徐光锦
- 作品数：8 被引量：38H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠MSCs分离体外扩增及向神经样细胞诱导分化的研究被引量：4
- 2005年
- 目的:研究小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)的分离、体外扩增及向神经样细胞分化的潜能。方法:取 8-9周小鼠骨髓悬浮至全培养基中,接种于纤连蛋白覆盖的培养器皿中,纯化并扩增mMSCs;检测第9-10代细 胞的生长状态、细胞周期、表型,并进行光镜形态学观察;用二甲基亚砜和丁羟茴醚诱导细胞分化,免疫荧光法检测 其诱导分化前后神经细胞和神经干细胞的特异性标记蛋白的表达。结果:mMSCs为贴壁细胞,表现为成纤维细胞 样,具有梭形、多角形等形态,传至15代仍可维持其形态特征;83%的细胞处于G0/G1期;mMSCs不表达CD45而 表达CD44、CD13,与人MSCs表型一致;诱导分化后,大部分细胞变成双极、多极和锥形,并相互交织成网状结构, 呈现神经细胞和神经干细胞表型。结论:mMSCs可被成功分离及体外扩增培养,并具有同人类MSCs相同的形 态、表型、生长特征和向神经样细胞分化的潜力,是研究细胞及基因治疗小鼠病理模型的良好工具细胞。
- 徐光锦付新巧杨华静朱遂强张苏明
- 关键词：骨髓小鼠体外扩增分化神经样细胞
- 对比研究经颈动脉和立体定位注射骨髓间充质干细胞治疗缺血性脑卒中被引量：23
- 2005年
- 目的 探讨安全高效移植骨髓间充质干细胞(mensenchymal stem cells,MSCs)治疗脑缺血的方法。方法 采用连续传代培养的方法纯化MSCs,Brdu标记后分别经颈动脉(1×104/μl,200μl)和立体定位(1×105/μl,10μl)注射至大鼠脑缺血2 h再灌注1 d模型,各自设立对照组,观察术后神经功能评分以及脑部Brdu阳性细胞的分布。结果 经颈动脉注射组较立体定位注射组爬杆实验评分低(P<0.05),Brdu阳性细胞存活多,迁移范围更广。结论 MSCs具有卒中后脑保护作用,而经颈动脉的给药方式优于立体定位注射。
- 杨华静徐光锦褚倩张苏明
- 关键词：骨髓间充质干细胞缺血性脑卒中
- 骨髓间充质干细胞移植促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复被引量：1
- 2008年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响极其可能机制。方法采集SD大鼠骨髓，分离出MSCs，并培养、纯化，取传至第6代的MSCs，移植前1d以5溴2脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）标记，然后用显微注射器将其缓慢注射到脊髓损伤大鼠模型（成年SD大鼠）的受损脊髓中心，以不进行移植的脊髓损伤大鼠模型（损伤组）和假手术组为对照。术后进行运动功能评分以判断神经功能恢复情况，并切取移植区域脊髓组织，应用荧光免疫化学染色检测脊髓损伤灶边周的神经元凋亡情况（TUNEL与NeuN双标记）以及移植的MSCs的分布和向神经元分化情况（Brdu与NeuN双标记），应用逆转录聚合酶链反应检测损伤灶区域脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达。结果移植后第3天开始，损伤组和移植组大鼠的BBB运动功能评分明显上升，第14天后进入平台期，但移植组各时间点的BBB运动功能评分均明显高于损伤组（P〈0．05）。移植后3d，在移植组的脊髓组织中可见Brdu标记阳性细胞，少部分Brdu标记阳性细胞同时表达神经元特异性标志物NeuN；移植后第3、7天，损伤组和移植组脊髓组织中的凋亡神经元均显著多于假手术组（P〈0．01），凋亡的神经元多存在于损伤周边区，但移植组的凋亡神经元显著少于损伤组（P〈0．01）；移植后第3、7天，假手术组未检测到BDNF mRNA的表达，损伤组和移植组均可检测到BDNF mRNA的表达，移植组的表达量分别较损伤组高28．6％和39．2％（P〈0．05）。结论移植的骨髓MSCs可促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复，其机制除MSCs直接分化为神经元进行修复外，还可能与其改善脊髓损伤区的微环境、上调BDNF mRNA表达、减少神经细胞凋亡有关。
