常蕾
- 作品数:4 被引量:10H指数:2
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人NIRF基因真核表达质粒的构建及其在HepG2.2.15细胞中的表达
- 2009年
- 目的构建人NIRF基因真核表达质粒,并在HepG2.2.15细胞中表达NIRF蛋白。方法从HeLa细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增NIRF基因编码区全长序列,插入到pIRES2-EGFP真核表达载体中,构建重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-NIRF,转染HepG2.2.15细胞,检测细胞中NIRF基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平。结果重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-NIRF经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染HepG2.2.15细胞后,可检测到细胞中NIRF基因mRNA的转录及蛋白的表达。结论已成功构建了人NIRF基因真核表达质粒,并在HepG2.2.15细胞中表达了NIRF蛋白,为下一步研究其在肿瘤组织中的功能奠定了基础。
- 常蕾段昌柱
- 关键词:真核表达质粒HEPG2.2.15细胞
- 人NIRF基因真核表达质粒的构建及其蛋白产物的生物信息学分析被引量:3
- 2009年
- 目的克隆人NIRF基因,构建其真核表达质粒,并运用生物信息学方法对NIRF蛋白进行分析。方法应用RT-PCR技术,从HeLa细胞中扩增NIRF基因,插入到真核表达载体pcDNA3.1-Flag中,双酶切鉴定并测序。在NCBI蛋白质结构数据库中寻找与NIRF具有较高同源性的1WY8和1Z6U,并利用Insight II结构生物信息学分析软件分析NIRF蛋白的结构和功能。结果扩增出约2400bp的人NIRF全长cDNA;重组真核表达质粒pcDNA3.1-Flag-NIRF酶切后,可见约2400bp的目的片段;测序结果表明NIRF全长cDNA与GenBank中NIRF序列完全一致。1WY8片段有3个赖氨酸残基,主要位于蛋白空间构象的表面;1Z6U片段含有Ring finger结构域,具有ligase活性。结论已成功克隆了人NIRF基因全长cDNA,构建了其真核表达质粒,并利用生物信息学方法,初步分析了NIRF蛋白泛素化作用的机理。
- 常蕾钱冠华段昌柱
- 关键词:克隆真核表达质粒生物信息学
- NIRF蛋白与HBV核心蛋白的相关性研究
- 目的:1.检测NIRF蛋白和HBV核心蛋白在人正常肝组织和HBV感染的肝组织内表达的相关性;检测人正常肝组织和肝癌组织中NIRF基因的蛋白表达情况;2.构建NIRF基因真核表达载体,并转染人胚肾上皮细胞HEK-293;3...
- 常蕾
- 关键词:乙型肝炎病毒核心蛋白
- 文献传递
- 盐酸氨基葡萄糖及其与甲氨蝶呤联用对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用被引量:7
- 2009年
- 目的探讨盐酸氨基葡萄糖及其与甲氨蝶呤联用对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用。方法将佐剂性关节炎大鼠分为4组:模型对照组(AA组)、盐酸氨基葡萄糖组(GH组)、甲氨蝶呤组(MTX组)和联合用药组(GHM组),另设1组空白对照。自造模前1d至造模后22d,正常对照组和AA组每天给予蒸馏水灌胃,其他组以相应的药物灌胃。造模前及造模后不同时间,测量各组大鼠左、右后足体积,造模后22d,ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果与AA组比较,在继发反应期,GH、MTX及GHM各组的左、右后足体积和血清中TNF-α含量均有所下降,且差异均有统计学意义,除血清中TNF-α含量GHM组显著低于MTX组外,其他各项指标GHM组与GH组和MTX组比较,差异均无统计学意义。结论盐酸氨基葡萄糖可缓解大鼠佐剂性关节炎症状,具有抗炎作用和治疗类风湿性关节炎的潜力,其与MTX联用,有望降低MTX的用量。
- 蔺超黄朝梁常蕾颜廷振马国栋
- 关键词:盐酸氨基葡萄糖甲氨蝶呤类风湿性关节炎肿瘤坏死因子-Α