康玉
- 作品数：47 被引量：91H指数：7
- 供职机构：复旦大学附属妇产科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市重大科技攻关项目上海市科委实验动物专项更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 肿瘤细胞/树突状细胞融合疫苗的临床应用被引量：4
- 2006年
- 肿瘤细胞/树突状细胞融合疫苗是近年来国内外恶性肿瘤免疫治疗研究的热点,不仅在各种动物模型上观察到肿瘤的消退,在I/II期临床试验中也呈现出良好的应用前景。因而对肿瘤细胞/树突状细胞融合疫苗的制备、鉴定、目前临床试验的疗效以及具体应用方法等方面进行评价,对进一步加强此种疫苗的安全性和疗效问题的探讨,对疫苗纯化、基因修饰疫苗、可调控的活疫苗和阻断免疫应答下调机制的分析十分必要。
- 康玉徐丛剑
- 关键词：树突状细胞细胞融合肿瘤疫苗安全性
- 转座子piggyBac介导的HSV-tk基因在妇科恶性肿瘤细胞中长期稳定表达的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 研究piggyBac（PB）转座子介导转移外源基因HSV-tk在多种妇科恶性肿瘤细胞中的表达情况,探讨其作为一种可整合的非病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用价值.方法 通过PCR技术扩增HSV-tk基因的编码区,定向克隆至PB表达载体PB[Act-RFP]DS,经酶切、测序鉴定为重组载体PB[Act-RFP,HSV-tk]DS（pPB/TK）.联合3种小同的转染试剂FuGENE HD、jetPEI及lipofectamine 2000,分别将pPB/TK转染入4种常见的妇科恶性肿瘤细胞株HeLa、JEG-3、SKOV3和HEC-1B.转染后以mRFP1为报告基因,经荧光显微镜观察和流式细胞仪分析转染效率;逆转录（RT）-PCR技术检测HSV-tk和mRFP1基因的表达;四甲基偶氮唑蓝实验测定不同浓度的更昔洛韦（GCV）对转染后细胞的杀伤作用.转染后细胞经流式细胞仪分选,极限稀释单克隆培养建立稳定转染株,并以反向PCR技术确定转座子插入基因组的位点.结果 （1）成功构建重组载体pPB/TK.（2）在3种转染试剂的辅助下,pPB/TK均可有效转染入HeLa、HEC-1B、SKOV3和JEG-3细胞;不同转染试剂辅助下pPB/TK在同种细胞中的转染效率各不相同,在HeLa细胞中,FuGENE HD的转染效率[（78.7±9.2）%]高于lipofectamine 2000[（54.1±11.4）%]和jetPEI][（46.5±7.4）%],分别比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;同一转染试剂辅助下pPB/TK在不同细胞中的转染效率也不相同,以FuGENE HD为转染试剂,pPB/TK在HeLa、JEG-3和SKOV3细胞中的转染效率分别为（78.7 ±9.2）%、（74.4±8.9）%和（83.2±9.7）%,高于HEC-1B细胞的（39.5±8.7）%,分别比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）.（3）RT-PCR结果显示,4种细胞均有HSV-tk和mRFP1基因mRNA的表达.（4）GCV对转染有pPB/TK的HeLa、JEG-3、SKOV3和HEC-1B细胞的半数抑制浓度分别为1.29、3.35、0.09和13.28 μg/ml.10μg/ml GCV对转染有pPB/TK的SKOV3细胞抑制率高于单独转染pORF-HSVtk者,细胞抑制率分别为（86±9）%和（52±12）%,两者比较,差异有�
- 康玉孙庆文余文博程明军张晓燕武欣陈春妹郑煜芳徐丛剑
- 关键词：单纯疱疹病毒属胸苷激酶发光蛋白质类
- 卵巢癌化疗耐药标志物的研究进展被引量：13
- 2018年
- 卵巢癌是女性生殖系统恶性肿瘤死亡的首要原因。化疗结合肿瘤细胞减灭术是治疗卵巢癌的主要方式。化疗耐药是导致卵巢癌致死率上升的一个主要原因。因此需要预测卵巢癌患者是否能从化疗中获益或是耐药的分子标志物,根据化疗耐药的靶点可将卵巢癌化疗耐药生物标志物分为:DNA修复因子与有丝分裂调节因子、信号传导与转录因子、MicroRNA、细胞因子和肿瘤干细胞。寻找预测化疗耐药的标志物有助于初步筛选出化疗敏感及化疗耐药人群、提高患者治疗疗效和减少不必要的经济付出。本文就近几年的卵巢癌化疗耐药标志物的研究成果进行归纳,有助于卵巢癌化疗敏感及耐药人群的鉴别,也便于卵巢癌个体化治疗的开展。
- 林贵玲康玉徐丛剑
- 关键词：卵巢癌化疗耐药药物反应生物标志物
- 一种人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系
- 本发明属微生物动物细胞系领域，具体涉及一种人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系及其建立方法。本发明通过胎盘部位滋养细胞肿瘤患者离体子宫内病灶的原代培养，建立了人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系，命名为PSTT‑1，保藏号为NO.108...
