尧青
- 作品数：20 被引量：29H指数：3
- 供职机构：湖北科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省教育厅优秀中青年人才项目湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 磷酸肌酸钠通过miR-25-3p/肌浆网Ca^2+泵-2a信号通路改善多柔比星诱导大鼠心肌损伤被引量：5
- 2019年
- 目的探讨磷酸肌酸钠(CP)对多柔比星(DOX)所致大鼠心肌损伤的保护机制.方法①体内实验:雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、DOX组和CP+DOX联合组,均隔天给药1次,持续26 d.DOX组前3次ip给予生理盐水5 mL·kg^-1;之后ip给予DOX 2 mg·kg^-1,共7次.CP+DOX组,前3次ip给予CP 200 mg·kg^-1;之后隔天ip给予CP 200 mg·kg^-1,30 min后再ip给予DOX 2 mg·kg^-1,共7次;之后继续隔天ip给予CP 200 mg·kg^-1,共3次.停药1周后进行指标检测.②体外实验DOX 1μmol·L^-1单独或与N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)0.5 mmol·L^-1或与CP 1 mmol·L^-1共同处理H9C2心肌细胞24 h.HE染色观察大鼠心肌组织病理变化;Masson染色检测大鼠心肌组织胶原纤维沉积;TUNEL染色检测大鼠心肌组织细胞凋亡;荧光定量PCR分析大鼠心肌组织和心肌细胞H9C2中miR-25-3p mRNA表达;CCK8法检测心肌细胞H9C2存活率;Western印迹法检测大鼠心肌组织和H9C2心肌细胞中超氧化物歧化酶2(SOD2)、肌浆网Ca^2+泵-2a(SERCA2a)和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达.结果①体内实验:与正常对照组相比,DOX组心肌组织中肌纤维排列紊乱,胶原纤维累积增加,细胞凋亡增加明显,miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平上升(P<0.05),而SOD2和SERCA2a蛋白表达水平下降(P<0.05);与DOX组比较,CP+DOX联合组心肌组织肌纤维排列较为整齐,胶原纤维累积减轻,凋亡细胞明显减少(P<0.05),miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平降低,而SOD2和SERCA2a蛋白表达水平明显增加(P<0.05).②体外实验:DOX诱导心肌细胞H9C2内miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达呈时间依赖性上调(r=0.9681,r=0.66,P<0.05),而SERCA2a蛋白表达水平在DOX处理3 h后达到峰值,随后逐渐下降至低于细胞对照组.与细胞对照组比较,DOX组存活率显著降低(P<0.05);与DOX组比较,CP+DOX组细胞存活率显著升高(P<0.05);与DOX组相比,CP+DOX组H9C2细胞miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表
- 张雪洁尧青胡玲柯志强张波张波杨晓松
- 关键词：磷酸肌酸钠多柔比星
- 基于细胞骨架差异的心肌细胞纯度快速鉴定方法
- 2023年
- 目的寻找并确定一种优于传统且简单快速的心肌细胞鉴定方法。方法取1~3d龄SD大鼠心脏,0.1%Ⅱ型胶原酶消化,差速贴壁分离心肌细胞与心肌成纤维细胞,对心肌细胞使用5-溴脱氧尿嘧啶进行纯化,并通过传代对心肌成纤维细胞进行纯化。采用免疫荧光法,Phalloidin固定染色和Tubulin Tracker活细胞染色鉴定心肌细胞与心肌成纤维细胞。结果心肌细胞的微丝与微管可分别被Phalloidin和Tubulin Tracker标记,而心肌成纤维细胞的微丝和微管均未被标记,且这两种染色方法耗时极少。结论基于细胞骨架差异的特征,通过标记微丝或者微管能够简便快速鉴别心肌细胞和心肌成纤维细胞。本方法明显优于免疫荧光染色,将提高心血管疾病在细胞水平上的研究效率。
- 潘丛彬王思琪赵宝清尧青郭西英欧阳昌汉任展宏刘超
- 关键词：心肌成纤维细胞微丝微管细胞鉴定
