张新海
- 作品数:74 被引量:217H指数:8
- 供职机构:第四军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 小鼠9.1C3/LAIR—1基因的克隆及其在胸腺和脾脏中的表达分布
- 9.1C3是澳大利亚Newcastle大学Burns教授等人于1983年,用人的NK细胞免疫小鼠获得的一株单克隆抗体(mAb),它能显著抑制人NK细胞、CTL以及单核细胞的杀伤作用。1999年我们鉴定9.1C3为一种免疫...
- 欧阳为明张新海刘京梅党娜娜刘飞谢鑫菅金龙金伯泉
- 关键词:基因克隆
- 文献传递
- CD226分子参与内皮细胞黏附功能的形态学证据被引量:3
- 2003年
- 目的 :提供CD2 2 6分子参与内皮细胞黏附功能的形态学证据。方法 :体外培养人脐静脉内皮细胞 ,加入融合蛋白CD2 2 6 Ig,采用倒置显微镜和扫描电子显微镜观测CD2 2 6分子在活化内皮细胞和活化PBMC黏附过程中的作用。结果 :融合蛋白CD2 2 6 /Ig可显著降低活化内皮细胞与活化PBMC间的黏附。结论 :CD2 2 6分子是活化内皮细胞表面一种新的黏附分子 。
- 陈丽华张新海佘义朝刘雪松金伯泉
- 关键词:CD226人脐静脉内皮细胞形态学
- 含3C蛋白酶切位点的人CD226胞膜外区Ig融合蛋白的真核表达及应用被引量:2
- 2003年
- 目的 :构建含 3C蛋白酶酶切位点的人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区Ig融合蛋白编码基因的真核表达载体 ,并进行表达和初步鉴定。方法 :将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因 ,克隆入含 3C蛋白酶靶序列的Ig真核表达载体 p 3C Ig中。测序证实后 ,转染COS7细胞并进行瞬时表达。表达产物经亲和层析柱纯化 ,并通过免疫荧光染色及 3C蛋白酶酶切反应进行鉴定。结果 :经表达和纯化获得CD2 2 6胞膜外区的Ig融合蛋白。该融合蛋白可与表达于ECV30 4细胞表面的CD2 2 6配体有效结合。同时 ,融合蛋白的Fc段亦经 3C蛋白酶切除 ,从而获得CD2 2 6胞膜外区的真核表达分子。结论 :成功地获得了含有 3C蛋白酶酶切位点的人CD2 2 6分子胞膜外区Ig真核表达产物 ,为进一步对CD2 2 6分子进行结构和功能研究 。
- 张新海杨琨贾卫欧阳为明刘莹许晓光李琦金伯泉
- 关键词:真核表达融合蛋白
- 奥曲肽对预防胰十二指肠切除术后并发症的作用被引量:6
- 1999年
- 目的 探讨奥曲肽(Octreotide) 对胰十二指肠切除术后并发症的防治作用及作用机理。方法 对1990 年1 月至1998 年6 月行胰十二指肠切除术的96 例患者术后每日消化液量、严重并发症等作回顾性分析。 结果 在术后1 周内,平均每日消化液量为:奥曲肽组(58 例)胰液(53±8) ml,胆汁(172±27) ml,胃液(212±39) ml,对照组(38 例) 胰液(268±46) ml,胆汁(385±52) ml,胃液(318 ±60) ml,奥曲肽组显著少于对照组(P<0-01) ;奥曲肽组严重并发症发生率14 % ,对照组37% ,奥曲肽组显著低于对照组(χ2= 6-90,P< 0-01) ;手术死亡率(2% ) 也低于对照组(10%) 。 结论 奥曲肽通过减少多种消化液量及胰液中胰酶的浓度等途径。
- 陶开山窦科峰张新海
- 关键词:胰头十二指肠奥曲肽术后并发症
- CD226(PTA1)分子D1结构域参与NK和CTL的功能
- 以CD命名为主的人类白细胞分化抗原(human leukocytedifferentiation antigen,HLDA)参与机体免疫活性细胞识别抗原,充当某些补体片段、Ig Fc段、细胞因子、病毒等受体,介导细胞间、...
