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黄瓜细胞质型谷氨酰胺合成酶基因(GS1)的克隆及其在低氮条件下的表达被引量：16: 2012年; 【目的】分离和克隆黄瓜谷氨酰胺合成酶GS1基因,分析其序列特征,了解其在低氮条件下的表达情况。【方法】依据黄瓜基因组数据库中Csa015274基因编码区全序列,应用引物设计软件Primer Premier 5.0设计引物,从黄瓜叶片cDNA中克隆该基因,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定氨基酸序列进行分析鉴定,并用实时荧光定量PCR法研究GS1基因在不同氮素浓度下的表达变化。【结果】分离到GS1基因,GenBank登录号为JQ277263。该基因长1 071 bp,编码356个氨基酸,与甜瓜(Cucumis melo L.)GS1基因同源性高达97%。该基因编码的蛋白是1个不稳定的疏水蛋白,无跨膜结构,无信号肽,存在蛋白激酶C磷酸化位点,酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,N-十四酰化位点,酪氨酸激酶磷酸化位点等活性位点。GS1基因表达模式分析显示,在低氮条件下,该基因下调表达,随着氮素浓度的增高GS1基因的表达量增加。在高浓度的氮素水平下,该基因的表达同样受到抑制。【结论】成功从黄瓜叶片中分离克隆到GS1基因,该基因具有已知物种GS1基因的特征,可用于该基因的功能研究。; 冯卓秦智伟武涛何红梅; 关键词：黄瓜克隆

低氮胁迫下黄瓜钙依赖蛋白激酶基因的克隆及表达分析被引量：1: 2013年; 在低氮胁迫下,以黄瓜品种津研4号叶片为供试材料,以cDNA为模板,依据黄瓜基因组数据库中Csa002986基因编码区全序列,应用Primer Premier 5.0软件设计引物,克隆得到黄瓜钙依赖蛋白激酶基因(calcium-dependent protein kinase,CDPK)。该基因全长1584bp,编码527个氨基酸。预测该基因编码的蛋白是一个稳定的亲水蛋白,无跨膜结构,无信号肽,存在蛋白激酶结合区、EF手型钙结合区、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性位点、N酰基化位点等多个位点。CDPK基因在不同氮浓度处理下黄瓜各部位表达分析结果显示,在无氮条件下,CDPK基因在茎尖表达量最高,其次为叶和茎;在低氮条件下,CDPK基因在茎中表达量最高,其次为茎尖和叶;在正常及高氮条件下,CDPK基因在茎尖表达量最高,其次为茎和叶。CDPK基因在叶中的表达模式分析结果显示,在无氮及低氮胁迫下CDPK基因表达量增加,随着氮浓度的降低,CDPK基因的表达量增加并明显高于对照;在高氮胁迫条件下,CDPK基因的表达量低于对照。; 何红梅秦智伟冯卓武涛辛明周秀艳; 关键词：黄瓜克隆低氮胁迫

黄瓜硝酸盐转运蛋白基因CsNRT1.5的克隆及表达分析被引量：4: 2013年; 结合黄瓜基因组数据和生物信息学分析,采用PCR技术从黄瓜津研4号叶片中获得一个与衰老相关的基因,命名为CsNRT1.5。该基因全长1 764 bp,编码588个氨基酸,与拟南芥硝酸盐转运蛋白基因NRT1.5同源性最高(71%)。系统进化树分析表明,CsNRT1.5与拟南芥硝酸盐转运蛋白基因NRT1.5亲缘关系最近。RT-PCR以及qRT-PCR表达分析表明,CsNRT1.5是一个与黄瓜衰老相关的基因,在黄瓜幼嫩叶片表达量最高,其次为中部叶片,在下部衰老叶片检测到痕量表达。研究结果为下一步分析其在黄瓜氮代谢过程中的功能验证奠定理论基础。; 秦智伟冯卓武涛周秀艳; 关键词：黄瓜耐低氮 RT-PCR

低氮胁迫下黄瓜幼苗差异表达基因鉴定与蛋白质组学分析: 黄瓜(Cucumis sativus L.)是世界上最重要的蔬菜作物之一。黄瓜栽培上需要施用大量的肥料，尤其是氮肥。氮肥是植物最重要的矿质元素，它是氨基酸、蛋白质、叶绿素、核酸、脂类以及其他重要代谢物质的组成成分。氮素的...; 冯卓; 关键词：黄瓜低氮胁迫蛋白质表达基因鉴定; 文献传递

光周期和温度对黄瓜品种‘C09-123’性别分化的影响被引量：4: 2012年; 以黄瓜品种‘C09-123’为试材,采用植物光照培养箱进行植株培养,利用实体解剖镜观察黄瓜主茎上的雌雄花表现,以探明光周期和温度对黄瓜性别分化的影响。结果表明:低夜温是影响黄瓜‘C09-123’雌性形成的主导因素,光周期影响不明显;12℃的低温条件有利于‘C09-123’雌花形成;在24℃的高温条件下,‘C09-123’在10节内只形成雄花,不形成雌花。; 程国辉秦智伟冯卓王春华; 关键词：黄瓜性别分化温度光周期

黄瓜性别决定基因表达谱分析: 为了了解黄瓜性别决定过程中基因的表达情况，本研究中以黄瓜全雌突变体Csg-G及其野生型Csg-M为材料，利用新一代测序技术Solexa对其转录组进行了研究。构建黄瓜性别决定表达谱对于认识植物性别决定系统性调控的分子机理，...; 武涛秦智伟周秀艳冯卓; 关键词：黄瓜性别决定基因表达谱分子机理; 文献传递

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冯卓