张钦恺
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金国家科技重大专项山东省“泰山学者”建设工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 转基因动物的相关研究进展被引量：2
- 2013年
- 自从世界上第一批转基因动物诞生后,动物基因转移技术很快应用到动物育种中。本文主要介绍了几种常用的动物转基因技术,从提高动物生长率、改良动物经济性状,提供生物药品,提供动物模型和器官,提高动物的观赏价值等方面概述了转基因动物的研究现状,并对其食品安全性进行了讨论。
- 周扬张钦恺潘庆杰
- 关键词：转基因动物转基因技术食品安全
- DNA甲基化调节转基因小鼠外源基因表达的研究
- 目的 在转基因研究中,我们发现同一窝纯合转基因小鼠的绿色荧光表型不同,因此对其潜在的分子沉默机制进行了探究.本研究为制备高效表达目的基因的转基因动物提供坚实的理论基础,从而使转基因动物在各个领域发挥其更广泛且更有价值的作...
- 周扬张滕沈伟闵令江姜颖张钦恺谢凤云潘庆杰
- 济宁青山羊BMPR-IB基因的多态性分析被引量：4
- 2014年
- 为辅助选择济宁青山羊高性能繁殖分子标记提供依据,利用PCR-SSCP技术对青岛济宁青山羊BMPRIB基因外显子进行多态性分析。发现在济宁青山羊外显子的816 bp位点出现了A→G的突变,引起该位点的密码子由CAG转变成CGG,使氨基酸序列产生Q(谷氨酰胺)→R(精氨酸)变化,此变化对研究BMPR-IB基因与山羊高繁性能的相关性提供参考。
- 李星星张钦恺徐君君李桢程明刘开东潘庆杰
- 关键词：济宁青山羊BMPR-IB基因PCR-SSCP
- 3个山羊品种GDF9基因外显子2多态性检测被引量：5
- 2014年
- 对山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因进行单核苷酸多态性检测,为进一步研究GDF9基因与山羊产羔数的相关性奠定理论基础。根据GDF9基因序列(GenBank:EF 446168),设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因外显子2在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊)以及低繁殖力山羊品种(崂山奶山羊、莱芜黑山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。引物1和引物3均存在多态性。对于引物1扩增片段,3个山羊品种均检测到AA、AB和BB 3种基因型,测序分析发现外显子2第26 bp处有1个G→A的单碱基突变,但没有引起氨基酸改变;济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊A等位基因频率分别为0.891 7,0.812 5,0.290 9;济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊B等位基因频率为0.108 3,0.187 5,0.709 1;AA基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AB基因型的多0.539只(P<0.01),比BB基因型的多0.629只(P<0.01),但对莱芜黑山羊和崂山奶山羊产羔数没有显著影响(P>0.05)。对于引物3,3个山羊品种均检测到CC、CD和DD 3种基因型,测序分析发现外显子2第795 bp处有1个G→A的单碱基突变并且导致缬氨酸改变为异亮氨酸;济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊C等位基因频率分别为0.916 7,0.859 4,0.400 0。济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊D等位基因频率分别为0.083 3,0.140 6,0.600 0;CC基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比CD基因型的多0.568只(P<0.01),比DD基因型的多0.62只(P<0.01),CC基因型莱芜黑山羊产羔数最小二乘均值比CD基因型的多0.344只(P<0.01),比DD基因型的多0.379只(P<0.01),但对崂山奶山羊产羔数没有显著影响(P>0.05)。初步表明,GDF9基因可能是控制济宁青山羊和莱芜黑山羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的分子标记。
- 王百川张钦恺徐君君程明刘开东李桢潘庆杰
- 关键词：山羊PCR-SSCP
- 山羊睾丸支持细胞的分离培养及鉴定
- 目的 本实验以文献报道的睾丸支持细胞培养方法为基础,改进消化液的组合、消化时间及纯化方法,有效分离且较长期培养山羊睾丸支持细胞,为进一步探究和利用支持细胞奠定基础.材料方法 本研究选取3月龄公羊作为实验动物,将山羊睾丸组...
