公共文化服务平台

史茜: 作品数：22 被引量：70H指数：5; 供职机构：新疆出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

合作作者

实时荧光定量PCR检测弓形虫GRA6基因方法的建立和应用被引量：4: 2014年; 【目的】在建立快速且准确检测牛弓形虫病的实时荧光定量PCR方法,以进一步研究该病对奶牛的感染情况,为临床诊断与防控提供依据。【方法】以已发表的牛弓形虫GRA6基因作为检测弓形虫病的目的基因,对上述基因各设计一对引物和一条Taqman探针,该探针5'端用荧光基团JOE标记,3'端用Eclipse标记,进行单重荧光定量PCR。【结果】经反应条件的优化,建立了能够检测牛弓形虫GRA6基因的荧光定量PCR方法。该方法具有具有较好的特异性和可重复性,对GRA6基因的检测最低限为7×100copies/反应,是普通单重PCR的灵敏度的100倍。【结论】用该方法对58份临床样品进行检测,有12份样品存在弓形虫感染,阳性检出率为20.69%,可用来对弓形虫进行快速、准确的检测。; 彭武丽季新成史茜于学辉; 关键词：弓形虫病荧光定量PCR

TLRs介导的信号通路在马链球菌感染RAW264.7细胞中的作用被引量：6: 2016年; 为探究Toll样受体(TLRs)介导的信号通路在马链球菌马亚种(S.equi)感染小鼠巨噬细胞RAW264.7中的作用,收集S.equi感染后不同时间点的RAW264.7细胞,提取总RNA并反转录成cDNA,利用实时荧光定量PCR技术检测细胞Toll样受体1、2、6(TLR1、TLR2、TLR6)、接头蛋白骨髓分化蛋白88(MyD88)及细胞因子IL-1、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-αmRNA的表达情况。结果显示,S.equi感染RAW264.7细胞后6h时,TLR1、TLR2、TLR6与MyD88mRNA水平均较对照组没有显著差异(P>0.05);感染后12h时,TLR1、TLR2和TLR6mRNA表达量未出现明显上升(P>0.05),而MyD88mRNA水平极显著升高(P<0.01);感染后24h时,TLR1、TLR2和TLR6mRNA表达水平出现极显著升高(P<0.01),MyD88 mRNA表达没有显著变化(P>0.05),且IL-10和IL-12mRNA水平与对照组相比极显著升高(P<0.01),IL-1、IL-6和TNF-αmRNA水平均极显著下降(P<0.01)。结果表明,TLRs介导的信号通路参与S.equi感染RAW264.7细胞的免疫应答反应。; 杜润慈刘建华史茜付强冉多良; 关键词：RAW264.7细胞 TOLL样受体

牛病毒性腹泻病毒内标双重TaqMan荧光RT-PCR方法的建立及初步应用被引量：1: 2014年; 为建立牛病毒性腹泻病毒（BVDV）内标双重TaqMan荧光RT-PCR方法,本研究根据BVDV 5＇-UTR区序列设计引物和荧光标记探针,通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）扩增获得内标模板,经体外转录得到可以作为内标物的cRNA。经反应条件的优化,建立了BVDV内标双重TaqMan荧光RT-PCR检测体系。结果表明：当cRNA浓度为103拷贝/μL时,二者均有较好的扩增曲线;该方法对I型BVDV的检测灵敏度为0.25 TCID50,对II型BVDV的检测灵敏度为2.5 TCID50;利用该方法对猪瘟病毒等其他相关核酸的检测结果均为阴性;重复性检测Ct值变异系数为0.54~4.73。对506份临床样品检测,结果有23份样品为阳性,阳性样品检出数量和编号与不含内标的单一荧光RT-PCR方法完全一致,表明该方法可以用来对BVDV进行准确、快速检测,并且可以对检测结果进行质量监控。; 季新成史茜郭春娟王科珂冉多良; 关键词：牛病毒性腹泻病毒内标

乌鲁木齐市畜禽肉储存与销售环节食源性细菌鉴定及分析被引量：1: 2017年; 目的了解乌鲁木齐市畜禽肉储存与销售环节细菌的污染状况,为细菌引起的食源性疾病的防控提供依据。方法依据食品安全国家标准中相关食品微生物检验标准和《全国食源性致病菌监测工作手册》,对乌鲁木齐市部分畜禽肉储存库、超市及农贸市场进行随机采样检测。结果在200份样品中共检出20株致病菌,总检出率为10.0%。其中沙门菌检出率最高,为4.5%,其次为单核细胞增生李斯特菌(2.5%),检测过程中未发现大肠杆菌O157∶H7。结论乌鲁木齐市畜禽肉储存与销售环节不同程度受到沙门菌和单核细胞增生李斯特菌的污染,以生鸡肉污染最严重。应加强禽畜屠宰、畜禽肉加工及销售等过程产品的检疫、检测及卫生监管,减少食源性疾病的发生。; 蔡扩军任皓李爱巧杨泽林史茜马卫平; 关键词：畜禽肉细菌

