傅建新
- 作品数：102 被引量：259H指数：9
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅科研基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三丁酸甘油酯对白血病细胞株SHI-1体外作用的研究被引量：6
- 2004年
- 目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂三丁酸甘油酯 (TB)体外诱导白血病细胞株SHI 1生长抑制、分化和凋亡作用 ,并对其作用机制进行初步研究。方法 应用细胞计数、锥虫蓝拒染法观察TB对细胞的生长抑制作用 ,通过细胞形态学观察、NBT还原实验、细胞表面抗原CD11b和CD14的检测、Annexin标记、DNA凝胶电泳等方法分析TB对SHI 1细胞的诱导分化及凋亡作用。通过West ernblot方法及逆转录聚合酶链反应检测TB作用前后细胞组蛋白H3乙酰化水平以及 p2 1WAF1/CIP1表达量的改变。结果 ①TB可以抑制SHI 1细胞的增殖及活力 ,呈剂量 时间依赖关系。②TB 0 .1mmol/L可诱导SHI 1细胞发生部分分化 ,NBT阳性率升高 ,细胞表面CD11b、CD14表达上调。③SHI 1经TB 0 .5～ 1.0mmol/L作用 4 8h ,出现典型的凋亡形态学改变。细胞AnnexinⅤ结合力明显上升 ,并可见典型的DNA梯形条带。TB作用后SHI 1细胞组蛋白H3乙酰化水平升高以及 p2 1WAF1/CIP1表达上调。结论 TB能抑制SHI 1细胞的增殖并影响细胞活力 ,诱导SHI 1细胞分化和凋亡 ,其机制与TB引起组蛋白乙酰化水平升高、继而上调 p2 1WAF1表达有关。
- 殷红陈子兴岑建农段卫明王玮傅建新
- 关键词：白血病细胞株CD11B体外作用凋亡作用P21^WAF1/CIP1
- TYXN-91型智能血液凝集仪的初步评价
- 1995年
- 对TYXN—91型智能血液凝集仪PCG功能进行初步评价，结果显示其重复性高（CV＝1．1％～4．2％），稳定性好（KPTT值7小时内波动—0．4～1．7秒），能自动校正试剂活力对结果影响（P＜0．05），血浆内血小板对结果影响小（P＞0.20），但温度影响较大（P＜0.001）；仪器较适合于血液学检验，特别对出血性疾病的筛选有价值，并为血液学检验的自动化和标准化提供了工具。
- 傅建新程大卫张威张威
- 关键词：血液检查
- 高效绿色荧光蛋白基因标记系统的建立及其初步应用被引量：1
- 2001年
- 傅建新王玮白霞阮长耿陈子兴
- 关键词：EGFP白血病
- 重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达被引量：3
- 2016年
- 目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的真核表达载体pEGFP-N1中。通过PCR、酶切及测序等方法鉴定重组载体;进而将该重组载体转染至CHO细胞中,通过荧光显微镜检测EGFP的表达,Western blot法检测PDPN在CHO细胞中的表达,流式细胞术分选高表达PDPN的CHO细胞,运用血小板聚集实验检测分选后细胞株的生物学活性。结果 DNA测序和酶切鉴定证明PDPN基因正确克隆至pEGFP-N1载体中,重组载体稳定转染CHO细胞后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光,流式细胞术分选后的细胞高表达PDPN;Western blot结果显示转染后CHO细胞膜表面表达PDPN蛋白;过表达PDPN的CHO细胞可以诱导人血小板聚集。结论成功构建了稳定高表达PDPN蛋白的CHO细胞株,该细胞株可表达PDPN,并诱导血小板聚集。
- 曲乐赵星鹏傅建新夏利军戴兰阮长耿赵益明
- 关键词：PEGFP-N1CHO细胞血小板聚集
- 稳定表达外源RbAp46基因的U937白血病细胞株的建立和初步特性分析被引量：4
- 2004年
- 为建立RbAp4 6基因稳定转染的白血病细胞株 ,对悬浮培养的白血病细胞的电穿孔条件进行优化之后 ,运用电穿孔介导的转基因技术 ,在低电压、高电容的条件下将含RbAp4 6基因cDNA的表达质粒转染白血病细胞系U937,经G4 18筛选获得稳定转染的克隆 ,用PCR检测RbAp4 6基因的整合 ,用Westernblot分析蛋白质的表达水平 ,然后筛选出表达外源RbAp4 6蛋白水平最高的亚克隆。用台盼蓝拒染法判定细胞活力 ,用细胞计数判定细胞生长速率。结果发现 ,转染RbAp4 6基因的U937细胞的生长速率比对照组低 5 0 %左右。结论 :在白血病细胞系U937中建立了稳定表达外源RbAp4 6基因的细胞株 ,并发现过表达的外源RbAp4 6基因能抑制U937细胞的增殖。
- 段卫明陈子兴王玮傅建新白霞赵小娟姚利
- 关键词：电穿孔白血病细胞
- 大肠癌血管生成与抗血管生成的实验和临床研究
- 陈卫昌刘强郑黎李锐傅建新陈桂林康苏娅马文雄徐晓彭群新严苏阮长耿萧树东
- 该研究揭示生存素在大肠癌发生的早期阶段即有表达，检测生存素表达可望成为大肠癌新的早期诊断标志物，对探讨检测血管生成因子早期诊断大肠癌，以及大肠癌的生物学行为如浸润、转移、病程进展的客观、及时判断具有重要价值，亦有助于临床...
