张云昆
- 作品数：21 被引量：44H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金云南省应用基础研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- H_2株甲肝减毒活疫苗安全性及免疫效果观察被引量：1
- 2005年
- 目的观察单层及悬浮吸附工艺不同收毒时间生产的H2株甲型肝炎减毒活疫苗(以下简称甲肝活疫苗)接种恒河猴的安全性及免疫效果。方法筛选甲肝抗体阴性,丙氨酸转胺酶(ALT)正常的恒河猴15只,随机分为3组,每组5只,下肢静脉注射疫苗1 ml/只。接种3 d内,每天观察有无局部和全身反应,0,2,3,4,6,8周采血测ALT及甲肝抗体,0,4,8周肝穿做组织病理检查,观察到期尸检。结果接种疫苗3 d内,所有恒河猴均无局部和全身反应。观察全程ALT正常,肝脏无特殊组织病理改变。免后4周甲肝抗体全部阳转,单层工艺26 d疫苗、悬浮工艺23和26 d疫苗几何平均滴度(GMT)4周分别为9.2,14.9和27.9;8周分别为32,64和64;悬浮工艺23 d和26 d疫苗猴体免疫效果相似,且两者均明显优于单层工艺疫苗。结论悬浮吸附工艺23 d收毒疫苗接种恒河猴具有较好的安全性和可靠的免疫效果,采用悬浮吸附工艺生产H2株甲肝活疫苗23 d收获病毒较经济和稳妥。
- 杨净思陈洪波杨晓蕾杨伟丁雪凤张云昆潘玥张鸣
- 关键词：恒河猴免疫效果
- 一株鼻病毒A22型的分离鉴定及其VP1基因遗传特征分析
- 2014年
- 目的分析2011年昆明市手足口病患儿粪便中分离获得的人鼻病毒（human rhinovirus,HRV）A22型分离株KM4/2011全长VP1基因的遗传特征。方法采用KMB17细胞对手足口病患儿粪便样本中筛查出的1株HRV样品进行病毒分离,应用RT-PCR法扩增病毒VP1基因,并进行测序,采用BLAST软件对所测定的节段序列进行数据库比对;采用Geneious basic 5.6.5软件进行核苷酸和氨基酸同源性比对;采用Mega 5.05软件将HRV A22及部分HRV A、B和C群全长VP1基因构建系统进化树。结果分离株为KM4/2011,经扩增、测序和序列拼接获得长度为867 bp的VP1基因;KM4/2011株与其他HRV分离株核苷酸和氨基酸的同源性分别为48.1%-91.0%和38.2%-97.6%,其中与HRV A22分离株的核苷酸和氨基酸同源性较高,分别为90.8%-91.0%和97.3%-97.6%;基因进化树分析显示,KM4/2011株与HRV A22基因型属于同一个进化分枝。结论 KM4/2011分离株为HRV A22型,存在地域差异。
- 戴素萍潘玥邵聪文吉玛朱艳菊张云昆朱云马绍辉
- 关键词：VP1基因
- OPV疫苗液体剂型稳定性影响因素分析被引量：1
- 2008年
- 分析了温度、反复冻融、冷链运输过程对口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)滴度的影响,检测结果显示OPV分别在37℃条件下放置3 d,25℃放置14 d,-20℃放置36个月、反复冻化35次,感染性滴度均无明显变化.在冷链条件下运输,其感染性滴度无明显变化.液体剂型的稳定性优于糖丸剂型(t=3.204 3,P<0.01).