- 人G6PD在大肠埃希菌中的表达及体外抑制剂筛选模型的建立
- 2022年
- 目的表达人6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)并建立其体外抑制剂筛选模型。方法设计一对5′端分别带NdeⅠ、XhoⅠ位点的引物,PCR扩增G6PD cDNA。将cDNA和质粒pET-28a经NdeⅠ+XhoⅠ酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌Top10。将鉴定的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.4 mmol/L IPTG诱导G6PD表达,镍离子亲和层析柱纯化G6PD。以6-磷酸葡萄糖(G6P)和烟酰胺腺嘌呤核苷二磷酸(NADP+)为G6PD的底物和辅因子,检测340 nm波长处光吸收值(A_(340))的变化,确定G6PD及其抑制剂脱氢表雄酮(DHEA)的最佳浓度,计算模型的可靠性指数—Z′因子。结果构建了重组质粒pET-28a-G6PD,重组菌BL21(DE3)-pET-28a-G6PD经IPTG诱导后,可溶性G6PD表达量为2.5 mg/L,G6PD、DHEA的最适浓度分别为900μg/L、20μmol/L,筛选模型的Z′因子为0.88。结论在大肠杆菌中表达了有活性的G6PD,建立了可靠的体外抑制剂筛选模型。
- 金科华游云悠魏友煜左越柯志强尧青刘洁
- 关键词：抑制剂
- 浅谈青年教师如何提高药理学教学质量
- 2015年
- 药理学是医药卫生院校共有的一门核心课程,其内容与临床实践和新药研究密切相关,药理学教学质量的好坏直接影响到学生专业素质的高低。青年教师教学经验浅,作者通过向年资高教师的学习加上自身的实践和摸索,总结出如下教学方法和体会,旨在与更多的教师交流共勉,提高青年教师的药理学教学质量。
- 尧青雷刚吴宁华
- 关键词：药理学教学质量
- FOXM1在高糖诱导的MRC-5细胞胶原合成中的作用
- 2022年
- 目的探讨转录因子FOXM1在高糖诱导MRC-5细胞胶原合成中的作用。方法①通过CCK8探究MRC-5细胞高糖诱导模型的最适时间和浓度:时间梯度为6、12、24、48、72 h;浓度梯度为5.5、15、30、45 mmol·L^(-1),甘露醇30 mmol·L^(-1)为高渗对照组。②检测高糖诱导对MRC-5细胞胶原合成的影响:将细胞分为正常对照组、高渗对照组(甘露醇30 mmol·L^(-1))和高糖(30 mmol·L^(-1))组,通过Western blot和qPCR法检测胶原合成相关因子(Fn、COLⅠ、COLⅢ、α-SMA、MMP9、TIMP1)和TGF-β信号通路相关因子(TGF-β1、p-Smad2/Smad2)的表达。③探讨FOXM1在高糖促进胶原合成中的作用:将细胞分为正常对照组、高渗对照组(甘露醇30 mmol·L^(-1))、高糖(30 mmol·L^(-1))组和高糖(30 mmol·L^(-1))+硫链丝菌素(1μmol)组,Western blot和qPCR法检测FOXM1和胶原合成相关因子的表达。结果甘露醇对MRC-5细胞增殖没有明显影响,30 mmol·L^(-1)高糖培养MRC-5细胞24 h时,细胞增殖比对照组明显降低;高糖培养MRC-5细胞促进COLⅠ、COLⅢ和FOXM1等因子的表达;加入硫链丝菌素后,FOXM1的表达明显被抑制,胶原合成相关因子的蛋白表达及mRNA水平较高糖组也均有下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论FOXM1是高糖诱导MRC-5细胞胶原合成增加的一个相关因子。
- 赵盛男张振旺尧青刘超
- 关键词：FOXM1高糖胶原合成TGF-Β信号通路肺纤维化
- 海人酸活化的小胶质细胞H_2O_2、NO的分泌对海马神经元谷氨酸含量的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:初步探讨海人酸(KA)活化培养的新生SD大鼠小胶质细胞(MG)及其分泌的一氧化氮/过氧化氢(NO/H2O2)、海马神经元、谷氨酸(Glu)之间的相互关系。方法:以KA作为MG的激活剂,以一氧化氮合成酶(NOS)的抑制剂氨基胍(AG)或过氧化氢的水解酶(CAT)作为工具药,先检测原代分离纯化培养的MG在KA激活后及工具药作用后各组条件培养液中NO和H2O2含量的变化,再用各组小胶质细胞条件培养液孵育离体海马神经元,观察其对神经元内Glu表达的影响。结果:KA作用后各组条件培养液中NO和H2O2含量明显升高,经AG或CAT处理后各组条件培养液中NO和H2O2含量显著降低;海马神经元的Glu免疫反应性KA组较对照组明显增强,在AG+KA组和CAT+KA组较KA组明显减弱。结论:活化的MG可能通过氧化损伤机制作为参与癫痫发作一个重要环节,提示采取抑制小胶质细胞活化、减少氧化损伤也可能是癫痫防治研究的一个重要方向。