- 关键词：
- 关键词：大肠癌血管新生抗血管生成
- 尿激酶受体基因反义RNA转移体系的建立及其在白血病研究中的应用被引量：1
- 2003年
- 尿激酶受体 (uPAR)表达与肿瘤 /白血病细胞的侵袭与转移能力明显相关。为探讨逆转录病毒载体介导的uPAR基因反义RNA转移体系在抑制白血病细胞表达uPAR中的价值 ,构建了表达反义uPAR基因的逆转录病毒载体LaCD87SN ,用脂质体转染 交互感染策略建立uPAR基因反义RNA转移体系 ,并以双嗜型aCD87病毒转导U937白血病细胞 ;用PCR分析反义uPAR基因的整合和表达 ;用流式细胞术和明胶酶谱分别检测白血病细胞CD87表达和基质金属蛋白酶 (MMP)活性。结果显示 :通过转染 交互感染获得上清中病毒滴度为 6 .3× 10 5cfu/ml的双嗜型病毒产生细胞Am12 /aCD87;aCD87病毒感染的U937/aCD87细胞内存在aCD87原病毒的整合 ,并高水平表达uPAR基因反义RNA。此外 ,与载体对照的U937/NeoR细胞相比 ,U937/aCD87细胞表面CD87分子表达并无明显降低 ,但其分泌MMP 9的能力显著下降。结论 :逆转录病毒载体介导的反义RNA转移不能有效地下调白血病细胞表面uPAR表达 ,但可能干扰CD87分子与MMP的相互作用。
- 白霞傅建新奚晓东阮长耿
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物受体白血病U937细胞尿激酶受体UPAR
- 髓细胞白血病的分子遗传学监测
- 1995年
- 肿瘤发生是多种基因异常的共同结果,因而检测基因改变可用于肿瘤监测。约1/3急性髓细胞白血病(AML)可发生N-ras原癌基因点突变。随着简便、灵敏的半固相微测序法的建立,它将用于监测AML早期复发和定量检测残留白血病细胞;此外,髓细胞白血病患者降钙素基因高甲基化可作为判定疾病进展的分子标记,且特别有助于慢性髓细胞白血病(CML)分期。
- 傅建新薛永权
- 关键词：白血病基因诊断
- 以对造血细胞转基因为基础的基因治疗策略研究
- 陈子兴傅建新岭建农阳小卫王季石王玮夏学鸣
- 研究了对造血系统的恶性肿瘤的基因治疗，以逆转录病毒载体介导的体外转基因技术为基础，设计了以标记基因转入造血干/祖细胞保护造血功能两种基因治疗策略。建立了以逆转录病毒载体介导的安全高效的转基因体系。应用逆转录病毒载体将MD...
- 关键词：
- 关键词：基因治疗造血干细胞基因转移
- 人骨髓和动员外周血中的间充质干细胞的研究
- 间充质干细胞(MSC)是一群具有自我更新、增殖潜能和多向分化能力的贴壁细胞。它能分化成许多构成骨髓基质的细胞,组成造血微环境。吸引造血干/祖细胞归巢,从而支持和教化造血系统的建立和发挥功能。有报道在临床上应用CD34造血...
- 岑建农陈子兴钱军王玮傅建新潘金兰
- 文献传递
