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原发性肝癌组织及细胞系中DNMT mRNA表达的检测及意义被引量：4: 2013年; 目的检测原发性肝癌组织及细胞系Hep3B、HepG2中甲基化转移酶(DNMT)mRNA的表达,分析乙型肝炎病毒(HBV)感染与DNMT mRNA表达之间的关系。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测44例原发性肝癌组织及2种肝癌细胞系中DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B、GAPDH基因mRNA表达水平。结果 32例血清HBV标志物阳性患者肝癌组织中DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA表达水平明显高于12例血清HBV标志物阴性患者肝癌组织(P<0.05)。DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B mRNA在HBV相关细胞系Hep3B中相对表达分别为1.26±0.15、0.76±0.15、1.26±0.20、0.66±0.13,在非HBV相关肝癌细胞系HepG2中的相对表达分别为0.64±0.11、0.62±0.12、0.48±0.12、0.36±0.10,Hep3B细胞系中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表达高于HepG2细胞系(P<0.01)。结论 HBV相关原发性肝癌组织和肝癌细胞系中存在DNMT mRNA表达增高;HBV感染可能刺激DNMT mRNA的表达,进而促进抑癌基因的甲基化。; 高波李海平余宗涛吕军张吉才; 关键词：乙型肝炎病毒荧光定量聚合酶链反应

VEGF逆转miR-200b促进非小细胞肺癌增殖的作用: 2017年; 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在miR-200b抑制非小细胞肺癌(NSCLC)增殖中的作用及机制。方法选择2013年2月至2014年5月在本院经手术治疗的65例NSCLC患者的肿瘤组织,qRT-PCR检测NSCLC组织中miR-200b与VEGF的表达,并统计分析NSCLC组织中miR-200b与VEGF表达的相关性;常规培养A549、H460及16HBE细胞,qRT-PCR检测各组细胞中miR-200b与VEGF的表达;将常规培养的A549细胞随机分为四组,即miR-200b mimics+vector、miR-200b mimics+VEGF组、miR-200b inhibitor+scramble组、miR-200b inhibitor+VEGF-si RNA组,其中miR-200b mimics+vector组与miR-200b inhibitor+scramble组作为阴性对照,采用MTT法检测各组吸光度值(OD值)。结果 qRT-PCR结果显示,miR-200b在NSCLC组织的表达水平为(0.682±0.106),VEGF在NSCLC组织的表达水平为(2.731±0.597),相关性分析显示在NSCLC组织中miR-200b与VEGF的表达呈负相关(r=-0.514,P<0.001);miR-200b在A549、H460细胞中的表达显著低于16HBE细胞,差异有统计学意义(P=0.000),而VEGF在A549、H460细胞中的表达明显高于16HBE细胞,差异有统计学意义(P=0.000);MTT结果显示,miR-200b mimics+VEGF组A549细胞在48 h、72 h的细胞增殖率明显高于miR-200b mimics+vector组,miR-200b inhibitor+VEGF-si RNA组A549细胞在48 h、72 h的细胞增殖率明显低于miR-200b inhibitor+scramble组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-200b与VEGF在NSCLC组织及细胞中表达呈负相关;VEGF逆转miR-200b对NSCLC细胞增殖的作用。; 罗卫民张军余宗涛林称意郭家龙; 关键词：非小细胞肺癌血管内皮生长因子增殖

宫颈癌中耐药基因的表达及其临床意义被引量：1: 2011年; 目的探讨多药耐药基因LRP、GST-π在宫颈癌中的表达特点及临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测LRP、GST-π基因在10例正常组织和52例宫颈癌组织中的mRNA表达情况。结果在宫颈癌组织中LRP、GST-π的阳性率表达分别为67.3%和59.6%。10例正常组织中LRP不表达,GST-π表达1例。宫颈癌组织中LRP、GST-π的表达高于正常组织(P<0.05)。两者的表达均与患者的淋巴转移、肿瘤分化程度、临床分期无关(P>0.05)。LRP、GST-π之间的表达无相关性。结论 LRP、GST-π在宫颈癌中较高的阳性率表达可能共同参与宫颈癌对顺铂的固有耐药机制,为协助临床选择化疗方案可能具有一定的指导意义。; 高波李海平陶建蜀张吉才余宗涛李莉; 关键词：宫颈肿瘤聚合酶链反应耐药基因

