唐洪林
- 作品数：13 被引量：24H指数：3
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- 发文基金：江西省自然科学基金江西省卫生厅科研基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- STAT6介导白细胞介素-13诱导巨核细胞系HEL细胞血小板膜糖蛋白Ⅱb和血管性血友病因子的表达
- 2009年
- 目的：探索信号转导子和转录激活因子6（STAT6）介导白细胞介素-13（IL-13）对巨核细胞系-人红白血病HEL细胞（HEL）血小板膜糖蛋白Ⅱb（GPⅡb）和血管性血友病因子（vWF）表达的作用，部分阐明IL-13的信号转导通路。方法：RT-PCR检测GPⅡb和vWF mRNA的表达，免疫印迹法检测磷酸化的STAT6、GPⅡb和vWF蛋白的表达，图像分析检测电泳条带吸光度。结果：IL-13（100μg／L）作用HEL细胞，使HEL细胞STAT6磷酸化，磷酸化抑制剂A77-1726（50μmol／L）阻断了IL-13诱导的HEL细胞STAT6磷酸化。IL-13（100μg／L）上调了HEL细胞GPⅡb和vWF mRNA和蛋白的表达，A77-1726（50μmol／L）抑制了STAT6介导的IL-13诱导HEL细胞GPⅡb和vWF mRNA和蛋白的表达。结论：IL-13上调了HEL细胞GPⅡb和vWF的表达，STAT6介导了IL-13上调HEL细胞GPⅡb和vWF的表达。
- 石小玉李文林蔡伟周莹唐洪林
- 关键词：白细胞介素-13
- 肾小管上皮细胞原代培养及鉴定被引量：10
- 2004年
- 目的探讨肾小管上皮细胞体外培养及鉴定方法。方法①采用机械分离结合酶消化法获取肾小管,原代培养肾小管上皮细胞。②利用动态观察、细胞化学染色法及细胞的透射电镜扫描进行鉴定。结果①肾小管段不同换液时间24h、48h、72h、96h、120h,贴壁率分别为:0.1378±2.048E-02、0.3300±7.969E-02、0.5411±3.919E-02、0.5344±2.506E-02、0.4389±3.018E-02,以72小时首次换液最佳。②肾小管上皮细胞成功原代培养并于第4～7天处于对数生长期。细胞碱性磷酸酶染色均呈阳性,透射电镜扫描见细胞面向液层的刷状缘有大量微绒毛形成。结论采用机械结合酶消化法可分离到较纯的肾小管,肾小管段培养72h首次换液细胞贴壁最佳,肾小管上皮细胞用化学结合形态学及鉴定。
- 廖晓星唐洪林孙庭侯垒崔功静
- 关键词：肾小管上皮细胞原代培养酶消化法
- 血小板生成素促进HEL细胞增殖及其c-Mpl的表达
- 2004年
- 目的 研究血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)对巨核细胞系 HEL细胞的增殖及其c Mpl受体表达的影响。方法 ①细胞集落计数法研究TPO对HEL细胞增殖的影响 ;②间接免疫荧光方法及流式细胞术检测TPO刺激后 ,HEL细胞TPO受体c Mpl的表达。 结果 ①TPO可促进HEL细胞集落的形成 ;②TPO上调HEL细胞c Mpl膜蛋白的表达。结论 TPO促进HEL细胞的增殖 ,其部分机制可能是通过上调TPO受体c Mpl的表达来实现。
