刘双凤
- 作品数：19 被引量：50H指数：4
- 供职机构：成都医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省高等教育“质量工程”项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 病例为主导临床血液学检验综合实验教学模式的建立被引量：7
- 2016年
- 以临床血液学检验教学为例,对实验教学模式进行改革,在加强基础技能培训的基础上引入病例主导综合实验模式,全面提高学生临床沟通能力、合理选择检验项目、准确操作实验、自我实验质量控制等多方面能力,解决传统教学中重检验轻临床、重理论轻实践的问题,也可避免学生孤立学习单一实验项目,提高学生分析问题、解决问题的能力。
- 刘双凤彭克军邓念华
- 关键词：临床血液学检验实验教学
- 动脉粥样硬化发病机制的研究进展被引量：16
- 2007年
- 李贵星刘双凤
- 关键词：动脉粥样硬化发病机制心脑血管疾病脂代谢免疫
- PRSS2重组胰蛋白酶诱导上皮间质转化促进胰腺癌细胞转移
- 2023年
- 目的:探讨丝氨酸蛋白酶2(serine protease 2,PRSS2)重组胰蛋白酶对胰腺癌转移的影响。方法:利用GEPIA数据库分析PRSS2基因表达与胰腺癌患者预后关系。镜下观察PRSS2重组胰蛋白酶对胰腺癌Panc-1细胞株细胞形态的影响,Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)分子学标志物的表达,Transwell实验检测癌细胞迁移及侵袭能力。结果:GEPIA数据库分析结果显示,PRSS2高表达患者总生存期显著低于PRSS2低表达患者,PRSS2基因表达与胰腺癌患者预后呈明显负相关。100 ng/mL PRSS2重组胰蛋白酶诱导Panc-1细胞由多边形变为梭形;E-cad蛋白表达下调(t=27.969,P<0.001),N-cad蛋白表达上调(t=33.163,P<0.001);细胞迁移、侵袭能力增强(t=21.774,P<0.001;t=21.547,P<0.001)。结论:PRSS2重组胰蛋白酶可诱导胰腺癌细胞发生EMT,促进胰腺癌迁移及侵袭。PRSS2胰蛋白酶可能是诱发胰腺癌转移的重要因素,为胰腺癌的早期干预提供理论依据。
- 李燕刘磊马宇唐芳刘双凤
- 关键词：胰蛋白酶胰腺癌EMT迁移
- pH值对硼砂甲苯胺蓝染色的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨不同pH值的缓冲液对硼砂甲苯胺蓝染色的影响。方法将血涂片分为两组,第1组用硼砂甲苯胺蓝染色10min,第2组采用瑞氏染色10min,为对照组,每组由9张血涂片组成,每张血涂片染色时采用不同pH值的缓冲液,观察染色效果。结果第1组与单纯用硼砂甲苯胺蓝染色相比,血涂片加用缓冲液后再用硼砂甲苯胺蓝染色效果更好,细胞结构清晰,随缓冲液pH值增高,细胞胞质与细胞核着色逐渐加深,当pH值大于9时,核浆对比不再清晰。pH值为4～11之间,淋巴细胞核仁均清晰可见,pH越低核仁越清晰。第1组成熟淋巴细胞核仁立体感强,第2组成熟淋巴细胞核仁不清晰,无法与异染色质相鉴别。结论硼砂甲苯胺蓝染色效果与缓冲液的pH值密切相关,硼砂甲苯胺蓝染色可使部分成熟淋巴细胞核仁显色。
- 刘双凤范永兴袁雪吕明付霞李静文金家贵
- 关键词：PH值核仁血涂片
- 流体剪切力诱导喉鳞癌Hep2细胞上皮-间充质转化被引量：3
- 2016年
- 目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细胞迁移能力的变化;共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin的分布;Western blotting检测EMT相关蛋白的表达。结果 FSS力学加载后,Hep2细胞形态由多边形向梭形转变,撤销FSS后,细胞恢复初始的多边形;Hep2细胞迁移能力的增加依赖于FSS加载时间。FSS促使细胞骨架蛋白F-actin重排,从而增强Hep2细胞的迁移行为。FSS使Hep2细胞EMT标志蛋白发生了时序性变化。结论 FSS是诱导Hep2细胞发生EMT的一个重要物理因素。
- 张莹莹冯唐沈阳刘静霞闫志平刘双凤刘肖珩
- 关键词：流体剪切力喉鳞癌细胞细胞迁移上皮-间充质转化