- 姜颖董焕声张钦恺谢凤云王明明潘庆杰
- 山羊精原干细胞的鉴定及培养体系优化的研究被引量：1
- 2016年
- 该研究优化了山羊精原干细胞（goat spermatogonial stem cells,g SSCs）培养体系,使山羊精原干细胞能在体外长期培养,维持自我更新的能力并保持未分化状态。取3~5月龄山羊睾丸,采用两步酶消法结合差速贴壁方法得到山羊精原干细胞悬液,分别通过形态学观察、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）染色、特异基因表达及蛋白质水平的分析对培养的细胞进行鉴定;并以山羊睾丸支持细胞（goat sertoli cells,g SCs）、小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）和层黏连蛋白（laminin,L）为饲养层,观察饲养层对山羊精原干细胞体外增殖的影响。结果表明,山羊精原干细胞体外增殖形成克隆簇,AKP染色呈阳性。经RT-PCR检测,Oct-4、C-myc、Cyclin D1、Ngn3和TERT等干细胞特异基因均有表达。细胞免疫组化结果显示,Oct-4、SSEA-1、α6-integrin、Vasa和Thy-1蛋白质呈阳性。克隆簇统计显示,在山羊睾丸支持细胞上形成的山羊精原干细胞（goat spermatogonial stem cells,g SSCs）克隆数与其他两组比较差异显著（P〈0.05）。山羊睾丸支持细胞饲养层上的精原干细胞可在体外传3~4代,培养时间为2个月。结果证明,通过两步酶消法和差速贴壁法可以分离获得山羊精原干细胞,且山羊睾丸支持细胞能够促进g SSCs的增殖。
- 张钦恺姜颖王明明董焕声尉玉杰潘庆杰
- 关键词：山羊精原干细胞睾丸支持细胞饲养层
- 山羊睾丸支持细胞的分离培养及鉴定被引量：6
- 2014年
- 本实验通过改良方法使山羊睾丸支持细胞能够在体外快速分离且较长时间培养。将山羊睾丸组织剪碎后经2种混合酶溶液(4 mg/m L胶原酶Ⅳ与0.2%透明质酸酶混合液和0.25%胰酶与10μg/m L DNase Ⅰ混合液)次第消化,利用差速贴壁法纯化细胞悬液中的支持细胞,对培养72 h的细胞经台盼蓝染色鉴定细胞活率,观察支持细胞形态学特征及生长增殖情况,油红O染色、H.E.染色及福尔根染色对支持细胞进行鉴定。结果表明:染色结果观察到在细胞核周围有空泡状结构且有核小体存在,表明本实验分离培养的是山羊睾丸支持细胞,且纯度较高,充分证明了该改良方法可有效的分离山羊睾丸支持细胞并在体外较长时间培养。
- 姜颖潘庆杰张钦恺李岩徐君君
- 关键词：睾丸支持细胞体外培养山羊
- 济宁青山羊BMPR-IB基因的多态性分析
- 为辅助选择济宁青山羊高性能繁殖分子标记提供依据,利用PCR-SSCP技术对青岛济宁青山羊BMPRIB基因外显子进行多态性分析。发现在济宁青山羊外显子的816 bp位点出现了A→G的突变,引起该位点的密码子由CAG转变成C...
- 李星星张钦恺徐君君李桢程明刘开东潘庆杰
- 关键词：济宁青山羊BMPR-IB基因PCR-SSCP
- 文献传递
- 3个山羊品种GDF9基因外显子2多态性检测
- 对山羊生长分化因子9(growth differentiation factor9,GDF9)基因进行单核苷酸多态性检测,为进一步研究GDF9基因与山羊产羔数的相关性奠定理论基础。根据GDF9基因序列(GenBank:E...
- 王百川张钦恺徐君君程明刘开东李桢潘庆杰
- 关键词：山羊PCR-SSCP
- 文献传递
- 山羊睾丸支持细胞的分离培养及鉴定
- 目的:本实验以文献报道的睾丸支持细胞培养方法为基础,改进消化液的组合、消化时间及纯化方法,有效分离且较长期培养山羊睾丸支持细胞,为进一步探究和利用支持细胞奠定基础.材料方法:本研究选取3月龄公羊作为实验动物,将山羊睾丸组...
- 姜颖董焕声张钦恺李岩徐君君潘庆杰
