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何红伟
作品数:
2
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供职机构:
首都师范大学生物系
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发文基金:
北京市科技新星计划
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
席慧
首都师范大学生物系
周霞
首都师范大学生物系
高音
首都师范大学生物系
万平
首都师范大学生物系
刘凤华
首都师范大学生物系
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首都师范大学
作者
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何红伟
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刘凤华
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万平
1篇
高音
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周霞
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席慧
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1篇
2004
1篇
2002
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大肠杆菌二氢叶酸还原酶基因folA的克隆、表达纯化及分子间交联
2004年
利用PCR技术从大肠杆菌DH5α中获取二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA。用限制性内切酶BamHI与PstI将该片段插入到克隆载体pUC18上,DNA测序鉴定目的基因。而后再将该基因亚克隆到表达载体pTrcHisC上,IPTG诱导表达重组蛋白。在非变性条件下,用TALON金属亲和层析树脂纯化含组氨酸标记的重组DHFR。纯化产物在热诱导条件下行SDS-PAGE分析,除23000大小的单体外,还出现了交联的二聚体和多聚体;而当反应体系中含有还原剂β-巯基乙醇时,二聚体和多聚体都被减弱。推断蛋白质在热诱导条件下二级结构发生改变而产生交联,并且有二硫键的参与。
刘凤华
席慧
高音
周霞
万平
何红伟
关键词:
大肠杆菌
二氢叶酸还原酶
基因
二硫键
克隆
蛋白质二硫键异构酶分子间异肽键交联的研究
蛋白质分子间异肽键交联是生物体内普遍存在的一种蛋白质分子间交联形式.目前对它的研究主要集中在对谷氨酰胺转移酶和泛素-蛋白水解酶复合体途径的研究两个方面.我们以溶菌酶、核糖核酸酶A和蛋白质二硫键异构酶为模型在体外详细地研究...
何红伟
关键词:
蛋白质二硫键异构酶
热变性
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