5-氮-2'-脱氧胞苷对肺癌A549细胞凋亡及14-3-3σ表达的影响被引量：2: 2015年; 目的:探讨5-氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺癌A549细胞凋亡及抑癌基因14-3-3σ表达的影响。方法:以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理人肺癌细胞株A549,常规培养采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞的生长活性,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测14-3-3σ基因甲基化状态;以FQ-PCR法检测14-3-3σmRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:5-Aza-CdR能明显抑制肿瘤细胞的生长,随5-Aza-CdR浓度增加及培养时间的延长,细胞生长率下降;药物处理后14-3-3σmRNA表达明显升高,细胞凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关。结论:5-Aza-CdR能使14-3-3σ基因去甲基化、促进细胞凋亡、增强抑癌功能。; 余宗涛张吉才高琼高波胡春卉; 关键词：14-3-3Σ基因甲基化 A549细胞

肝癌细胞系中DNMTs表达的检测及意义被引量：1: 2013年; 目的:检测HBV相关肝癌细胞系(Hep3B)与非HBV相关肝癌细胞系(HepG2)中甲基化转移酶(DNAmethyltransferase,DNMT)的表达,分析HBV感染与DNMT表达之间的关系。方法:应用荧光定量PCR(Flurescencequantitative-PCR,FQ-PCR)检测两种肝癌细胞系中DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B、GAPDH基因mRNA表达水平,并将DNMT1、DNMT2、DNMT3A和DNMT3B表达水平与参比基因进行比较。结果:DNMT1、DNMT2、DNMT3A和DNMT3B在HBV相关细胞系Hep3B中表达分别为:1.26±0.15、0.76±0.15、1.26±0.20、0.66±0.13;在非HBV相关肝癌细胞系HepG2中的表达分别为:0.64±0.11、0.62±0.12、0.48±0.12、0.36±0.10。Hep3B细胞系中DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的表达均高于HepG2(P均<0.01)。结论:⑴HBV相关肝癌细胞系Hep3B中存在DNMT过表达;⑵HBV感染可能刺激DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的表达,进而促进抑癌基因甲基化。; 高波余宗涛吕军谢飞张吉才; 关键词：HBV感染荧光定量PCR

肺癌患者血浆、支气管肺泡灌洗液中FHIT基因启动子异常甲基化的检测被引量：4: 2007年; 目的探讨肺癌组织及外周血浆、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluids,BALF)中脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因启动子异常甲基化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异PCR方法对肺癌患者癌组织、癌旁组织及相应血浆、BALF进行FHIT异常甲基化检测。结果45例肺癌组织中,FHIT基因启动子异常甲基化率为40%(18/45),相应血浆中FHIT的甲基化检出率为31.11%(14/45),BALF检出率为33.33%(15/45),而癌旁组织中的FHIT启动子甲基化检出率为8.70%(2/23)、正常对照血浆、非肺癌患者BALF中未检出甲基化,只检出未甲基化的FHIT。血浆、BALF中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.01);FHIT异常甲基化与肿瘤淋巴结转移显著相关(P<0.01);但与患者年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度及肿瘤分类的差异无显著性(P>0.05)。结论血浆FHIT基因异常甲基化改变的检测在肺癌的特异诊断和淋巴结恶性转移等方面有一定的应用价值。; 余宗涛袁亚莉张吉才高琼周有利; 关键词：肺癌 FHIT基因

