吴双庆
- 作品数:3 被引量:16H指数:2
- 供职机构:南开大学医学院更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
- 重组人骨形态发生蛋白-6的表达、纯化及其活性分析被引量:11
- 2003年
- 利用RT_PCR从人胎盘组织中获取BMP_6成熟肽的cDNA片段 ,并克隆到表达载体pET_15b中 ,构建hBMP_6成熟肽的非融合蛋白表达质粒pET_BMP6 ,转化E .coliBL2 1(DE3)。IPTG诱导 4h后 ,工程菌高表达rhBMP_6成熟肽 ,在SDS_PAGE上出现预期的新蛋白带 (≈ 15kD) ,约占菌体总蛋白的 10 % ,表达产物以包涵体形式存在。分离和纯化的包涵体溶解于 8mol L尿素 ,在变性溶解状态下经阳离子交换层析 ,得到目的蛋白纯度达 95 %以上。再经稀释复性后 ,约 80 %的rhBMP_6形成同源二聚体。体外活性分析结果显示 :rhBMP_6可以提高C3H10T1 2细胞碱性磷酸酶活性及促进I型胶原、Osterix(Osx)和骨钙素 (Osteocalcin)等成骨细胞表型转化标记基因mRNA的表达 。
- 阳菊华赵丽杨爽吴双庆张杰朱天慧
- 关键词:纯化活性
- 骨形态发生蛋白-6的研究进展被引量:5
- 2003年
- 骨形态发生蛋白 (BMPs)属于转化生长因子 -β(TGF-β)超家族的成员 ,最初因其能促进成骨细胞、成软骨细胞的分化和诱导异位骨的形成而得名。随着研究的深入 ,BMPs的广泛生物学功能不仅限于其诱导成骨活性 ,而且涉及几乎全身所有系统的发育和形成 ,包括心血管、胃肠、呼吸、泌尿生殖、体被及神经系统的胚胎发育、生长及分化等。 BMP- 6是 BMPs家族成员中之一 ,除了具有 BMP家族的一些特征外 ,还有其独特的分子生物学功能。本文主要阐述了 BMP- 6在近五年中的研究进展 ,包括其结构特征、信号的传递、生物学功能的多样性及其临床应用前景。
- 吴双庆朱天慧
- 关键词:转化生长因子-Β生物学功能信号传递
- 基因工程生产rhBMP-6成熟肽
- 朱天慧阳菊华杨爽吴双庆赵丽吕树军
- 该课题在国内首先建立了hBMP-6成熟肽及GST-BMP6成熟肽融合蛋白的原核表达系统,并依据其特性建立一套较完善、合理的纯化方案,获得纯度达90%以上的目的蛋白。经体外活性分析均具有较高的诱导成骨细胞分化的功能,从而为...
- 关键词:
- 关键词:蛋白纯化活性分析