- 康玉刘齐雨李可卢冲蒲萄张明星刘海鸥罗建民李桂玲徐丛剑
- 文献传递
- 自杀性肿瘤疫苗对大鼠卵巢癌的治疗作用及其安全性研究被引量：7
- 2006年
- 目的将自杀基因修饰的卵巢癌细胞与树突状细胞(DC)融合制备成自杀性肿瘤疫苗(FC／TK),观察FC／TK对大鼠卵巢癌的免疫治疗作用,并探讨对FC／TK进行体内灭活的可行性。方法以聚乙二醇法,用大鼠骨髓来源的DC与转导有自杀基因(HSV1-TK基因)的大鼠卵巢癌上皮细胞株NuTu-19细胞融合制备成FC／TK,在扫描电镜下观察FC／TK的形态;用3H-TdR渗入法,检测FC／TK刺激T细胞增殖的能力。在大鼠体内的免疫治疗实验中,以FC／TK治疗大鼠卵巢癌皮下瘤,观察肿瘤形成及肿瘤大小,分别设立经60Co照射的FC／TK组、未经自杀基因修饰的卵巢癌细胞与DC融合的疫苗(FC)组和PBS对照组。在体内灭活实验中,将FC／TK以荧光染料标记后进行大鼠体内示踪,腹腔注射羟甲基无环鸟苷(GCV)7 d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术,对大鼠淋巴组织的冰冻切片做原位细胞凋亡检测。结果FC／TK为多形性,扫描电镜下可见不规则的突起。与对照组相比,FC／TK能明显刺激T细胞增殖(P<0．01)。大鼠体内的免疫治疗实验结果显示,FC／TK组与FC组大鼠的成瘤时间晚于经60Co照射的FC／TK组(P<0．05),较PBS组明显延迟(P<0．01);接种NuTu-19细胞90 d后,FC／TK组大鼠的平均肿瘤体积较经60Co照射的FC／TK组和PBS组明显缩小(P<0．01),但FC／TK组与FC组之间,差异无统计学意义(P>0．01)。荧光显微镜下,经红色荧光标记的FC／TK出现在大鼠脾脏;进一步TUNEL染色显示,经GCV处理后,进入大鼠体内的FC／TK已发生凋亡。结论FC／TK对大鼠卵巢癌有免疫治疗作用,并可由自杀基因系统控制其在体内的存活。
- 康玉徐丛剑刘惜时邵志敏欧周罗罗建明吴超群钟翠平顾健人
- 关键词：树突状细胞自杀基因卵巢肿瘤肿瘤疫苗融合细胞
- HSV_1-TK/GCV系统作为肿瘤疫苗“死亡开关”的研究被引量：2
- 2005年
- 背景与目的:肿瘤活疫苗有高效的抗肿瘤免疫能力,但其体内增殖性限制了进一步的临床应用。本研究将Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶/丙氧鸟苷(HSV1鄄TK/GCV)系统作为肿瘤活疫苗的“死亡开关”,以期控制疫苗在体内的存活状态,并探讨其作用机制。方法:以逆转录病毒为载体将HSV1鄄TK基因转导入大鼠卵巢癌细胞株NuTu鄄19,经G418筛选出阳性克隆后与Fischer344大鼠骨髓来源的树突细胞融合,制成携带有HSV1鄄TK基因的卵巢癌DC活疫苗(FC/TK)。以RT鄄PCR和Westernblot检测FC/TK细胞中的HSV1鄄TK表达。体外以XTT法检测不同浓度GCV对FC/TK的体外杀伤作用;以流式细胞仪和Hoechst染色法检测GCV作用5天后FC/TK的凋亡现象。体内实验中,取大鼠经足垫皮下接种FC/TK后分为两组:FC/TK+GCV组大鼠再予GCV腹腔注射7天;FC/TK+生理盐水组作为对照组。接种FC/TK后观察90天,记录注射部位有无肿瘤形成及各脏器的肿瘤转移情况。结果:FC/TK中有HSV1鄄TK的表达,在体外GCV对FC/TK的杀伤率可达86.25%,其中大于80%的FC/TK发生凋亡,并出现细胞核浓缩、边集等凋亡现象。FC/TK+生理盐水组共有3只(60%)的大鼠注射部位出现低分化腺癌;而FC/TK+GCV组未见局部肿瘤形成及脏器转移。结论:HSV1鄄TK/GCV通过诱导肿瘤活疫苗发生凋亡而起到控制其存活状态的作用。
