娄晓芳
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 抗人P-selectin人源性抗体的制备及功能研究
- 近年来, P-selectin在炎症反应及肿瘤转移过程中的作用越来越受到重视,以P-selectin为靶点,阻断P-selectin与其配体的结合,可能对相关疾病的治疗具有较大潜力。目前国际还没有关于P-selectin...
- 娄晓芳
- 关键词:P-SELECTINGPI细胞筛选抗体库
- 文献传递
- 细胞粘附分子P-selectin功能片段在CHO细胞表面的锚定表达被引量:1
- 2008年
- 为了筛选出针对细胞粘附分子P-selectin的特异性抗体,克隆了P-selectin功能性基因片段,使其通过糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定表达于真核细胞的细胞膜上,以用作筛选的抗原。提取人血小板的总RNA,RT-PCR扩增出P-selectin目的基因片段,同时用重叠延伸PCR的方法合成细胞膜锚定信号肽GPI基因;将二者按上下游顺序插入含有弱化neo基因的真核表达载体pMCEw2中;并将构建的重组质粒pMCEw2-GPI-P-selectin转染CHOdhfr-细胞,G418筛选获得阳性细胞株,利用ELISA、免疫印迹和免疫荧光法检测P-selectin的表达。实验证实了P-selectin在细胞膜上获得稳定表达。为进一步进行抗P-selectin的特异性抗体的筛选提供了必要前提。
- 娄晓芳王双杜威世于蕊俞炜源孙志伟
- 关键词:糖基化磷脂酰肌醇粘附分子