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叶金波

作品数:11 被引量:13H指数:2
供职机构:深圳市疾病预防控制中心更多>>
发文基金:国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 7篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 7篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 6篇细胞
  • 5篇SET
  • 4篇肝细胞
  • 3篇质谱
  • 3篇慢病毒
  • 3篇甲基化
  • 3篇RNA干扰
  • 3篇SHRNA慢...
  • 2篇液相
  • 2篇液相色谱
  • 2篇三氯乙烯
  • 2篇色谱
  • 2篇相色谱
  • 1篇蛋白
  • 1篇电离
  • 1篇毒性
  • 1篇药疹
  • 1篇药疹样皮炎
  • 1篇正常肝细胞
  • 1篇职业性三氯乙...

机构

  • 10篇深圳市疾病预...
  • 2篇湖南师范大学
  • 2篇暨南大学
  • 1篇深圳大学
  • 1篇深圳出入境检...

作者

  • 10篇刘建军
  • 10篇叶金波
  • 5篇黄培武
  • 5篇黄新凤
  • 5篇任晓虎
  • 4篇洪文旭
  • 3篇张航
  • 3篇黄海燕
  • 3篇蒋英芝
  • 2篇刘威
  • 2篇杨细飞
  • 2篇周桂凤
  • 2篇许华
  • 2篇胡韬
  • 1篇周丽
  • 1篇王宏菊
  • 1篇李杰
  • 1篇夏菠
  • 1篇赵琼晖
  • 1篇胡俊杰

传媒

  • 2篇中华预防医学...
  • 2篇癌变.畸变....
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇生物技术通报
  • 1篇毒理学杂志