- 唐洪林李文林石小玉
- 关键词：血小板生成素HEL细胞
- 人肝癌相关基因ANGPTL 4的克隆及鉴定
- 2006年
- 目的获取人肝癌相关基因血管生成素样4(ang iopo ietin-like 4,ANGPTL 4)cDNA克隆,构建重组逆转录病毒载体pM SCV-ANGPTL 4,为进一步相关研究打下基础。方法以人肝细胞株HL-7702的总RNA为模板,用RT-PCR方法体外扩增出人肝癌相关基因ANGPTL 4 cDNA,将其亚克隆至逆转录病毒载体pM SCV,测序鉴定。结果所克隆的ANGPTL 4基因cDNA与文献报道的ANGPTL 4基因完整编码区cDNA一致,成功构建重组逆转录病毒载体pM SCV-ANGPTL 4。结论从人肝细胞株HL-7702中可以稳定克隆出ANGPTL 4基因cDNA,成功将ANGPTL 4 cDNA亚克隆至逆转录病毒载体pM SCV。
- 李克强彭淑牖刘颖斌李文林石小玉唐洪林
- 关键词：肝肿瘤基因
- ePNP自杀基因载体的构建及其表达
- 2009年
- [目的]构建稳定表达ePNP(E.coliPNP)的细胞模型,为肿瘤的基因治疗提供实验基础。[方法]提取大肠杆菌E.coliK12总DNA,PCR方法克隆大肠杆菌ePNP基因,构建逆转录病毒载体质粒pMSCV-ANGPTL4,鉴定测序。脂质体法将三种逆转录病毒载体pMSCV-ANGPTL4、pVSV、pGAG-POL共转染293-EBNA包装细胞,获得高滴度病毒并感染MDA-MB435细胞。荧光显微镜与RT-PCR检测MDA-MB435细胞ePNP基因的表达。[结果]所克隆的ePNP基因与文献报道一致;成功构建了pMSCV/ePNP重组逆转录病毒载体;ePNP基因在MDA-MB435细胞中获得稳定表达。[结论]pMSCV/ePNP自杀基因载体的成功构建及其表达为ePNP应用于肿瘤基因治疗奠定了基础。
- 李克强李文林饶泽昌赵林刘东海唐洪林石小玉
- 关键词：嘌呤核苷磷酸化酶自杀基因重组逆转录病毒载体大肠杆菌
- 白介素-13与造血调控
- 2001年
- 白介素 - 13是由Th2细胞分泌的一种细胞因子 ,具有造血因子超家族类似的基因结构、染色体定位、空间结构及受体结构 ,通过与受体结合 ,形成IL - 13-受体复合物 ,使JAK活化 ,启动JAK -STAT6信号通路 ,激活有关基因的转录 ,调节造血前体细胞的功能。本文就IL - 13对造血系统的作用 ,IL - 13的受体结构 。
- 许铭炎唐洪林石小玉王维洛
- 关键词：白介素-13血细胞生成信号传导造血调控
- 白细胞介素-13促进Dami和HEL细胞的增殖和分化及其机制
- 李文林石小玉王志刚熊丽霞周莹唐洪林李克强等
- 该课题研究采用国际国内先进的细胞生物学、分子生物学、生物化学和免疫细胞化学等方法，对Dami细胞和HEL细胞表达IL-13受体alphal、IL-13促进Dmai细胞和HEL细胞增殖，以及IL-13与其他细胞因子的相互作...
