刘东银
- 作品数：17 被引量：19H指数：3
- 供职机构：杭州市第三人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 咖啡酸衍生物WSY6对黑素细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究被引量：2
- 2018年
- 目的 探讨咖啡酸衍生物WSY6对过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用和潜在分子机制.方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,分为对照组(不做任何处理)、H2O2组(1 mmol/LH2O2处理)和6.25、12.5、25 μmol/LWSY6组(分别用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6预处理1h后再用1 mmol/L H2O2处理1h).继续培养24 h后,用MTS法测定黑素细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放量.部分黑素细胞分为抑制剂组(用p38抑制剂预处理1h,再用1 mmol/LH2O2处理1h)和H2O2组(直接用1 mmol/LH2O2处理1h),处理完成后继续培养24 h,用试剂盒检测LDH的释放量.部分黑素细胞用25 μmol/L WSY6预处理1、2、4h后,再用H2O2处理1h,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;部分黑素细胞用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6处理1h后,再用H2O2处理1h,Western印迹法检测细胞色素C(cyto-c)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9和磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)及c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达.结果 与对照组相比,H2O2组黑素细胞存活率明显降低(29.22%±1.31%,P<0.05),细胞内LDH释放量增加(47.19%±4.85%,P<0.05),ROS水平明显升高(18.37±1.59,P<0.05),caspase-3和caspase-9的表达亦均升高.与H2O2组相比,6.25、12.5、25μmol/L WSY6组细胞存活率明显增加(52.48%±1.17%、60.21%±0.25%、78.32%±1.73%,P<0.05),LDH释放量明显下降(21.99%±0.22%、15.38%±0.45%、13.18%±0.38%,均P<0.05),25 μmol/L WSY6处理1、2、4h组细胞内ROS显著下降(7.59±1.00、6.22±0.52、5.15±0.48,均P<0.05).同时p38抑制剂组黑素细胞LDH释放量较H2O2组显著下降(P<0.05).Western印迹法显示,WSY6预处理后,与H2O2组相比,caspase-3和caspase-9表达明显降低,p-p38表达下降,但p-ERK和p-JNK表达无明显变化;同时WSY6组p38 MAPK下游产物p-p53表达也下降,且WSY6浓度越高,下降越明显.结论 WSY6对H2O2诱导的黑素细胞氧化应激损伤有显著的保护作用
- 金嵘祝逸平林福全刘东银傅丽芳许爱娥
- 关键词：黑素细胞氧化性应激咖啡酸乳酸脱氢酶类细胞外信号调节MAP激酶类
- Th17和Treg细胞与蕈样肉芽肿相关性研究被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨调节性T（Treg）细胞和Th17细胞在蕈样肉芽肿不同分期中的变化.方法 流式细胞仪检测28例蕈样肉芽肿、13例大斑块型副银屑病、17例扁平苔藓患者及10例健康对照外周血Treg细胞和Th17细胞百分率,同时应用免疫组化法检测40例蕈样肉芽肿、13例副银屑病、17例扁平苔藓及10例健康对照蜡块组织中叉头状转录因子P3（FOXP3）和白细胞介素17（IL-17）的表达.结果 蕈样肉芽肿、副银屑病、扁平苔藓患者外周血Treg细胞百分率分别为（8.09±1.68）％,（6.53±1.67）％,（2.84±1.16）％较健康对照[（1.01±0.35）％]升高,差异均有统计学意义.