周江
- 作品数：39 被引量：139H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 组织纤溶酶原激活剂突变体(La-tPA)转基因鼠的建立被引量：3
- 1999年
- 用羊β－乳球蛋白基因（ＢＬＧ）５区５×１０３ｂ（１０３ｂ，旧称ｋｂ）为调控序列，构建了乳腺表达组织纤溶酶原激活剂突变体（Ｌａ－ｔＰＡ）载体．对５４０枚小鼠受精卵进行显微注射，经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，获得６只整合有人Ｌａ－ｔＰＡ的转基因小鼠，整合率为３２％．
- 卢一凡邓继先程萱周江黄培堂
- 关键词：转基因鼠激活剂突变体
- 小鼠胚胎干细胞体外定向心肌细胞分化的研究
- 胚胎干细胞是从早期哺乳动物囊胚的内细胞团发育而来,在体外具有不分化的无限增殖能力和发育的全能性。被注射到小鼠胚泡中的ES细胞能参与发育形成嵌合体小鼠,并具有分化形成小鼠胚胎的各种类型细胞的能力,包括生殖细胞等。在特定培养...
- 孙彦洵周江杨晓
- 文献传递
- 直接注射质粒DNA表达人G-CSF的研究(英文)
- 1997年
- 转基因动物研究发展至今，对于所构建的表达载体有效性如何，一直缺乏一个验证体系。由于转基因动物的建立较为繁琐复杂，投资大，因而直接用转基因动物去验证所用元件是不明智的。为此，我们采用小鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因（２．６Ｋｂ）为调控序列，人ＧＣＳＦ基因组基因为目的片段，将ＷＡＰ笫一内含子置于ＧＣＳＦ基因５’端，构建成转基因动物乳腺表达载体ｐＩＮＧＧ（Ｆｉｇ．１）。将表达质粒直接注射到怀孕小鼠乳腺。于分婉第８天取乳汁进行ＥＬＩＳＡ检测。在泌乳期小鼠乳汁中检测出人ＧＣＳＦ，表达量达１５３２ｎｇ／ｍＬ（Ｔａｂｌｅ１）。具有一定应用前景。实验中发现：增加注射次数可以提供转染效率，但最佳注射次数仍需摸索。另外，如果换用复制型载体，整合与表达效率有可能大大提高。
- 卢一凡邓继先肖成祖马清钧马清钧
- 关键词：转基因动物质粒DNA直接注射
- 乳清酸蛋白(WAP)基因调控序列的鉴定及在小鼠乳腺细胞表达LacZ基因的研究被引量：7
- 1998年
- 乳清酸蛋白（ＷＡＰ）是小鼠乳中的主要蛋白质．在亚克隆该基因的基础上，对其进行了酶切鉴定，并对该基因５′区进行克隆和序列分析，在核实序列正确后，构建了以其为调控序列，指导β－半乳糖苷酶基因的真核表达质粒，采用直接注射质粒的方法在小鼠乳腺中表达出β－半乳糖苷酶活性，从而证实基因调控序列的功能正确性，可以用于转基因动物乳腺表达研究，同时证实该方法可以作为一种暂时性表达载体的验证方法．
- 卢一凡邓继先周江肖成祖肖成祖
- 关键词：乳清酸蛋白乳腺表达Β-半乳糖苷酶
- 用三步法纯化重组人促红细胞生成素
- 1997年
- 在生物反应器中培养中国仓鼠卵巢细胞—促红细胞生成素(CHO-EPO)C2细胞株,培养上清液中重组人促红细胞生成素(rHuEPO)表达水平达2000～3000U/ml。培养上清经过三步纯化:第一步为反相柱色谱,可将样品浓缩约96.7％,其收集液经充分透析后进行第二步的DEAE-离子交换色谱,最后进行分子筛色谱,总回收率为30％以上,经纯化的rHuEPO比活性为1.5×10~8U/g蛋白,SDSPAGE一条带,扫描测试纯度达98％以上。
- 李琳邓继先卢建申周江
- 关键词：促红细胞生成素色谱纯化
- 基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因剔除小鼠的建立
- Smads家族是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内。TGF-β信号分子通过跨膜苏氨酸、丝氨酸激酶受体复合体进行信号转导。SMAD2属于受体激活的SM...
- 周江程萱孙彦洵吕娅歆程静黄培堂黄翠芬杨晓
- 文献传递
- 基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因打靶小鼠的建立
- Smads家庭是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内.SMAD2属于受体激活的SMADs.为了进一步研究Smad2在成体各组织器官及肿瘤发生中的可能作...
- 周江
- 关键词：SMAD2ES细胞CRE重组酶
- 文献传递
- 角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立被引量：17
- 2003年
- 构建了含有角质细胞特异性角质素 5启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pK5 Cre hGH。以显微注射的方法将 4 2kb的转基因片段K5 Cre hGH引入小鼠基因组 ,共注射 72 0枚受精卵 ,其中 6 95枚移植至 2 9只假孕母鼠的输卵管中发育 ,获得子代小鼠 48只 ,经基因型鉴定有 12只小鼠在其基因组上整合有Cre基因 ,整合率为 2 5 %。将带有Cre重组酶基因的小鼠与基因组上携带loxP位点的Smad4条件基因打靶小鼠杂交以检测Cre重组酶组织特异性表达情况以及介导重组的功能。结果表明 ,K5 Cre转基因小鼠只在皮肤组织中表达Cre重组酶并能在体内成功地介导loxP位点的重组。
- 毛春明杨晓程萱吕娅歆周江黄翠芬
- 关键词：CRE转基因小鼠组织特异性
- Smad5双等位基因剔除导致小鼠胚胎干细胞体外定向分化的肌细胞凋亡
- SMAD是转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)家族细胞质内重要的信号转导分子。Smad5是骨形成蛋白(BMP)亚家族的信号分子之一。越来越多的证据表明TGF-β家族所释...
- 孙彦洵周江吕雅歆杨晓
- 文献传递
- 组织纤溶酶原激活剂突变体在转基因小鼠乳腺中的表达被引量：6
- 1998年
- 组织纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）是一种较理想的溶血栓药物，本研究采用其突变体———长效组织纤溶酶原激活剂（ＬＡｔＰＡ）的ｃＤＮＡ作为目的基因，将它插入羊β乳球蛋白（ＢＬＧ）基因起始密码之前，使ＬＡｔＰＡ的转录、翻译受控于ＢＬＧ基因的５′、３′序列，再将所构建的ＢＬＧＬＡｔＰＡ用显微注射方法建立转基因鼠，经点杂交筛选和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹鉴定，获得２只ＬＡｔＰＡ基因整合阳性鼠，并在阳性母鼠乳汁中检测到有溶纤活性的ＬＡｔＰＡ表达，表达水平１５μｇ／ｍｌ。在这两只转基因鼠的９只Ｆ１代子鼠中，有５只是阳性的，ｔＰＡ表达水平维持在１～２μｇ／ｍｌ，ＢＬＧｔＰＡ融合基因整合到小鼠基因组，能稳定地遗传给子代。
- 周江邓继先刘红程萱卢一凡卢一凡
- 关键词：TPA转基因小鼠乳腺表达