牛新孢子虫病和弓形虫病双重PCR检测方法的建立与应用被引量：7: 2013年; 为了建立区分检测牛新孢子虫病和弓形虫病的双重PCR方法,本研究以已发表的牛新孢子虫Nc-5基因和弓形虫GRA6基因分别作为目的基因,各设计一对引物,可分别扩增出222bp和124bp的目的条带。经优化反应条件,建立了可同时检测牛新孢子虫病和弓形虫病的双重PCR方法。该方法对上述两种基因的检测灵敏度均为103copies/反应,只比单PCR的灵敏度低10倍,且具有较好的特异性和重复性。经临床应用验证,该方法可用来对新孢子虫病和弓形虫病进行同步快速检测。; 彭武丽邓明俊季新成史茜于学辉; 关键词：新孢子虫病弓形虫病

牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 2014年; 为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5′-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288bp)。为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152bp)。通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生。该方法的检测灵敏度约为100TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性。通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36%。该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制。; 季新成段琛王克栋史茜于学辉冉多良; 关键词：牛病毒性腹泻病毒内标

牛病毒性腹泻病毒基因分型双重RT-PCR方法的建立被引量：4: 2013年; 根据GenBank已发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因Ⅰ型和Ⅱ型5’端非编码区(5’-UTR)保守序列,设计两对针对基因Ⅰ型和Ⅱ型的特异性引物,经反应条件的优化,建立了在同一反应体系中同时检测BVDV基因Ⅰ型和Ⅱ型的RT-PCR方法。该方法对两个基因型的病毒检测灵敏度均为2TCID50,只比单重PCR的灵敏度低了10倍。且具有较好的特异性和可重复性。经临床应用验证,该方法可用来对两个基因型的BVDV进行同步分型检测。; 熊浩季新成王克栋史茜冉多良彭武丽于学辉; 关键词：双重RT-PCR

天然植物源性化妆品中致病微生物同步快速检测方法的建立被引量：2: 2015年; 【目的】建立天然植物化妆品中3种动植物源致病菌的快速、敏感、特异的多重PCR诊断检验方法。【方法】设计肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformisin)3种菌的特异性PCR引物,通过单一、双重及三重PCR反应检测。【结果】种动植物源致病菌的单一、双重和三重PCR均成功扩增出目的片断,没有非特异性扩增。通过对人工感染膏状染发剂的PCR检测进行灵敏度验证,得出三种菌检出限:Klebsiella pneumoniae为4.5×10 CFU/m L;Pseudomonas aeruginosa为6×102CFU/m L;Bacillus licheniformisin为1×10 CFU/m L。【结论】建立的多重PCR反应系统具有较好的特异性和灵敏性,为天然植物型化妆品中常见致病菌的检测提供了快速、简便、可靠的方法。; 马雪艺黄玲史茜伊力亚朱漪刘俊; 关键词：肺炎克雷伯氏菌铜绿假单胞杆菌地衣芽孢杆菌多重PCR

多重PCR检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体被引量：7: 2014年; 为了建立同步检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体感染的多重PCR方法,根据GenBank上具有属间特异性的布鲁菌.Bp26基因、鹦鹉热衣原体23S rRNA基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计1对特异性引物。通过优化PCR反应体系和扩增条件,建立了能够同时检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体的多重PCR方法。该方法具有较好的特异性和可重复性,对3种基因单重PCR检测敏感性均达到3.1×10~2拷贝·反应^-1,对3种病原基因同步检测的敏感性能达到3.1×10~3拷贝·反应^-1。利用该方法对采自不同流产牛的抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液等172份临床样品进行检测,检测到布鲁菌感染阳性样品53份,鹦鹉热衣原体感染阳性样品2份,贝纳氏柯克斯氏体感染阳性样品10份,且检测到布鲁菌和鹦鹉衣原体混合感染阳性样品2份,布鲁菌和贝纳氏柯克斯氏体混合感染阳性样品2份,尚未检测到3种病原混合感染的阳性样品。结果表明,建立的多重PCR方法可以用来对奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体进行同步、快速、灵敏的检测。; 彭武丽季新成于学辉史茜王科珂李娜; 关键词：布鲁菌鹦鹉热衣原体多重PCR

新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因的原核表达与纯化被引量：1: 2013年; PCR扩增新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因,将其构建至原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL-21菌株。对重组表达质粒pET28a/SRS2与pET28a/SAG1IPTG的诱导浓度和诱导温度等条件进行了摸索,确定蛋白最佳诱导时间分别为5、3h,IPTG浓度均为0.8 mmol/L。经组氨酸标记Ni 2+柱纯化后获得的蛋白纯度均大于93.5%,蛋白质量浓度分别为1.23、1.1g/L。经Western blotting检测证明表达的蛋白具有较好的特异性。用纯化后pET28a/SRS2、pET28a/SAG1和二者等量混合物包被酶标板,经ELISA检测表明,表达的蛋白具有较强免疫活性,2种蛋白等量混合物包被酶标板与各蛋白单独包被酶标板检测比较,并未见D值升高。; 史茜员丽娟季新成于学辉; 关键词：新孢子虫 WESTERN BLOTTING ELISA

史茜

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

史茜

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