肺癌组织细胞中CHFR基因表达水平及其启动子甲基化状态被引量：3: 2007年; 目的:探讨CHFR(checkpoint with FHA and ring finger)基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法:实时定量PCR法检测CHFR mRNA在45例肺癌组织、23例癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理前后A549细胞株中的表达,同时用甲基化特异性PCR检测CHFR启动子CpG岛甲基化状态。结果:CHFR mRNA在癌旁组织中全部表达,在肺癌组织中表达缺失率为15.56%(7/45),且表达量低于正常肺组织,F=9.156,P<0.01;但在不同年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度和肿瘤分类中的差异无统计学意义,P>0.05。CHFR基因启动子在肺癌组织中发生甲基化的频率为22.22%(10/45),在癌旁组织未发生甲基化,χ2=5.992,P<0.05。10例启动子区甲基化的肺癌标本中,7例同时伴有mRNA表达缺失。结论:CHFR启动子甲基化可在肺癌发生和发展中起一定作用。; 余宗涛袁亚莉张吉才周有利吕军; 关键词：基因表达甲基化

5-氮-2'-脱氧胞苷对肺癌A549细胞凋亡及范可尼贫血互补基团F表达的影响: 2015年; 目的探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺癌A549细胞凋亡及抑癌基因范可尼贫血互补基团F(FANCF)基因表达的影响。方法以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理人肺癌细胞株A549,常规培养采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞的生长活性,甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测FANCF基因甲基化状态;以荧光定量PCR检测FANCF mRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 5-Aza-CdR能明显抑制肿瘤细胞的生长,细胞增殖抑制率(CPIR)随5-Aza-CdR浓度和作用时间的不同而变化,呈剂量依赖性(P<0.005)和时间依赖性(P<0.001);药物处理后FANCF mRNA表达明显升高,细胞凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关(r=0.998,P<0.05)。结论 5-Aza-CdR能使FANCF基因去甲基化,促进细胞凋亡,增强抑癌功能,但同时有增加顺铂耐药的风险。; 余宗涛张吉才高琼高波胡春卉; 关键词：F

宫颈癌中多药耐药相关蛋白基因表达及意义被引量：6: 2012年; 目的探讨多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance-associated protein,MRP)基因在宫颈癌组织中的表达情况及临床意义。方法采用RT-PCR技术检测47份宫颈癌组织和12份正常宫颈组织中MRP基因mRNA的表达情况。结果正常宫颈组织中MRP mRNA的表达为0.20±0.11,宫颈癌组织中为0.51±0.28,宫颈癌组织MRP基因表达高于正常宫颈组织(t=6.04,P<0.01)。MRP表达在肿瘤直径、有无淋巴转移、不同肿瘤分化程度、组织学分型及不同临床分期上差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MRP基因可能参与宫颈癌原发性耐药的产生,检测其表达对制订治疗方案有一定价值。; 高波杨丰美余宗涛张吉才陶建蜀; 关键词：宫颈癌逆转录聚合酶链反应多药耐药相关蛋白基因

碘过量对仔鼠脑α-微管蛋白表达的影响及硒的干预作用被引量：1: 2007年; 目的研究碘过量摄入对小鼠仔鼠脑α-tubulin基因表达的影响及硒的干预作用。方法将60只BALB/c小鼠随机分为四组正常对照组(饮用自来水,NC)、碘过量组(饮水含碘3000μg/L,EI+)、补硒组(饮水含Se200μg/L,Se+)、碘过量加硒(饮水含碘3000μg/L+Se200μg/L,EI+Se+)组。以纯系鼠饲料饲养。4个月后,雌雄交配。测定D14和D28仔鼠血清总T4和总T3水平,分别用实时荧光定量PCR和Western Blot测定D0、D14和D28仔鼠大脑组织α-微管蛋白和α-微管蛋白mRNA表达。结果D14仔鼠血清T4水平碘过量组显著低于对照组和碘过量加硒组(P<0.05)。D0仔鼠脑组织α-微管蛋白mRNA水平碘过量组显著低于对照组、单独补硒组和碘过量补硒组(P<0.05)。14d仔鼠脑组织α-微管蛋白mRNA和蛋白表达水平碘过量组显著高于其它组(P<0.05)。碘过量和补硒对D28仔鼠血清T4水平和脑组织α-微管蛋白表达水平无明显影响。结论碘过量引起仔脑α-微管蛋白的发育迟滞,补硒具有缓解作用。; 郭怀兰余宗涛杨雪锋徐健于东孙秀发; 关键词：碘过量硒 Α-微管蛋白

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余宗涛

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