吴菁华 作品数:44 被引量:305 H指数:9 供职机构: 福建农林大学园艺学院 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 福建省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
建兰AP1基因的克隆、表达及其与MADS-box转录因子相互作用的分析 被引量:19 2013年 为研究APl/SQUA类MADS-box基因在建兰花发育中作用,以‘四季大青’建兰花芽为材料,用RT-PCR和RACE技术获得AP1基因,命名为CeAP1。序列分析表明,CeAP1基因cDNA全长866 bp,其开放阅读框编码一个含241个氨基酸的蛋白质。通过蛋白序列比对发现CeAP1与兰科植物的AP1蛋白质同源性较高。荧光定量PCR分析表明,CeAP1基因在建兰花发育初期高水平表达,同时在营养器官中也表达。酵母双杂交试验分析显示,CeAP1能自身形成同源二聚体,同时也能与除CeAG1外的其他MADS-box发生相互作用。 吴菁华 吴少华 杨超 张志忠关键词:建兰 花发育 相互作用 建兰若干花器官发育基因的表达分析和功能研究 开展花器官发育的分子机制研究具有重要的理论意义,也是利用基因工程培育新品种的基础。兰花是一种重要的世界性花卉,具有极高的观赏价值和经济价值。由于其具有独特的花器官构造,是研究花器官发育的理想材料。兰花花发育的分子机制尚不... 吴菁华关键词:建兰 MADS-BOX 功能分析 文献传递 建兰Actin基因cDNA全长的克隆及其表达分析 被引量:2 2012年 根据单子叶植物的肌动蛋白基因(Actin)的保守区序列设计引物,采用RT-PCR和RACE技术从建兰(Cymbidiumensifolium)中分离出Actin基因cDNA全长。序列分析结果表明,建兰Actin基因长度为1 434 bp,编码区长度为1 134 bp,编码377个氨基酸,将其命名为CeActin,GenBank登录号为JN613147。CeActin推导的氨基酸序列与其他植物的同源性都较高,具有高度的保守性。采用半定量RT-PCR技术分析CeActin在建兰各组织及花不同发育时期的表达情况,结果表明,表达量没有明显差异,表明CeActin基因可作为内参基因。 吴菁华 吴少华 杨超关键词:建兰 肌动蛋白基因 克隆 一种适于PCR检测的DNA微量提取方法 被引量:3 2004年 报道一种简单快速、适于转基因再生植株鉴定的DNA微量提取方法。此法特点:无须研磨,不用液氮,取样量少,操作简便,可在一个离心管中完成;较短时间内可检测大量再生植株,所提取的DNA样品可满足PCR检测要求,结果稳定。 张志忠 吴菁华 吕柳新 陈桂信关键词:DNA 转基因 中国水仙可溶性淀粉合成酶基因NtSSS的克隆和表达分析 被引量:3 2018年 以中国水仙‘金盏银台’的花芽为实验材料,采用RT-PCR技术克隆获得可溶性淀粉合成酶基因NtSSS,开放阅读框1 860 bp,编码620个氨基酸。生物信息学分析表明NtSSS编码的氨基酸序列中包含有2个保守基序-淀粉合成酶催化域(Glyco_transf_5)和活性糖基转移域(Glycos_transf_1),其氨基酸序列与凤梨、小兰屿蝴蝶兰和拟兰等单子叶植物较为相似,而与芦笋SSS蛋白的亲缘关系最近。通过荧光定量PCR技术分析了NtSSS在中国水仙不同组织器官和花芽分化不同发育阶段的表达模式,结果表明NtSSS在花蕾中的表达量显著高于茎、叶、根和成熟花中的表达量;在花芽分化发育期NtSSS基因的表达量较低,而在花器官发育期表达量较高,显示出NtSSS基因与中国水仙花器官的发育有关。 董建涛 张璐 张璐 胡少红 武丹 武丹 吴菁华关键词:中国水仙 花器官发育 福建多花水仙遗传资源与新品种选育的研究 陈晓静 吕柳新 林金文 吴菁华 陈景渌 申艳红 林允信 1、该项目研究目标明确、技术路线正确、方法先进、资料齐全,数据翔实、分析合理、结论可信,完成了合同计划任务,符合鉴定要求。2、该项目针对中国水仙育种资源稀缺、品种匮乏的现状,开展了水仙资源的调查与收集,共获得多花水仙遗传...关键词:关键词:选育 遗传资源 植物几丁质酶及其应用研究进展 被引量:52 2005年 几丁质酶是高等植物普遍存在的一种重要的病程相关蛋白,近年来被广泛应用于植物抗病基因工程的研究.本文概述了国内外有关植物几丁质酶的研究情况,介绍了几丁质酶的特性、结构、分类、细胞学定位和功能及几丁质酶基因的克隆与其在植物基因工程中的应用. 张志忠 吴菁华 吕柳新 林义章关键词:几丁质酶 转基因 转番茄几丁质酶基因西瓜植株的获得及其抗病性研究 被引量:22 2005年 构建了以C aM V 35s启动子驱动的含有番茄几丁质酶基因(Ch i3)的植物表达载体,通过冻融法导入根癌农杆菌(A g robacterium tum ef aciens)菌株EHA 105中,用叶盘法转化西瓜(C itru llus lana tus)栽培种“中育1号”,通过PCR、Sou thern b lot和RT-PCR鉴定,表明外源基因已成功整合到西瓜基因组中,并获得表达。利用尖孢镰刀菌西瓜专化型进行的转基因植株叶片粗提液抑菌效果检测,表明转基因植株的抗病性均有一定程度的增强。 张志忠 吴菁华 吕柳新 何承坤关键词:西瓜 抗病性 中国水仙3个特异种质的分子细胞遗传学分析 被引量:6 2011年 应用荧光原位杂交技术进行rDNA在黄花水仙和两色花水仙染色体上的定位研究,并分析了两色花水仙的基因组成。结果表明:不同材料的NOR位点表现出多态性,即黄花水仙上具3个45SrDNA位点,两色花水仙具有5个位点;5SrDNA在位点和数量上表现出一致性。基因组荧光原位杂交结果表明两色花水仙的染色体有10条来自于黄花水仙,22条来自于白花水仙。根据rDNA在这些种质资源上的分布,结合GISH技术的分析,证实两色花水仙是黄花水仙和白花水仙的天然杂交种。 吴菁华 张志忠 吕柳新关键词:中国水仙 基因组原位杂交 荧光原位杂交 中国水仙STK类抗病基因同源序列的克隆与分析 被引量:5 2011年 根据丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶类(serine-threonine kinase,STK)抗病基因结构中的保守结构域设计简并引物,以中国水仙的基因组DNA为模板,扩增获得4条STK类抗病基因同源序列。同源性分析表明,其均具有STK保守结构域,与已经克隆的Xa21、Pto、Lr10、Lectin等基因在氨基酸水平上的同源性为38.3%~68%。系统进化树分析表明,它们可能是抗病基因的同源序列,这为进一步克隆中国水仙中STK类抗病基因提供依据。 吴菁华 吴少华 杨超关键词:中国水仙 丝氨酸 抗病基因同源序列