- 关键词：
- 关键词：细胞增殖白细胞介素-13细胞分化
- 白细胞介素13对HEL细胞分化和转录因子c-fos表达的影响被引量：4
- 2006年
- 目的研究白细胞介素13(IL-13)对红白血病细胞系 HEL 细胞分化作用及对 HEL 细胞转录因子 c-fos 表达的影响。方法用 RT-PCR 方法检测 HEL 细胞 IL-13受体α1、GPⅡb、vWF 和 c-fos基因 mRNA 表达,用 Western blot 和流式细胞术分别检测 IL-13受体α1、c-fos、GPⅡb和 vWF 蛋白水平的表达。结果 HEL 细胞表达 IL-13受体α1,用 IL-13(100 ng/ml)作用于 HEL 细胞,GPⅡb和 vWF 基因 mRNA 表达上调,实验组和对照组 GPⅡb/β-actin 吸光度比值分别为2.912,1.303,实验组为对照组的2.23倍(P<0.05);实验组和对照组 vWF/β-actin 吸光度比值分别为0.506,0.217,实验组为对照组的2.33倍(P<0.05)。流式细胞术分析结果显示,实验组 GPⅡb和 vWF 蛋白表达明显高于对照组。IL-13作用于 HEL 细胞30 min,c-fos 基因 mRNA 表达水平达高峰,IL-13作用 HEL 细胞60 min,c-fos 蛋白表达达高峰,30 min 组、60 min 组 c-fos/β-actin 吸光度比值高于其它各组(P<0.05)。结论IL-13可促进 HEL 细胞分化,并上调 c-fos 表达。
- 石小玉于雪梅李文林王志刚唐洪林张学军
- 关键词：白细胞介素13C-FOSHELWILLEBRAND因子
- 促分裂原活化蛋白激酶信号阻断剂在TPO促进UT7细胞增殖和分化中的作用
- 2005年
- 目的探索促分裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase,MAPK)信号阻断剂对巨核细胞生长分化因子(TPO)促进UT7细胞增殖和分化作用,阐明TPO对UT7细胞作用的机制。方法将EGFPpMSCV和MEK1pMSCV质粒转染UT7细胞;转染细胞与TPO共培养,Westernblot法检测UT7细胞MEK1(MAPK/Erkkinase1)磷酸化;观察转染突变(Ser222A)的MEK1和MAPK阻断剂PD98059对UT7细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测转染突变(Ser222A)的MEK1和MAPK阻断剂PD98059对UT7细胞表达CD41的影响。结果①重组逆转录病毒载体MEK1pMSCV和EGFPpMSCV转染UT7细胞,EGFP阳性率为60.73%。②TPO不同的作用时间(1h,3h),实验组磷酸化MEK1均低于对照组(P值均<0.05)。③MAPK阻断剂PD98059和外源突变MEK基因阻断了TPO对UT7细胞的增殖作用,DMSO对照组的细胞增殖率为98.58%,PD98059组的细胞增殖率为39.00%(P<0.05);转染EGFPpMSCV组细胞增殖率为102.12%,转染MEK1pMSCV组细胞增殖率为48.93%(P<0.05)。④MAPK阻断剂PD98059组UT7细胞CD41表达(10.27%)明显低于对照组(36.43%),转染MEK1pMSCV组UT7细胞CD41表达(24.03%)明显低于转染EGFPpMSCV组(40.16%)。结论TPO诱导UT7细胞MEK1磷酸化,TPO作用时间与UT7细胞MEK1的磷酸化有明显的关系。
- 李文林石小玉李蓉唐洪林
- 关键词：TPO细胞增殖分化细胞培养基因转染质粒构建
- 酪氨酸激酶抑制剂A77 1726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原合成作用被引量：1
- 2009年
- 目的:观察酪氨酸激酶抑制剂A771726对白细胞介素13(IL-13)促成纤维细胞胶原合成作用的影响。方法:MTT法观察不同浓度的A771726对成纤维细胞的增殖作用的影响。成纤维细胞分为实验组和实验对照组,实验对照组加入IL-13(100μg/L),实验组加入A771726(50μmol/L)和IL-13(100μg/L),作用24、48、72h后,羟脯氨酸(Hyp)检测A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌胶原蛋白的影响,RT-PCR观察A771726对IL-13促进成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平表达的影响,Western blot观察A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的影响。结果:A771726可抑制成纤维细胞的增殖。羟脯氨酸检测实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌胶原蛋白的含量显著低于实验对照组(P<0.05),RT-PCR观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞I型胶原α1基因(COL1A1)mRNA表达水平显著低于实验对照组(P<0.05),Western blot观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组(P<0.05)。结论:酪氨酸酶抑制剂A771726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原蛋白合成作用,阻断IL-13促成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平和蛋白水平的表达。
- 熊丽霞李文林石小玉刘卓琦唐洪林
- 关键词：酪氨酸酶抑制剂白细胞介素13成纤维细胞胶原