- 贾卫金伯泉张新海杨琨朱勇刘雪松
- 文献传递
- 琼脂集落形成实验检测造血生长因子集落刺激活性方法的改进被引量:4
- 1999年
- 目的:改进经典的集落形成实验,使造血生长因子集落刺激活性的检测方法更加简便易行。方法:在24 孔板中培养,采用琼脂半固体培养,根据培养体系中细胞因子的不同适合于多种造血因子集落刺激活性的检测。固定制片后适于多种染色并可长期保存。结果:经实验及应用证实本文介绍的方法能准确地反映造血生长因子的集落刺激活性,方法简便易行。结论:在研究造血及造血生长因子生物学活性时,经典的集落形成实验由于实验方法复杂而受到限制,本法使造血因子集落刺激活性的检测更加方便。
- 孙凯金伯泉张新海冯琦朱华峰
- 关键词:造血生长因子琼脂
- 9.1C3单克隆抗体轻、重链可变区基因克隆及序列分析被引量:3
- 1996年
- 9.1C3分子是一种参与NK、巨噬细胞及LAK细胞杀伤过程的重要细胞表面分子,主要表达于外周血单个核细胞表面。本文运用分子生物学技术,从分泌9.1C3MCAb的杂交瘤细胞中提取总RNA,经反转录、PCR分另11分离了9.1C3McAb轻链可变区(VL)基因及重链可变区(VH)基因,并用全自动荧光DNA序列分析仪对9.1C3VH、VL基因序列进行了分析。结果表明:9.1C3VH基因为351bP,编码117aa残基,9.13VL为324bP,编码108aa残基;从推导出的氨基酸序列分析证实9.1C3VH、VL序列均符合小鼠lg可变区的氨基酸序列特征;根据Kabbat分类体系,9.1C3VH隶属Ig重链第Ⅱ(C)亚组,9.1C3VL隶属小鼠IgK链第Ⅴ亚组。9.1C3VH、VL基因的克隆成功为其单链抗体的构建、表达奠定了良好的物质基础。
- 夏海滨金伯泉田方张新海张建平
- 关键词:抗体单克隆可变区基因克隆
- 小儿临床活体肝部分移植术
- 1999年
- 目的 探讨小儿临床活体肝部分移植术的技术。方法 1997 年6 月30 日我科成功地进行了1 例小儿临床活体肝部分移植术。供体男性,40 岁, 系患儿父亲, 行肝左外侧叶切除术( 脏脏Ⅰ、Ⅱ段) 。术中用B超确认肝血管走向, 确定切肝界线, 以超声刀和双极电凝器断肝, 切肝过程不阻断肝脏血流, 肝脏热缺血时间为零。受体为10 岁女童,体重24kg, 身高121cm ,为先天性弥漫性肝内胆管囊性扩张症、复发性胆管炎、肝硬变。结果 供体无任何术后并发症, 受体早期并发症得以控制, 至今已健康存活11 月余。结论 成功的活体肝脏切除技术是肝移植提供优质供肝的重要保障, 本例的成功为小儿肝移植提供了新的前景。
- 史宪杰窦科峰李开宗管文贤高志清傅由池朱庆生张英民赵青川岳树强王德盛张新海
- 关键词:肝移植肝切除术儿童
- RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究被引量:6
- 2006年
- 目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。
- 程光章翔鲍炜张赟张新海曹卫东高大宽宋蕾
- 关键词:PSUPER核糖核酸干扰胶质瘤
- 大鼠抗小鼠PTA1/CD226单克隆抗体的制备与鉴定
- 目的:血小板与T细胞活化抗原1(PTA1/CD226)分子属于免疫球蛋白超家族成员,主要表达于活化T 细胞NK细胞、巨核/血小板谱系、活化的血管内皮细胞及一部分B细胞亚群。现已证实,脊髓灰质炎病毒受体(PVR/CDl55...
- 王东琳张新海宋朝君徐向升金伯泉
- 关键词:单克隆抗体小鼠
- 文献传递