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一种基于人miR-30结构高效干扰LMP1基因表达的慢病毒载体的构建: 2014年; 目的:构建慢病毒载体并利用miRNA原理进行LMP1病毒癌基因干扰的可行性及有效性研究。方法:基于人miR-30a结构,利用靶点分析软件设计4个LMP1的候选干扰靶点,报告基因EGFP与miRLMP1靶点形成共顺反子表达,靶点载体质粒与LMP1高表达质粒用脂质体共转染工具细胞293FT,用Western blot方法筛选最有效的干扰靶点并用三质粒系统在293FT细胞中包装慢病毒,进行滴度鉴定。结果:在293FT工具细胞中成功筛选到一个高效干扰LMP1基因的靶点序列,在Western blot水平的蛋白干扰率高达95%;在20ml培养上清中可获得具有活性慢病毒颗粒7.2×108个,经纯化浓缩获得重组慢病毒颗粒,滴度高达6×109TU/ml,经流式细胞仪检测在80MOI时其感染EBV阳性的鼻咽癌细胞株C666-1的感染率高达80%以上。结论:基于人miR-30a结构的miR-LMP1能高效干扰LMP1基因的蛋白表达,利用慢病毒载体来建立稳定基因干扰肿瘤细胞株可能是一个良好的方法。; 黄必军杨长福朱颖慧周玲朱秀云黄铁军; 关键词：EB LMP1 RNA 慢病毒载体

刺突蛋白亚单位基因疫苗在大鼠体内诱导的体液免疫反应: 2008年; 目的利用重组腺病毒表达SARS病毒蛋白N端，研究其在动物体内诱导的体液免疫反应，探讨将其进一步开发为SARS病毒基因疫苗的可行性。方法用截短的刺突蛋白S1亚单位（SS）腺病毒载体疫苗（Ad—SS）皮下免疫大鼠[1×10^7pfu／（鼠·次），每周1次，连续3周]，用ELISA法测定血清中抗SARS—CoV IgG水平。结果Ad—SS在大鼠体内能诱导产生高滴度的抗SARS冠状病毒IgGs，IgGs在免疫开始2周出现，在最后一次免疫1～2周达到最高（最高滴度为1：2^8.5）。用Vero—E6细胞体外攻击保护试验检测免疫动物血清中SARS病毒中和抗体发现，Ad—SN免疫鼠血清能在体外保护Vero—E6细胞免受SARS病毒攻击，中和滴度达到1：2^6.9。结论Ad—SN能在大鼠体内诱导SARS病毒特异的保护性体液免疫，有望发展成为一种SARS基因疫苗。; 朱志刚赵子文柯妙拉周玲; 关键词：SARS冠状病毒刺突蛋白体液免疫

肿瘤基因治疗的基础和关键技术研究: 黄文林刘然义吴江雪姜文奇林旭滨管忠震吕跃黄必军李立黄嘉凌李焱李苏邵建永陈洁敏周玲; 发现发明及创新点：1）首次发现腺病毒抗体产生规律及其对腺病毒基因药物药效的影响，以及分子标志物消涨与临床愈后的关系；2）首次证实Ad-Endo哺乳动物细胞表达产物由于完善的翻译后修饰，其生物学活性和稳定性显著优于原核和酵...; 关键词：; 关键词：肿瘤基因治疗基因药物生产工艺药代动力学

翻译起始因子eIF3A通过抑制核酸切除修复蛋白表达增加鼻咽癌细胞的顺铂敏感性: 目的:顺铂是常用肿瘤化疗药物之一,也是中晚期鼻咽癌综合治疗的首选化疗药物。本研究旨在寻找鼻咽癌顺铂敏感性肿瘤分子标志物并阐明其作用机制。方法:通过有限稀释法从CNE-2细胞株中寻找天然存在的顺铂敏感细胞;用多重Micro...; 刘然义周玲黄文林; 文献传递

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周玲