年份

  • 3篇2015
  • 1篇2014
  • 3篇2013
  • 3篇2012
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
SET shRNA慢病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定
目的构建SET基因shRNA慢病毒表达载体,为研究SET在TCE毒性机理中的作用提供技术支持。方法通过NCBI检索SET序列和查阅文献,设计合成5对shRNA片段,退火后连接到慢病毒载体pLNX-shRNA1 vecto...
黄新凤叶金波蒋英芝任晓虎黄培武刘建军
关键词:SETRNA干扰慢病毒
姜黄素对纳米二氧化硅诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用被引量:2
2013年
目的研究姜黄素对纳米二氧化硅诱导HaCaT细胞损伤的保护作用。方法建立15-nm二氧化硅致HaCaT细胞损伤的体外研究模型,通过CCK-8法检测细胞活力水平;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和细胞内丙二醛(MDA)含量,评价细胞的损伤程度。结果姜黄素能明显改善15-nm二氧化硅诱导HaCaT细胞的损伤,与二氧化硅组相比,姜黄素干预组能提高细胞存活率,细胞培养液中的LDH漏出量明显减少(P<0.05),细胞内的MDA明显降低(P<0.05)。结论姜黄素对15-nm二氧化硅诱导的HaCaT的细胞损伤具有一定的保护作用。
洪文旭洪文旭周桂凤胡韬叶金波陈晓丹张航
关键词:姜黄素纳米二氧化硅HACAT细胞细胞损伤
SET shRNA慢病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定
目的构建SET基因shRNA慢病毒表达载体,为研究SET在TCE毒性机理中的作用提供技术支持。方法通过NCBI检索SET序列和查阅文献,设计合成5对shRNA片段,退火后连接到慢病毒载体pLNX-shRNA1 vecto...
黄新凤叶金波蒋英芝任晓虎黄培武刘建军
关键词:SETRNA干扰慢病毒
文献传递
利用MALDI-TOF-MS鉴定细菌方法的建立及应用
目的建立利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted LaserDesorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF-M...
刘建军刘威夏菠洪文旭黄新凤任晓虎叶金波黄培武
关键词:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱细菌
文献传递
SET基因shRNA慢病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定
2013年
目的:构建SET基因shRNA慢病毒表达载体,为研究SET在三氯乙烯毒性机制中的作用提供技术支持。方法:通过NCBI检索SET序列,设计合成5对shRNA片段,退火后连接到慢病毒载体pLVX-shRNA1 vector。挑取筛选的单菌落,经PCR和测序鉴定后提取质粒。将质粒共转染到293T细胞,收集病毒上清,转导入L-02肝细胞中,利用嘌呤霉素筛选得到SET缺陷型细胞,最后利用荧光定量PCR和Western blot鉴定干扰效果。结果:PCR和测序结果证明双链shRNA正确插入慢病毒载体pLVX-shRNA1 vector,共转染293T细胞得到高滴度病毒,转导L-02细胞筛选出SET基因缺陷型细胞。结论:利用慢病毒介导的RNAi技术成功构建了SET基因缺陷型细胞。
刘建军蒋英芝叶金波李杰杨细飞周丽黄海燕黄新凤
关键词:SETRNA干扰慢病毒
三氯乙烯对L-02肝细胞中SET相互作用蛋白eEF1A1、eEF1A2和DDB1 mRNA表达水平的影响
2015年
目的:探讨人L-02肝细胞经三氯乙烯(TCE)染毒后SET相互作用蛋白e EF1A1、e EF1A2和DDB1 m RNA表达水平的变化。方法:取对数生长期的L-02肝细胞,暴露于不同浓度TCE(1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)中,以DMSO为溶剂对照。24 h后,采用实时荧光定量PCR检测e EF1A1、e EF1A2和DDB1 m RNA表达水平。结果:与对照组相比,不同浓度的TCE均能够使L-02肝细胞e EF1A1、e EF1A2和DDB1 m RNA表达水平发生明显变化。其中,DDB1和e EF1A2 m RNA表达水平在低浓度(1.0 mmol/L)TCE暴露下显著升高,而随着TCE浓度的升高其m RNA表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。e EF1A1 m RNA表达水平随着TCE浓度的增加而升高(P<0.05)。结论:TCE染毒可诱发L-02肝细胞中SET相互作用蛋白的m RNA表达水平发生改变。
黄爱博洪文旭叶金波刘建军许华
关键词:三氯乙烯细胞毒性
高效液相色谱-串联质谱检测基因组DNA甲基化方法的建立被引量:2
2014年
目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)检测基因组DNA甲基化水平的方法。方法:以5-mdC和dG为标准品,采用全自动高效液相色谱系统进行分离,串联电喷雾质谱检测,选择多反应监测模式(MRM)测定标准品,绘制标准工作曲线。结果:在MRM模式下选取5-mdC(m/z 241.9→126.3)和dG(m/z 268.1→152.3)分别作为定量检测的母子离子对,各化合物能实现良好的基线分离;5-mdC和dG碰撞能均为15 eV,去簇电压分别为40和45 V,最低定量限分别为1.65和2.47 fmol;标准品的响应值比为90%~110%;5-mdC含量的天内相对标准偏差和天间相对标准偏差均小于8%。结论:HPLC-ESI-MS/MS是能应用于检测基因组DNA甲基化的一种高通量、高准确率、高分辨率、高灵敏度且重复性好的方法。