- 高纯度诊断用重组甘油激酶的制备和鉴定
- 2013年
- 用乳糖诱导重组甘油激酶(r-GK)在E.coli中高效表达,经300L发酵罐发酵培养,建立了高效、低成本的r-GK发酵生产工艺。发酵菌体终密度OD600值达到42,r-GK表达量占菌体可溶性蛋白的30%左右。菌体破碎液经选择性热变性处理,Ni Sepharose FF层析二步纯化,产物纯度大于97%。经梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(GradientPAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,r-GK分子量为120kDa,由分子量相同的2个亚基组成。甘油激酶中2种NADH氧化酶和过氧化氢酶干扰酶未被检出。保存稳定性实验表明纯化后酶液在4℃条件下保存30d可保留约85%的活性,而冻干粉剂在4℃条件下保存1年活性仍可保留93%以上。
- 孟尧王振伟王帅坤郝杰清师慧孟延发刘双凤
- 关键词：乳糖高密度发酵
- 再生障碍性贫血病因及发病机制研究进展被引量：3
- 2009年
- 刘双凤
- 关键词：再生障碍性贫血病因发病机制
- 皱褶假丝酵母脂蛋白脂酶的分离纯化及酶学性质的研究
- 2012年
- 目的从皱褶假丝酵母的发酵液中纯化脂蛋白脂酶,并对其酶学性质进行研究。方法利用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow和Phenyl Sepharose CL-4B层析等方法进行纯化,利用SDS-PAGE、PAGE和HPLC法进行鉴定。结果获得的脂蛋白脂酶为单一组分,相对分子质量为34 kDa;此酶在50℃、pH6～9时保持稳定;在最适条件下测得其米氏常数(Km)为3.4×10-4mol·L-1;用等电点沉淀法测得脂蛋白脂酶的pI=5.5;Hg+、Cu2+、Ag+和SDS是脂蛋白脂酶的抑制剂,Mg2+和Triton X-100对此酶有激活作用。结论文中方法获得了皱褶假丝酵母脂蛋白脂酶的酶学性质,对此酶在食品、医药和生物技术等领域的应用提供了理论支持。
- 王殊睿刘双凤师慧王帅坤王振伟郝杰清孟延发
- 关键词：脂蛋白脂酶
- MAP30-PEG结合物对A549体外细胞增殖作用的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A549细胞凋亡形态,并用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用western blot检测凋亡细胞caspase3表达。结果 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性关系;MAP30-PEG结合物对A549细胞增值抑制率约为MAP30的60%;Hoechst33258荧光染色后均呈典型凋亡形态;流式细胞术检测显示,MAP30和MAP30-PEG结合物作用于A549细胞48 h后均可使A549细胞呈现Sub-G1凋亡峰,凋亡率分别为58.7%、42.7%;MAP30和MAP30-PEG结合物对胞内caspase3在凋亡过程中显示有激活作用。结论 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549增殖有明显的抑制作用;两者均能通过caspase3途径诱导细胞凋亡。
- 邓缅刘双凤孟尧沈富兵吴民泸郑崛村孟延发
- 关键词：CASPASE3
- Ⅱ型糖尿病患者餐前和餐后血脂变化分析被引量：2
- 2006年
- 目的分析Ⅱ型糖尿病患者餐前和餐后血糖、胰岛素及血脂的变化,探讨Ⅱ型糖尿病患者餐前和餐后血糖、胰岛素及血脂的关系。方法利用AU5400自动生化分析仪测定30例Ⅱ型糖尿病患者和30例正常人餐前和餐后血糖、胰岛素、血脂、载脂蛋白及游离脂肪酸。结果餐前Ⅱ型糖尿病组的GLU、TG、FFA高于正常对照组,HDL-c低于正常对照组(P<0.05)。餐后Ⅱ型糖尿病组的GLU、TG、FFA高于正常对照组,HDL-c低于正常对照组(P<0.05)。另外Ⅱ型糖尿病组餐后CHOL、LDL-c、ApoA1、FFA下降程度高于正常对照组(P<0.05)。结论Ⅱ型糖尿病患者血糖利用障碍,脂质利用加剧,高胰岛素水平有利于降低血脂水平。
- 李贵星刘双凤胥劲
- 关键词：糖尿病胰岛素血脂