蕈样肉芽肿、副银屑病患者外周血Treg细胞百分率亦高于扁平苔藓（均P＜ 0.05）;蕈样肉芽肿与副银屑病患者差异无统计学意义（P＞0.05）.外周血Th17细胞百分率在蕈样肉芽肿较副银屑病、扁平苔藓患者比健康人升高[（3.22±0.82）％比（2.46±0.79）％,（1.38±0.47）％和（0.59±0.30）％,均P＜ 0.05].FOXP3阳性率在蕈样肉芽肿、副银屑病及扁平苔藓均高于正常皮肤组织[（14.94±4.46）％,（11.95±4.72）％,（6.32±2.81）％比（3.43±1.79）％,均P＜ 0.05],蕈样肉芽肿及副银屑病比扁平苔藓高（均P＜ 0.05）,蕈样肉芽肿比副银屑病差异无统计学意义（P＞0.05）.IL-17阳性率在蕈样肉芽肿、副银屑病、扁平苔藓和正常组织中分别为（15.89±177;4.27）％,（12.02±177;3.34）％,（4.84±177;1.93）％和（2.62±177;0.89）％,其中,蕈样肉芽肿均高于副银屑病、扁平苔藓组织及正常组织（均P＜ 0.05）.蕈样肉芽肿、副银屑病外周血Th 17/Treg细胞比率比扁平苔藓、健康对照低（0.41±177;0.11,0.39±177;0.12比0.50±177;0.06,0.57±177;0.19（均P＜0.05）.早期蕈样肉芽肿Th17细胞与Treg细胞呈正相关（r=0.423,P＜ 0.05）,肿瘤期蕈样肉芽肿Th17细胞有所下降,而Treg细胞继续升高,但蕈样肉芽肿各期差异无统计
- 黎钊王平侯秀丽刘东银王媚郑俊惠
- 关键词：蕈样肉芽肿T淋巴细胞调节性TH17细胞
- 蛋白激酶B和丝裂原活化蛋白激酶在烟酸保护的HaCaT细胞抵抗中波紫外线损伤中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨烟酸保护由UVB诱导的角质形成细胞损伤的胞内信号传导分子机制。方法UVB照射和烟酸处理HaCaT细胞，TUNEL法检测细胞凋亡，Western印迹检测蛋白激酶B（Akt）／丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路相关蛋白Akt、P38、JNK、ERK1／2的磷酸化水平变化。ELISA检测细胞分泌内皮素1（ET-1）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的水平。结果Western印迹结果表明，UVB照射和烟酸处理HaCaT细胞后，p-Akt、P—P38、p-JNK、P—ERK1／2蛋白在60rain内都显著激活（P〈0．01）。烟酸预处理后的HaCaT细胞再经UVB照射，可以发现p-Akt、P—P38、p-ERK1／2信号分子在2h内激活更显著（P〈0．01）。3个抑制剂加UVB照射组较3个单独抑制剂组ET-1、bFGF表达降低，差异均有统计学意义，其中LY294002组、SB203580组ET-1、bFGF水平最低；烟酸预保护的抑制剂处理组HaCaT细胞在UVB照射后，LY294002和U0126组没有出现ET-1、bFGF水平回升，SB203580组bFGF水平出现回升。结论Akt{~号分子在烟酸保护的HaCaT细胞抵抗UVB损伤中起一定的调控作用。
- 林福全许文关翠萍周妙妮洪为松刘东银许爱娥
- 关键词：尼克酸角质形成细胞紫外线丝裂原激活蛋白激酶
- Th17细胞与Treg细胞在蕈样肉芽肿中的表达及其相关性的研究
- 目的:探讨调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)在蕈样肉芽肿中的表达及相关性。方法:应用流式细胞术检测28例蕈样肉芽肿、13例大斑块型副银屑病、17例扁平苔藓及及10例正常人外周血中Treg细胞和Th17...
- 黎钊王平刘东银郑俊惠王媚
- 文献传递
- InnVit基因沉默对黑素细胞B10BR黑素合成和细胞凋亡的影响被引量：4
- 2007年
- 目的观察siRNA抑制InnVit基因后对小鼠永生化B10BR黑素细胞黑素合成和细胞凋亡的影响,进一步探讨InnVit基因的生物学功能。方法将InnVit基因的三对siRNA转染B10BR黑素细胞,半定量RT-PCR检测InnVit基因抑制后对黑素细胞InnVit基因mRNA水平的变化;采用MTT法测定InnVit基因抑制后对细胞增殖率的影响;采用流式细胞仪检测InnVit基因抑制后对黑素细胞凋亡的影响。结果siRNA1转染后,InnVit基因在黑素细胞中的表达明显下降,试验组细胞的早期凋亡率(35.80%)较对照组(6.47%)明显增加。结论通过RNA干扰技术可抑制InnVit在黑素细胞中的表达,可诱导B10BR细胞的凋亡增加。
