何淑雅
- 作品数：161 被引量：456H指数：10
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 依托省级实验教学示范中心,培养医学生创新实践能力被引量：2
- 2013年
- 实验教学示范中心是培养学生创新实践能力的重要平台,学生创新实践能力的提升是高等教育教学质量提高的重要标志。结合创建省级实验教学示范中心的实践,从实验教学理念、构建三层实验教学体系、优化实验教学模式、创新实验教学平台管理和开放实验教学方法等方面进行了详细阐述。
- 肖方竹黄波李乐唐艳何淑雅
- 关键词：实验教学科研创新能力教学体系
- cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端延伸快速分离全长cDNA序列被引量：2
- 2002年
- 建立一种cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端快速扩增分离人类新基因全长cDNA序列的新技术。以文库载体序列与待扩增目的基因片段为模板各设计引物进行热启动聚合酶链反应扩增 ,从人胎肝cD NA文库中获得氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞泡沫化过程中差异表达序列标签片段 (FRG4 )的全长cDNA序列 ,聚合酶链反应产物克隆到pGEM T载体中 ,并测序鉴定 ,从而成功获得FRG4的全长cDNA序列。
- 闾宏伟杨向东何淑雅杨永宗
- 关键词：CDNA聚合酶链反应热启动序列标签
- BTF红色荧光蛋白表达载体的构建及其在大鼠血管平滑肌细胞中的表达和定位研究
- 2014年
- 目的构建Bcl-2相关转录因子1（BTF）与红色荧光蛋白（RFP）融合表达载体并在大鼠血管平滑肌VSMC细胞中表达，为进一步研究BTF的相互作用蛋白及作用机制奠定实验基础。方法以人体外周血白细胞cDNA为模板，PCR扩增Btf基因，插入红色荧光蛋白表达载体pDsRed-N1中．构建重组表达载体pDsRed-N1-Btf，转染大鼠血管平滑肌VSMC细胞，通过激光共聚胶显微镜观察其在转染细胞中的表达及定位。结果DNA测序、酶切鉴定的结果显示，红色荧光蛋白表达载体pDsRed-N1-Btf构建成功，且序列正确。转染后经激光共聚胶显微镜观察到VSMC细胞中有红色荧光。且BTF主要定位于细胞质中。结论成功构建了pDsRed-N1-Btf表达载体，并主要定位于VSMC的胞质中，为后期研究BTF的相互作用蛋白及其与相互作用蛋白之间的作用机制奠定了良好的基础。
- 马云王昌博杨满君秦凌雪李斌元何淑雅
- 关键词：红色荧光蛋白融合蛋白
- 生物化学双语教学的实践与探讨被引量：5
- 2007年
- 马云何淑雅李斌元张秋菊虞佳
- 关键词：教育教学生物化学双语
- 耐辐射奇球菌pprM基因回补株的构建与鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的 构建耐辐射奇球菌prM基因缺失回补菌株,为进一步研究PprM蛋白的功能奠定实验基础.方法 设计并合成HA-pprM基因（HA为流感病毒血凝素）全长的引物,以无突变的pGEX-6p-1-pprM载体为模板,PCR扩增出携带NdeⅠ酶切位点的HA-pprM基因全长,经NdeⅠ酶切后,与pRADK载体连接并转化大肠杆菌,经培养、提取质粒及纯化后,采用酶切鉴定以及基因测序方法确认插入序列的正确性;采用CaC12法将构建好的重组质粒pRADK-HA-pprM转化到耐辐射奇球菌pprM基因缺失的菌株中,通过Western blot验证HA-PprM融合蛋白的表达.结果 构建的重组质粒pRADK-HA-pprM经NdeⅠ酶切鉴定结果符合目的条带大小（438 bp）,测序结果显示插入的寡核苷酸序列及方向与预期的一致,Western blot结果显示HA-PprM融合蛋白的相对分子质量约为13 000.结论 笔者成功构建了重组质粒pRADK-HA-pprM,为进一步研究与PprM蛋白相互作用的靶DNA的筛选奠定了良好的基础.
