5×10^6／（kg·d）]＋小剂量阿司匹林[15mg／（kg·d）]治疗组肿瘤体积分别为（0．69±0．40）cm^3、（0．55±0．31）cm^3、（0．40±0．43）cm^3，均显著低于对照组（P〈0．05），肺转移率均为0（P〈0．05）。2mmol／L阿司匹林对MHCC97L细胞增殖无显著影响（P〉0．05），但可抑制其MMP-2的活性及VEGF的水平。小剂量IFN-α＋小剂量阿司匹林治疗组裸鼠血清MMP-2及VEGF显著降低（P〈0．05）。结论小剂量阿司匹林可协同IFN-α抑制HCC生长转移，抑制MMP-2和VEGF的活性和表达是其重要作用机制之一。; 李涛智绪亭周建炜董兆如曲辉于海华王鲁汤钊猷; 关键词：阿司匹林干扰素-Α

外周血中调节性T细胞表达与肝细胞肝癌的临床联系及肝癌切除对其的影响被引量：7: 2008年; 目的:探讨肝细胞肝癌(简称肝癌)患者外周血中调节性T细胞的表达状态、临床意义以及肝癌切除对其表达的影响。方法:利用流式细胞仪检测肝癌患者及健康对照者外周血中调节性T细胞群的表达频数,分析其与肝癌病理特征及肿瘤TNM分期的关系,并进一步观测肝癌切除前后外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞频数的动态变化。结果:肝癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+、CD4+Foxp3+、CD4+CD25+T细胞频数均较健康对照组显著增加。调节性T细胞群表达和肿瘤数目、血管侵犯及TNM分期均明显相关。肝癌切除术后第1天调节性T细胞频数较术前明显下降;术后1周时调节性T细胞表达出现最高峰。结论:肝癌患者调节性T细胞群表达增加;调节性T细胞可能主要在肝癌病程演进的较早阶段发挥作用;肝癌切除可能降低肿瘤相关性调节性T细胞的表达。; 于海华邱双健李涛王鲁刘彬彬吴志全樊嘉汤钊猷; 关键词：肝细胞肝癌调节性T细胞手术切除

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于海华

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