- 宋霞段维国全文琦黄铠张晓丽张云昆谢明学谢忠平
- 关键词：脊髓灰质炎病毒减毒活疫苗稳定性
- 恒河猴SRV-1和STLV-1血清抗体流行病学研究
- 目的：调查恒河猴SRV-1和STLV-1血清流行病学特征。
方法：用免疫荧光法(IFA)对63只野生恒河猴和105只人工繁殖饲养猴作了SRV-1和STLV-1血清抗体检查，并对检测结果进行统计学分析。
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- 杨净思张丽旌李晓燕张云昆代解杰孙晓梅唐东红
- 关键词：血清抗体免疫荧光法阳性率
- 文献传递
- 二乙烯亚胺灭活流感病毒的效果观察被引量：7
- 2008年
- 目的观察二乙烯亚胺(BEI)对流感病毒的灭活效果。方法分别使用甲醛和BEI对流感病毒进行灭活试验,通过血凝试验检测二者灭活效果,并确定各自最佳灭活时间。用灭活的病毒液免疫小鼠,检测其抗原性,并用RT-PCR方法分析灭活病毒基因组的完整性。以裂解剂TritonX-100裂解病毒后,分别加入甲醛和BEI灭活,采用单向免疫扩散法检测灭活不同时间病毒液的HA含量。结果BEI灭活36h可将病毒完全灭活;BEI灭活的病毒免疫小鼠较甲醛灭活病毒产生较高的血凝抑制抗体;BEI灭活病毒液经RT-PCR,不能扩增出病毒基因;BEI灭活病毒的HA平均含量比甲醛灭活病毒的HA平均含量略高。结论BEI在灭活流感病毒感染性的同时,能够灭活病毒基因,并较好地保持病毒的抗原性。
- 魏晓露刘婧高菁霞张新文陈俊英黄秋香何香莲张云昆余磊姜述德廖国阳李映波
- 关键词：流感病毒灭活抗原性
- 一株埃可病毒12型病毒分离鉴定及其VP1基因特征分析被引量：1
- 2013年
- 目的分离并鉴定2010年昆明市无菌性脑膜炎的病原埃可病毒12型（ECH012）病毒株F343／KM／2010，分析其VP1基因遗传特征，为病毒性脑炎的防控提供科学依据。方法采用RD细胞和Hep-2细胞对15份疑似无菌性脑膜炎患者粪便样品进行分离，经微量中和试验对该分离株进行鉴定，通过RT—PCR法扩增病毒VP1基因和测序，并采用MEGA5．05等软件进行进化树和同源性分析。结果9份样品出现细胞病变效应，其中F343／KM／2010分离株经微量中和试验定型为ECH012病毒；经RTPCR法扩增获得873bp的VP1基因，与国内外11株ECH012病毒分离株核苷酸和氨基酸的同源性为81．4％～92．8％和97．6％～99．3％，其中与国内分离株的核苷酸和氨基酸同源性为89．5％～92．8％和98．3%～99．5％。F343／KM／2010株与原型株Travis比较在氨基酸上有8个位点发生突变，而与中国株比较主要在第288位点上发生了突变。在进化树上与国内分离株属于同一个分支，而国外分离株分属其他两个不同的分支。结论F343／KM／2010分离株为肠道病毒ECHO12病毒，与中国其他分离株同属一个分支。
- 王丽春潘玥邵聪文朱艳菊周竞贤张云昆朱云马绍辉
- 关键词：VP1基因
- 一株引起病毒性脑炎的埃可病毒30型分离株的VP1基因序列特征分析被引量：2
- 2014年
- 目的分析2009年昆明市病毒性脑炎患儿粪便中分离获得的埃可病毒30型（Echovirus30,Echo30）分离株A363/KM/2009全长VP1基因序列特征。方法从疑似病毒性脑膜炎患儿粪便样本中分离Echo30,提取病毒RNA,采用RT-PCR法扩增病毒VP1基因,并进行测序。采用NCBI BLAST软件对所测定的序列进行数据库比对;采用Geneious软件对Echo30分离株全长VP1基因的核苷酸及氨基酸同源性进行分析;采用Mega 5.1软件对A363/KM/2009分离株进行VP1基因分析,并与20个参考株的VP1序列进行比较。