- 付亮何淑雅潘宝平曾洋肖方竹田帅卢先州黄波马云
- IL-12对电离辐射损伤小鼠血清学指标的影响
- 2013年
- 目的研究白介素-12(IL-12)对辐射损伤小鼠血清学指标的影响,探讨其在辐射损伤中的修复作用及机理。方法 32只实验小鼠分为正常对照组、单纯辐射损伤组、辐射组+空载体组、辐射组+IL-12组。ELISA检测血清干扰素-γ(IFN-γ)和IL-4的含量;全自动生化分析仪检测其肝肾功能相关生化指标及血糖含量。结果辐射组+IL-12组血清中IFN-γ含量高于单纯辐射损伤组及辐射组+空载体组,差异均有统计学意义(P=0.001,P<0.05);而血清中AST、ALT活性低于单纯辐射损伤组及辐射组+空载体组,差异均有统计学意义(P值分别为<0.001、0.001、0.003和0.016,P<0.05);血清中IL-4含量、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)浓度及血糖含量差异均无统计学意义(P值分别为0.928、0.964、1.000、1.000、0.680和0.437,P>0.05)。结论 IL-12能有效提高辐射损伤小鼠的IFN-γ水平,并促进其血清中转氨酶活性的降低。
- 李乐唐双阳何淑雅黄波唐艳肖方竹张炜龙望远
- 关键词：IL-12免疫生化
- 抗人血栓调节蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2006年
- 为了制备特异性抗人血栓调节蛋白(human thrombomodulin,hTM)的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),利用脂质体Lipofectamine 2000将包含hTM全长cDNA序列的重组表达质粒pThr402转染CHO细胞,经G418筛选及相关鉴定后获得高效稳定表达hTM的CHO-TM5细胞株。将CHO-TM5细胞直接免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术,通过细胞ELISA (cellular enzyme-linked immunoabsorbent assay,CELISA)筛选出阳性克隆后,将杂交瘤细胞株腹腔注射Balb/c小鼠诱生腹水。用CELISA、流式细胞术、免疫组织化学染色法及免疫印迹法对所获McAb的特异性进行鉴定。我们获得了1株可稳定分泌抗hTM的McAb的杂交瘤细胞株NH-1,其亚型为IgGl,McAb腹水效价为1×10^(-6),腹水抗体含量为20 mg/ml。NH-1对相应抗原具有较高的组织特异性,在体内与正常组织的交叉反应少,对人脐静脉内皮细胞、CHO-TM5有特异性结合反应,说明NH-1可特异性识别天然的hTM分子,为进一步应用此McAb进行hTM生物学功能及临床意义研究提供了基础。
- 郭紫芬何淑雅朱炳阳严鹏科李斌元廖端芳
- 关键词：血栓调节蛋白单克隆抗体
- 脆性X综合征的研究进展
- 2003年
- 简述了脆性X综合征的发病机理、临床特征、遗传特征及其诊断方法 ,着重介绍了脆性X综合征发病机制的分子研究及其产物FMRP生物学功能研究的进展。
- 马云何淑雅李斌元
- 关键词：脆性X综合征基因诊断FMR-1基因FMRP
- 不同民族人群FMR1基因CGG重复序列检测与分析被引量：6
- 2007年
- 目的检测和分析脆性X综合征致病基因FMR1 CGG重复序列在汉族和壮族人群中的多态性分布。方法采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对1060例汉族人（男280人，女780人）和283例壮族人（男85人，女198人）FMR1基因CGG重复序列进行分析，并用Southern印迹技术对结果进行了验证。结果汉族人群中共检测到33种等位基因，其中CGG重复序列范围为6～43，壮族人群共检测到27种等位基因，CGG重复序列范围为6～57，两类人群中最常见的等位基因分别为28和29。结论应用PCR扩增技术进行了FMR1基因的大面积筛查，中国汉族和壮族人群中FMR1基因CGG重复序列变异分布略有差异。
- 马云何淑雅李斌元苏娇喻长顺刘慧婷徐向红
- 关键词：脆性X综合征FMR-1基因
- 耐辐射奇球菌pprM DNA结合域功能分析预测与基因敲除重组体的构建被引量：1
- 2013年
- 通过生物信息学分析发现,pprM基因含有冷休克DNA结合域。利用Overlap PCR方法获得pprM基因DNA结合域缺失的基因片段pprMΔCSD后,酶切扩增的片段和自杀质粒空载体pk18mobsacB,并将目的基因片段与自杀质粒载体连接构建重组载体pk18mobsacB-pprMΔCSD,将重组子转化大肠杆菌JM109感受态,筛选出阳性克隆,酶切及测序鉴定。成功构建pprM DNA结合域基因敲除重组体,且生物信息学分析预测结果显示pprM DNA结合域与耐辐射奇球菌抗辐射功能相关。
- 杨杰苏泽红李斌元马云肖潇范美婷李伟王秋岩何淑雅
- 关键词：耐辐射奇球菌重叠延伸PCR