- 唐振刚刘俊郑红花朱威尧青李正莉
- 关键词：小胶质细胞神经元谷氨酸
- 高糖高脂促进人脐静脉内皮细胞间充质转化
- 2024年
- 目的探究高糖高脂刺激对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)间充质转化的影响。方法将培养至第6代的HUVEC设为对照组(CON组),以常用的间充质转化诱导剂TGF-β1为阳性对照(TGF-β1组),给予33mmol/L高糖加0.1mmol/L棕榈酸模拟高糖高脂环境对HUVEC进行刺激为HG+HP组,显微镜下观察细胞形态变化。并通过免疫荧光、Western-blot法检测内皮细胞特异性的标记因子VE-Cadherin和CD31,以及平滑肌细胞特异性标记因子α-SMA和N-Cadherin等蛋白的表达情况。结果显微镜下观察发现,HUVEC经过TGFβ1培养处理72h后,细胞形态由饱满圆润的短梭形逐渐变成了长梭形,细胞间隙变大,与CON组相比有明显改变,而HG+HP组细胞形态与TGF-β1组相似。免疫荧光和Western-blot结果显示,与CON组相比,HG+HP组内皮细胞标记物VE-Cadherin和CD31表达量显著下降(P<0.05),而平滑肌细胞标记物α-SMA和N-Cadherin表达量显著上升(P<0.05)。结论高糖高脂刺激可以促进人脐静脉内皮细胞的间充质转化。
- 宁宇阳尧青徐魁刘超
- 关键词：高糖高脂糖尿病内皮功能障碍
- 美满霉素对癫痫大鼠海马神经元凋亡的影响
- 癫痫是一种常见的慢性神经系统疾病，由于其发病机制的复杂性和癫痫类型的多样性，癫痫的防治至今仍然是神经科学工作者攻克的重点课题。癫痫发作可以导致脑内多种凋亡相关基因的表达和神经元的凋亡，并且以海马神经元凋亡最为显著，这可能...
- 尧青
- 关键词：癫痫海马神经元美满霉素动物模型
- 戊四氮致痫大鼠海马一氧化氮的变化及对海马神经元凋亡的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察戊四氮（PTZ）致痫大鼠海马一氧化氮（NO）的变化对神经元兴奋毒性的影响。方法sD雄性大鼠随机分为3组，每组14只，分别用生理盐水（A组）、PTZ（B组）、氨基胍＋PTZ（C组）造模后，对海马NO含量、谷氨酸（Glu）免疫反应性、半胱氨酸酶（Caspase）-3mRNA水平进行检测分析。结果B组海马NO含量为（75．67±2．04）μmol／L，与A组（11．90±0．64）μmol／L和c组（36．19±4．48）μmol／L比较差异有统计学意义（P〈0．05）；A组和c组的Glu、caspase-3mRNA表达水平明显低于B组（P〈0．05）。结论戊四氮致痫后可导致大鼠海马NO过量产生，对海马神经元具有兴奋毒性作用。而一氧化氮合成酶抑制剂的干预，具有神经保护作用。
- 唐振刚陈蕾尧青郑红花朱威李正莉
- 关键词：癫痫一氧化氮谷氨酸凋亡
- 右旋葡萄糖对新生大鼠海马神经元AMPA受体亚基GluR2/3表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:观察右旋葡萄糖对新生大鼠海马神经元细胞谷氨酸离子型受体GluR2/3 mRNA表达的影响。方法:建立原代新生大鼠海马神经元细胞培养方法,培养至第9 d时,给予不同浓度右旋葡萄糖刺激。通过免疫荧光检测海马神经元细胞GluR2表达,通过RT-PCR检测GluR2、GluR3、GluR4 mRNA表达变化。结果:新生大鼠海马神经元细胞培养至第9 d时,可见GluR2呈阳性表达,右旋葡萄糖刺激后海马神经元细胞GluR2mRNA、GluR4mRNA表达明显下调(P<0.05);GluR3 mRNA表达明显上调(P<0.01)。结论:右旋葡萄糖刺激引起海马神经元细胞GluR受体下调,表现对海马神经元的损伤性影响,可能与糖尿病脑病的发生机理有关。
- 陈拥彬尧青李素琴李敏才
- 关键词：海马神经元细胞GLUR2