- 李永伟张迪敏刘东银关翠萍刘继峰尉晓冬许爱娥
- 关键词：黑素细胞白癜风RNA小分子干扰
- 基于16S rRNA测序探讨银屑病1号方对银屑病患者皮肤微生态的影响
- 2023年
- [目的]采用16S rRNA基因测序技术,观察银屑病1号方对银屑病患者治疗前后皮肤微生态的影响。[方法]选取在杭州市第三人民医院接受治疗的30例寻常型银屑病患者,口服银屑病1号方治疗后,取治疗前后皮肤样本,同时选取健康对照组30例,采用16S rRNA基因测序技术,分析治疗前后菌群多样性及菌群分布差异。[结果]银屑病1号方治疗后患者组操作分类单元(operational taxonomic units,OTUs)数目较治疗前患者组显著减少(P<0.05)。在门水平上,治疗后患者厚壁菌门、放线菌门增加,变形菌门、拟杆菌门含量减少;在属水平上,治疗后患者痤疮丙酸杆菌属、葡萄球菌属、棒状杆菌属丰度增加,链球菌属丰度下降。秩和检验显示,治疗前患者组中相对丰度较高(>1%)的差异物种有厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门、葡萄球菌属、金黄杆菌属、鞘氨醇单胞菌属。功能预测分析,患者组的皮肤微生态功能与糖代谢、辅因子及维生素代谢和氨基酸生物合成的相关基因通路与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]银屑病1号方可通过改善皮肤微生态治疗银屑病。
- 叶瑜剑黎钊刘东银王平茹铉雯丁志山周芳美
- 关键词：银屑病
- 蛋白酶激活受体2与表皮黑素转运
- 2005年
- 蛋白酶激活受体2属于耦联G蛋白受体家族的蛋白,它是一种存在于多系统的多功能分子,参与腺体分泌、平滑肌收缩、痛觉、组织纤维化等多种生理及病理过程。在表皮黑素单位中,蛋白酶激活受体2激活后以Rho依赖性吞噬作用介导黑素转运,在表皮的黑素转运、紫外线照射后皮肤色素加深、炎症及炎症后皮肤色素沉着中发挥重要调节作用。
- 刘东银许爱娥
- 关键词：PAR-2角质形成细胞蛋白酶激活受体2黑素表皮皮肤色素沉着
- Th17细胞与Treg细胞在蕈样肉芽肿中的表达及其相关性的研究
- 目的探讨调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)在蕈样肉芽肿中的表达及相关性。方法应用流式细胞术检测28例蕈样肉芽肿、13例大斑块型副银屑病、17例扁平苔藓及及10例正常人外周血中Treg细胞和Th17细胞...
- 黎钊侯秀丽王平刘东银王媚郑俊惠
- 文献传递
- 白癜风抗氧化药物筛选体系的建立
- 关翠萍许文洪为松林福全周妙妮刘东银傅丽芳许爱娥
- 题来源与背景： 课题来源：杭州市科技发展计划(引导计划)项目 背景：白癜风是由于表皮黑素细胞缺失引起的色素缺失性皮肤病,严重影响了患者的身心健康,探索高效的治疗方法是急需解决的问题。对于稳定期患者临床多采用移植治疗方法,...
- 关键词：
- 关键词：白癜风抗氧化药物中药
- 窄谱中波紫外线联合干扰素治疗蕈样肉芽肿疗效及其与Treg/Th17细胞相关性研究被引量：4
- 2015年
- 目的 观察窄谱中波紫外线（NB-UVB）单独或联合干扰素治疗覃样肉芽肿（MF）的疗效,探讨外周血调节性T（Treg）细胞和辅助性T细胞17（Th17）细胞与疗效的相关性.方法 33例ⅠA期-ⅡA期MF患者按照治疗方法分为两组,分别应用NB-UVB单独照射（照射组）和NB-UVB照射联合重组人干扰素（INF）-α-2b肌内注射（联合组）治疗.于治疗前和治疗9个月后分别采集患者外周血,流式细胞仪检测Treg细胞和Th17细胞百分率.以10例健康人外周血为对照组（健康对照组）.结果 平均治疗时间9个月,照射组15例中,完全缓解6例,部分缓解3例,无效6例,联合组18例中,完全缓解12例,部分缓解5例,无效1例,联合治疗效果显著优于单独治疗（P=0.023）.治疗前两组患者外周血Treg和Th17细胞百分率均明显高于健康人（均P＜ 0.05）,两患者组间差异无统计学意义（P＞0.05）;治疗后两患者组Treg和Th17细胞百分率均显著下降,但仍高于健康对照组（均P＜ 0.05）.联合组Treg和Th17细胞降幅均大于照射组（均P＜0.05）.7例治疗无效患者治疗后外周血Treg细胞较治疗前亦有降低（P＜0.05）,Th17细胞无显著下降（P＞0.05）.结论 NB-UVB照射联合INF-α-2b肌内注射治疗MF临床疗效优于单独使用NB-UVB,疗效可能与外周血Treg和Th17细胞降幅有关.
- 侯秀丽王平黎钊聂慧琼刘东银
- 关键词：紫外线疗法干扰素ΑTH17细胞蕈样肉芽肿