- 骆翔喻志源唐洲平徐光锦陈晨张强王伟
- 关键词：间质干细胞移植骨髓脊髓损伤
- 癫痫大鼠海马内神经干细胞移植的实验研究被引量：3
- 2008年
- 取胎鼠海马进行神经干细胞(NSC)的培养、鉴定与标记,以氯化锂—匹罗卡品诱导制成大鼠急性癫痫模型,于发作后第4天将以5-溴-2′-脱氧尿苷(Brdu)标记的NSC移植入大鼠海马,检测移植后NSC在宿主体内的存活情况,移植细胞对癫痫大鼠齿状回苔藓纤维出芽(MFS)的影响。发现移植后2个月NSC在宿主体内能够存活,并向移植区周围迁移;NSC移植组大鼠海马齿状回内分子层Timm染色颗粒明显少于未移植组。认为NSC移植入癫痫大鼠海马后能够存活,并能显著抑制海马齿状回MFS。
- 张广慧吴方荣刘桂凤徐光锦苟玉兰李卫华
- 关键词：神经干细胞癫痫
- 大鼠海马脑片星形胶质细胞与NG2胶质细胞形态学及电生理特性比较
- 2009年
- 目的:比较研究大鼠海马脑片星形胶质细胞和NG2胶质细胞(以下简称NG2细胞)的形态学特点和电生理特性,为区别这两种胶质细胞提供依据,也为进一步研究两者的功能及相互关系等提供实验基础。方法:以P21～P25大鼠海马CA1区放射层胶质细胞为研究对象,通过脑片钳全细胞记录、记录后染色标记以及激光共聚焦成像等技术方法,比较星形胶质细胞与NG2细胞在形态学和电生理学特性上的异同。结果:形态学上,星形胶质细胞具有大量的突起,并且突起呈丛状分支,极细的突起非常发达,形成海绵样结构;NG2细胞也具有较多突起,但突起分支较少,突起呈长线状延伸出较长的距离,往往缺少星形胶质细胞典型的一个或多个粗大的一级突起。电生理特性上,两种细胞的静息膜电位(RMP)非常接近,而膜电容(Cm)和膜电阻(Rm)则差异非常大。对于星形胶质细胞,其I-V曲线呈线性,电流没有任何整流现象;而NG2细胞I-V曲线具有明显的外向整流特性,表达大量的快钾通道电流(Ka)、延迟整流钾电流(Kdr),以及比较小的内向整流钾电流(Kir);而且部分NG2细胞还表达低密度的电压依赖性钠电流。结论:大鼠海马脑片星形胶质细胞和NG2细胞在形态学和电生理上均存在一定的差异;在脑片钳实验中,根据这些差异,可以清楚地区分两者。
- 徐光锦谢敏杰喻志源周民王伟
- 关键词：星形胶质细胞电生理特性海马
- 不同培养条件下胚胎神经干细胞分化细胞中神经元所占比例的比较被引量：7
- 2005年
- 目的比较细胞因子(bFGF、EGF)、B27及血清对胚胎神经干细胞分化的影响。方法从孕16-18d大鼠胚胎脑室旁组织分离神经干细胞,进行原代培养,分为B27组、bFGF+EGF组(联合组)、血清组及对照组;每天观察细胞生长状况。结果培养细胞呈Nestin免疫阳性;各组均可见干细胞的生长及分化。免疫荧光双标及图象分析结果B27组及联合组神经干细胞分化为神经元的比例大,联合组更突出(P<0.01);血清组及对照组神经干细胞组分化为胶质细胞比例较大,血清组更突出(P<0.01)。结论神经干细胞的分化同时受到内在基因和外在环境的影响,bFGF、EGF可促进NSC细胞生长,并对细胞分化为神经元起很大作用。
- 陈玲陈景刚唐洲平张广慧徐光锦朱遂强
- 关键词：神经干细胞分化
- 大鼠海马脑片星形胶质细胞线性膜电导及细胞间电偶联特性的研究
- 本研究分为三部分：
第一部分：大鼠海马脑片星形胶质细胞与NG2+胶质细胞电生理特性及形态学的比较研究
星形胶质细胞和NG2+胶质细胞是哺乳动物中枢神经系统中主要的两类神经胶质细胞。NG2+胶质细胞过去一直被认...
- 徐光锦
- 关键词：海马脑片星形胶质细胞电生理学
- 小鼠骨髓间充质干细胞分离、体外扩增及向神经样细胞诱导分化的研究
- 徐光锦
- 关键词：骨髓间充质干细胞昆明白小鼠C57BL/6小鼠体外扩增神经样细胞
