宁萌
- 作品数：51 被引量：85H指数：6
- 供职机构：河南省科学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一株基因克隆干扰菌的鉴定及其发酵液降解DNA活性分析
- 2016年
- 旨在寻找导致基因克隆失败的原因,检测整个电泳环境中是否存在对DNA有强降解力的菌株。依据菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列对DNA降解菌株进行鉴定,琼脂糖凝胶电泳分析菌株对DNA的降解活性。结果显示,从DNA电泳槽中分离到了一株菌,革兰氏染色鉴定为阴性菌,对该菌进行液体培养,利用质粒pUC19作为底物,检测该菌发酵液对DNA的降解能力,发现该菌发酵液能够迅速并彻底地降解DNA,其最佳降解温度为45℃,将该菌命名为DD(DNA degrading)。对该菌的16S rDNA进行测序比对后,发现其与粘质沙雷氏菌(Serrtia marcescens)的16S rDNA序列同源性高达100%。结合菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列结果,DD菌株为一株粘质沙雷氏菌,DNA降解活性分析显示其具有很强的DNA降解能力。
- 刁文涛王雪妍陈晓飞冯菲宁萌周伏忠
- 关键词：DNA降解粘质沙雷氏菌
- 鹰嘴豆浆液蛋白发酵与酶解效果的对比分析被引量：1
- 2015年
- 为对比观察国产蛋白酶酶解和益生菌发酵降解鹰嘴豆浆液蛋白的效果,比较酶解法、发酵法降解鹰嘴豆浆液蛋白为小分子蛋白肽的能力,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶分别酶解,纳豆芽孢杆菌、植物乳酸菌、蛹虫草分别发酵鹰嘴豆浆液蛋白,测定不同处理时间时的可溶性氮、DH、电泳条带等的变化情况。研究结果发现,国产碱性蛋白酶酶解鹰嘴豆浆液蛋白240 min,上清液的可溶性氮含量可达到0.1389%,DH为6.43%;木瓜蛋白酶酶解240 min时的上清液可溶性氮含量达到0.0972%,DH为4.41%;而发酵法处理以纳豆芽孢杆菌效果最显著,纳豆芽孢杆菌发酵处理鹰嘴豆浆液蛋白8 h时的上清液可溶性氮含量为0.0895%,DH为4.03%。本研究表明,酶解法降解鹰嘴豆浆液蛋白的效果要比微生物发酵法处理时间短,降解效果更好。
- 周伏忠冯菲宁萌王雪妍刁文涛陈晓飞
- 关键词：酶解可溶性氮水解度
- 结合利用pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的多拷贝载体并在毕赤酵母中表达被引量：2
- 2017年
- 结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的可线性化多拷贝表达载体,并转化毕赤酵母表达目的蛋白.首先将目的蛋白基因构建到组成型表达载体pGAPZαA中,然后依据载体自身特性,用同尾酶BglⅡ和Bam HⅠ切取其表达盒并连接到甲醇诱导型载体pPICZαA中的Bam HⅠ位点处,经多次重复后获得目的蛋白多拷贝表达载体,线性化后电转化毕赤酵母表达目的蛋白.灵芝免疫调节蛋白LZ8是一个已成功在毕赤酵母中表达的蛋白,作为检验该方法的样本其基因被首先构建到载体pGAPZαA中得到质粒pGAPZαA-LZ8,切取其表达盒构建到载体pPICZαA中,经过4次重复得到了多拷贝表达载体pPICZαA-[GAPZαA-LZ8]4,然后利用pPICZαA特有的限制性内切酶位点SacⅠ进行线性化,最终电转化到毕赤酵母GS115中进行组成型表达蛋白LZ8,其表达量达到pGAPZαA-LZ8转化菌株表达量的2~3倍.经检验,结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA可以构建目的蛋白的多拷贝表达载体,并且可以对载体进行线性化而不影响转化酵母时的转化效率.
- 冯菲王雪妍陈晓飞宁萌周伏忠刁文涛
- 关键词：多拷贝毕赤酵母
- 一种快速定量检测氧化乐果残留的方法
- 一种快速定量检测氧化乐果残留的方法，利用氧化乐果水溶液在紫外特定波长下表现出稳定吸收峰的特性建立，氧化乐果的含量与其吸光度值的大小成正比，在坐标系中呈现正比例变化趋势，依此建立标准曲线，求得回归方程为Y=aX+b（b=0...