- 康玉徐丛剑刘惜时吴超群钟翠平顾健人
- 关键词：肿瘤免疫疗法肿瘤疫苗树突细胞自杀基因细胞融合
- 基于深度学习的基因检测报告信息识别方法、系统及设备
- 本发明提供一种基于深度学习的基因检测报告信息识别方法、系统及设备，包括：获取基因检测报告并处理为目标图片格式文件；通过OCR文字识别技术提取目标图片格式文件中每个页面的文本信息数据，对其进行基因测序信息识别以得到包含基因...
- 康玉徐丛剑陈敏欣吴志勇郜意胥婧王辉郁培基
- 人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系的建立及其鉴定被引量：1
- 2017年
- 背景与目的:胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblastic tumor,PSTT)是一种特殊类型的妊娠滋养细胞肿瘤。该研究旨在建立人PSTT细胞系,鉴定其基本特性。方法:通过手术切除的PSTT组织标本原代培养,纯化并传代,建立人PSTT细胞系。鉴定方法包括:观察细胞形态,CCK-8法绘制细胞生长曲线,进行染色体核型分析,细胞与肿瘤组织短串重复序列(short tandem repeat,STR)分析,以及免疫组织化学染色。结果:建立稳定传代的人PSTT细胞系PSTT-1。PSTT-1细胞单层贴壁生长,失去接触抑制性,呈多突起的纺锤形结构。体外培养生长良好,每5 d传代1次,目前已传至30余代。染色体核型分析结果为正常女性核型:46,XX。PSTT-1与肿瘤组织STR分析结果高度匹配。PSTT-1细胞表达β-catenin、CD146、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,hCG)、人胎盘生乳素(human placental lactogen,hPL)和Muc4。结论:该研究成功建立人PSTT细胞系PSTT-1,为PSTT的研究提供了体外实验模型。
- 刘齐雨李可胥婧黄云柯赵晨燕罗建民李桂玲康玉徐丛剑
- 关键词：PSTT细胞系原代培养
- 用于化疗病人的智能穿戴设备
- 本申请的用于化疗病人的智能穿戴设备，包括：头部穿戴组件及手部穿戴组件，其中，头部穿戴组件包括可温控制冷的柔性帽体、以及能对化疗病人进行心理干预治疗的心理干预部件；所述手部穿戴组件包括可温控制冷的手套；并且在帽体和手套设置...
- 康玉商慧亮叶士青胥婧李可黄云柯徐丛剑
- 文献传递
- 可调控的肿瘤活疫苗及其制备方法
- 本发明属生物技术领域，涉及一种安全性和免疫效应可调控的肿瘤活疫苗及其制备方法。本发明将自杀基因系统引入肿瘤活疫苗，所述疫苗在进入体内时为活疫苗，在完成活疫苗的作用后可接受自杀基因的控制而死亡，既杜绝活疫苗在体内持续生长所...
- 徐丛剑康玉
- 文献传递