张航胡俊杰汤瑞华叶金波任晓虎胡韬黄培武杨细飞黄海燕刘建军
关键词:高效液相色谱串联质谱DNA甲基化
职业性三氯乙烯药疹样皮炎诊断模型的建立被引量:1
2013年
目的应用弱阳离子交换磁珠(magneticbeadsbasedweakcationexchangechromatography,MB—WCX)、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix—assistedlaserdesorptionionizationtime—of-flightmassspectrometry,MALDI—TOF—MS)和ClinProTools生物信息学方法检测职业性三氯乙烯药疹样皮炎(occupationalmedicamentosa—likedermatitisinducedbytrichlor(1ethylene,OMLDT)患者的血清多肽指纹图谱,建立OMLDT诊断模型。方法收集2009年12月至2010年10月经深圳市职业病防治院诊断的OMLDT患者和对照人群血清样品各28份,选取其中的患者和对照人群血清样品各14份作为建模组,采用MB—WCX联合MALDI—TOF—MS技术检测血清多肽指纹图谱,筛选OMLDT特征性多肽标志并建立OMLDT疾病蛋白质组学诊断模型。用其余的14份患者和14份对照人群的血清样作为验证组,评价模型的准确度和识别率。结果应用ClinProTools软件,共得到159个峰,33个为有统计学意义的峰(P〈0.05)。其中,相对于对照组,建模组的病例组中有20个峰表达降低,有13个表达增高。采用监督神经网络算法(supervisedneuralnetworkalgorithm,SNN)对多肽峰进行筛选,质荷比(m/z)为2106.29和3263.78的2个多肽峰受试者工作特征曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve,ROC)的下面积(TheareaundertheROCcurve,AUC)最接近1,最能区分病例组和对照组,2D分布图上也能明显区分,选择这2个多肽峰构建OMLDT的诊断模型。诊断模型的交叉验证和识别能力分别是87.5%和98.5%,灵敏度和特异度分别为84.8%和82.1%。结论应用MB—WCX、MALDI—TOF—MS技术结合ClinProTools软件首次对OMLDT建立诊断模型并验证,筛选到了特异性差异多肽,具备较高的灵敏度和特异度,为临床早期诊断提供了科学依据。
叶金波刘威周桂凤任晓虎黄培武洪文旭黄海燕刘建军
关键词:三氯乙烯皮炎
质谱技术在DNA甲基化研究中的应用
2015年
DNA甲基化是最重要的表观遗传修饰之一,主要发生在哺乳动物基因组Cp G核苷酸序列中的胞嘧啶C-5位点,并与机体生长发育、转座子沉默、X染色体失活及许多疾病的发生相关。但对DNA甲基化的形成、维持和重构的分子机制的认识是有限的,需要从基因组水平寻找最优的DNA甲基化定性和定量分析方法,而质谱技术以高敏感性、高通量、高准确率、高分辨率、快速且重复性好等优势在该研究领域具有较大的应用价值。介绍质谱技术在全基因组DNA甲基化和启动子区甲基化分析中的应用。
黄新凤叶金波刘建军
关键词:启动子区甲基化质谱液相色谱
SET基因缺陷对三氯乙烯诱导人正常肝细胞DNA甲基化水平改变的影响被引量:2
2015年
目的比较三氯乙烯(trichloroethylene)诱导人正常肝细胞(L-02细胞)和SET基因缺陷L-02细胞(SET缺陷细胞)中DNA甲基化相关指标的变化,探讨SET与三氯乙烯诱导的表观遗传调控作用之间的关系。方法选用前期建立的SET缺陷细胞为研究对象,使用三氯乙烯分别对L一02细胞和SET缺陷细胞进行处理,检测细胞增殖水平、细胞DNA甲基化水平和DNA甲基转移酶(DNAmethvltrans伯rases,DNMTs)活性的变化,通过Westernblot法从蛋白水平分析DNMTs(DNMT1、DNMT3a、DNMT3b)的表达变化。结果三氯乙烯处理L-02细胞和SET缺陷细胞24h后,两种细胞的增殖水平均呈现下降趋势。使用0、1.0、2.0、4.0和8.0mmol/L的三氯乙烯处理细胞后,L-02细胞的相对增殖水平分别为100.00±2.70、83.34±2.38、75.56±4.51、71.67±2.77、66.67±1.63(F=58.29,P〈0.001);SET缺陷细胞的相对增殖水平分别为101.12±1.67、85.01±2.33、79.44±1.67、78.337±3.89、76.11±3.33(F=42.41,P〈0.001)。0、1.0、2.0、4.0和8.0mmol/L的三氯乙烯处理L-02细胞和SET缺陷细胞24h后,L-02细胞的DNA甲基化水平分别为3.77±0.08、3.48±0.08、3.38±0.10、3.14±0.15、2.91±0.07,呈下降趋势(F=212.87,P〈0.001);SET缺陷细胞DNA甲基化水平分别为3.77±0.15、3.57±0.15、3.30±0.11、3.35±0.13呈下降趋势(F=79.32,P〈0.001)。L-02细胞经0、1.0、2、0、4.0、8.0mmol/L的三氯乙烯处理24h后,DNMTI蛋白的相对表达量分别为1.00±0.03、1.28±0.04、1.20±0.04、1.62±0.05、1.43±0.04,表达升高(F=103.00,P〈0.001);而在SET缺陷细胞中DNMT1的相对表达量分别为1.00±0.04、0.96±0.02、1.19±0.05、0.85±0.03、0.83±0.03,出现下降(F=44.18,P〈0.001)。结论SET缺陷可以明显抑制三氯乙烯暴露引起的L-02�
洪文旭黄爱博许华张航王宏菊赵琼晖叶金波刘建军
关键词:人正常肝细胞DNA甲基转移酶
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