结果分离株为A363/KM/2009,其VP1基因的核苷酸长度与其他Echo30一致,均为867 bp;与其他Echo30分离株核苷酸同源性在76.9%-95.7%之间,氨基酸同源性在88.7%-99.7%之间;与中国株的核苷酸和氨基酸的同源性分别为84.5%-95.7%和96.9%-99.7%,其中与中国浙江分离株Echo30/zhejiang/10/4的同源性最高,为95.7%;与广西分离株GX10/15的同源性最低,为84.5%。氨基酸序列分析显示,与其他中国株包括脑脊液分离株相比,未见特异的突变位点;与国外分离株的核苷酸和氨基酸同源性分别为76.9%-86.3%和88.7%-97.3%;基因进化树分析显示,与其他中国株分属不同的两个分支,而与Echo30/zhejiang/10/4和Echo30/zhejiang/4/04（CSF）株亲缘关系较近。结论 A363/KM/2009分离株为肠道病毒Echo30,属于中国两个分支中的一支。
- 陈俊英潘玥吉玛张云昆朱云朱艳菊邵聪文马绍辉
- 关键词：病毒性脑炎埃可病毒30型VP1基因
- 甲型肝炎减毒活疫苗H2减毒株P2区基因序列测定与特征分析被引量：1
- 2008年
- 目的测定甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗H2减毒株P2区基因序列,了解其减毒和细胞适应的分子机制。方法通过逆转录-聚合酶链反应,特异扩增甲肝减毒活疫苗H2株成品疫苗及其亲本毒种P2区VP1/2A、2B、2C基因序列,经测序、比对,分析检测毒力基因VP1/2A、2C的变异情况。结果甲肝减毒活疫苗H2成品疫苗及其亲本毒种毒力基因VP1/2A、2C区毒力相关基因簇均为减毒型特征。结论甲肝减毒活疫苗H2减毒株毒力基因VP1/2A、2C均为减毒型特征,且遗传稳定性良好。
- 刘建生侯宗柳马绍辉孟明耀张云昆李琦涵
- 关键词：甲型肝炎病毒H2株
- HAV病毒液的3种浓缩方法比较被引量：3
- 2014年
- 目的:对HAV病毒液的3种常见浓缩方法进行分析比较,为HAV病毒研究及规模化疫苗生产提供参考。方法:使用MILLIPORE PELLICON超滤、PEG 6000沉淀、蔗糖-甘油垫三种方法对纯化HAV病毒液进行浓缩,用ELISA方法对浓缩液进行抗原滴度检测,计算不同浓缩方法的回收率。结果:HAV病毒液经过7次超滤循环浓缩,平均回收率为86%;PEG浓缩方法回收率平均72.5%;蔗糖-甘油离心浓缩方法平均回收率53.3%。结论:蔗糖/甘油超离心法,集纯化浓缩一体,适用于样品量较少,需要高浓度样品的试验;PEG浓缩得率适中,操作简单,应用范围较广;超滤膜浓缩在大规模疫苗生产或样品量较大时适用,但需控制样品浓度及浓缩倍数不能太高,以免样品损失。
- 王晓辉龙润乡张名杨晓蕾梁海孝张云昆邵聪文
- 关键词：HAV超滤浓缩
- 后脊髓灰质炎时代我国应用赛宾株灭活脊髓灰质炎疫苗免疫的可行性被引量：5
- 2010年
- 在所有国家被证实全部阻断了脊髓灰质炎(脊灰)野病毒传播后,全球将停止使用口服脊灰减毒活疫苗(Oral Poliomyelitis Attenuated Live Vaccine,OPV)免疫,进入后脊灰时代。为此,世界卫生组织(WHO)提出了届时全面停止OPV的使用,并同步开始灭活脊灰病毒疫苗(Inactivated Poliovirus Vaccine,IPV)的免疫,发展中国家更应考虑应用廉价的赛宾(Sabin)株IPV(sIPV)免疫,直至最终根除脊灰。然而目前全球尚无开发成功的sIPV上市。现介绍WHO推荐的这一免疫策略,分析全球sIPV的研发现状,从免疫策略、免疫程序、生产技术、疫苗供应等方面探讨我国应用sIPV免疫的可行性。鉴于这些可行性,我国应尽快推进sIPV的研发进程,为脊灰免疫策略的调整、实施做好准备。
- 车艳春姜莉邵聪文何春艳张云昆杨净思
- 关键词：免疫