- 王继雯陈国参岳丹丹李冠杰张晓梅刘莹莹杨文玲甄静宁萌贾彬
- 文献传递
- 柱状田头菇原生质体制备条件的实验研究
- 2012年
- 对影响柱状田头菇菌株原生质体制备的条件进行了研究,这些条件包括不同的培养基、不同的温度、不同的pH、不同的酶解时间、不同的菌龄以及不同的渗透压稳定剂.结果表明:液体摇瓶振荡培养5 d的菌丝,以0.6 mol/L的甘露醇或MgSO4作为渗透压稳定剂,采用2%的真菌溶壁酶,在pH为6、温度为31℃的条件下酶解2 h,柱状田头菇菌株的原生质体制备率最高,可达到2.31×106个/mL.
- 周伏忠陈晓飞孙玉飞宁萌陈国参
- 关键词：柱状田头菇原生质体
- 软腐白菜根系土壤中短稳杆菌的分离和鉴定被引量：1
- 2012年
- 采用选择性培养基,从软腐白菜根系土壤中分离出产生香气的细菌,通过对菌株进行形态学观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列测定、比对分析和系统发育树构建,对该类群菌株进行初步分类鉴定.结果表明,12株产生烘焙香气细菌的形态学特征及生理生化特性与短稳杆菌(Empedobacter brevis)LMG 4011T(AM177497)一致,16S rRNA基因序列与短稳杆菌基因序列同源性达99.86%,初步鉴定该类菌为短稳杆菌.
- 杜迅王亚南何蔚荭安明理宁萌
- 关键词：土壤
- 高效降解有机磷农药复合菌系的技术研究
- 慕琦陈国参王继雯慕兰杨文玲甄静宁萌唐攀杜迅李冠杰刘莹莹薛蕾徐文涛张永战周伏忠李长伟权淑静贾彬张草王庆安岳丹丹
- 长期以来,有机磷农药(organophosphorus pesticides,OPS)在国内外农业生产中作为主要的杀虫剂得到了广泛应用,但OPS多数均为中高毒性农药,且多具有内吸毒性,自然状态下降解缓慢,导致其在环境中大...
- 关键词：
- 关键词：有机磷农药杀虫剂
- 鹰嘴豆发酵产纳豆激酶的初步研究
- 2017年
- 本研究从实验室保存的15株枯草芽孢杆菌中选育出适合鹰嘴豆(Cicer arietinum)发酵生产纳豆激酶(Nattokinase,NK)的优良菌株,并开展了菌株固体发酵产NK的工艺参数优化研究;NK酶活检测采用血纤维蛋白平板透明圈法。结果发现,培养基含水量、pH值、发酵温度及发酵时间均对鹰嘴豆发酵产生纳豆激酶有较大影响,培养基中添加适量的无机盐和表面活性剂有利于纳豆激酶的产生。在优化条件下(培养基含水量64%,PH7.0,31℃,培养36h),鹰嘴豆固态发酵产纳豆激酶的单位酶活可达到6731FU/g,获得了较高的单位酶活。
- 周伏忠陈晓飞王雪妍宁萌刁文涛李志金
- 关键词：鹰嘴豆固态发酵纳豆激酶菌株
- 纳豆激酶的分离纯化及体外溶栓特性研究被引量：6
- 2010年
- 通过硫酸铵分步沉淀和Sephadex G-100凝胶过滤层析,分离纯化纳豆激酶,并用SDS-PAGE和PAGE电泳检测纯化效果,体外溶栓试验检测纳豆激酶的溶栓特性。SDS-PAGE显示纳豆激酶为单一条带,分子量为33kDa,而PAGE至少有3个具有纤溶活性的区域,表明纳豆激酶可能由几种同工酶组成,体外溶栓结果表明:与蚓激酶相比,纳豆激酶具有较强的的体外溶栓和抗凝作用,并有一定的溶血作用。
- 陈晓飞周伏忠陈国参谢宝恩宁萌
- 关键词：纳豆激酶分离纯化体外溶栓
- 小麦内生多黏类芽孢杆菌hu-4产β-1,3-葡聚糖酶发酵工艺研究被引量：1
- 2008年
- 对产β-1,3-葡聚糖酶小麦内生多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus Polymyxa)hu-4的产酶工艺进行了研究,通过正交实验建立和优化了hu-4菌株的发酵产酶培养基,确立了最佳发酵工艺.结果表明,以蛋白胨1.8%,酵母膏0.6%,玉米浆1.2%,酵母葡聚糖0.5%,矿质元素混合溶液0.5%为其最佳发酵培养基构成,pH值7.0;在温度32℃,转速200r/min,接种量2%的工艺条件下,发酵周期为36～38h,产酶效果较好.
- 刘安邦王刚陈国参周伏忠宁萌
- 关键词：发酵工艺葡聚糖酶
