庞春秀
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：福建医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：福建省科技厅科研基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- hMAM-EP调控HSV-TK腺病毒载体的构建及其对乳腺癌细胞的靶向杀伤被引量：1
- 2012年
- 目的:分别构建人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)基因增强子和启动子(enhancer and promoter ofhMAM,hMAM-EP)调控的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因和单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simple virus thymidine kinase,HSV-TK)自杀基因两种重组腺病毒载体,探讨hMAM-EP调控的HSV-TK在乳腺癌细胞特异性表达及其对乳腺癌的靶向治疗作用。方法:构建hMAM-EP-EGFP和hMAM-EP-TK重组质粒载体,将重组质粒目的基因转移到腺病毒骨架黏粒载体pAxcwit2,并转染HEK 293细胞获得重组腺病毒载体Ad-EP-EGFP和Ad-EP-TK。将Ad-EP-EGFP感染乳腺癌细胞T-47D、ZR-75-30和鼻咽癌细胞5-8F,荧光显微镜观察EGFP的表达。将Ad-EP-TK感染T-47D细胞,给予1、10、20、50μg/ml前药更昔洛韦(ganciclovir,GCV),观察TK基因对乳腺癌细胞的特异杀伤作用。结果:成功构建hMAM-EP调控的重组腺病毒载体Ad-EP-EGFP和Ad-EP-TK。Ad-EP-EGFP感染后,乳腺癌T-47D细胞可见EGFP表达,但ZR-75-30细胞和5-8F细胞无表达。与未感染组或感染Ad-EP-EGFP组相比,Ad-EP-TK重组腺病毒联合GCV(50μg/ml)组T-47D细胞存活率显著降低[(35.69±0.07)%vs(91.74±0.02)%,(87.69±0.11)%;P<0.05],且随GCV质量浓度的增加,T-47D细胞存活率逐渐下降,在MOI=100、GCV质量浓度分别为1、10、20、50μg/ml条件下,细胞存活率分别为(94.34±0.04)%、(86.26±0.02)%、(66.51±0.09)%、(35.69±0.07)%。结论:hMAM-EP调控的HSV-TK自杀基因在乳腺癌T-47D细胞中特异性表达,Ad-EP-TK联合GCV可靶向杀伤乳腺癌T-47D细胞。
- 于建刚吴金香庞春秀林德馨
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因更昔洛韦重组腺病毒
- 钙池操纵性钙通道与细胞增殖关系的研究进展被引量：1
- 2012年
- Ca2+是维持细胞正常生理功能的重要离子,参与细胞信息传递并调控一系列生命过程。钙池操纵性钙通道(SOCC)是细胞膜钙通道的一种。许多细胞内Ca2+主要通过SOCC机制影响正常细胞和肿瘤细胞的生长增殖。不同类型的细胞,SOCC通道相关蛋白的表达量及其相互作用存在差异,从而影响细胞内Ca2+浓度,造成细胞的增殖、凋亡和迁移等生物学功能的改变。
- 庞春秀林德馨
- 关键词：细胞增殖肿瘤
- 动脉平滑肌细胞STIM1//Orai1信号分子相互作用研究
- 目的：
1．研究STIM1、Orai1蛋白在动脉平滑肌细胞中的定位。
2．探讨STIM1、Orai1蛋白在动脉平滑肌细胞中是否直接相互作用。
方法：
1．常规培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞A7...
- 庞春秀
- 关键词：免疫共沉淀
- 文献传递
- 大鼠STIM1基因真核表达载体构建及蛋白表达定位
- 2016年
- [目的]构建大鼠STIM1基因重组质粒并在A7r5细胞中表达、定位。[方法]应用基因合成方法获得STIM1基因序列,克隆至携带EGFP标签的真核表达载体p EGFP-C_1、p IRES_2-EGFP,经菌落PCR、酶切、测序鉴定后,转染至A7r5细胞,Western Blot检测蛋白表达,激光共聚焦观察其定位。[结果]STIM1全长2 058 bp,重组载体经酶切、PCR、测序鉴定构建正确,在A7r5细胞内高表达,并主要定位于细胞质。[结论]构建大鼠STIM1基因重组质粒并在A7r5细胞质中表达,为建立稳定高表达细胞系及后续功能研究奠定基础。
- 庞春秀林德馨
- 关键词：真核载体蛋白表达
