徐宏伟
- 作品数：45 被引量：170H指数：7
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目达能营养中心膳食营养研究与宣教基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 生殖细胞减数分裂前期Ⅰ染色体标本制作方法改进被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨生殖细胞减数分裂前期Ⅰ染色体标本制作方法的改进。方法:6~8周龄雄性昆明种小鼠,随机分为对照组和500、750、1 000mg/kg十一酸睾酮干预组。各干预组小鼠肌肉注射不同剂量十一酸睾酮。作用48h后,各组小鼠均腹腔注射秋水仙素2mg/kg,分离睾丸组织曲细精管中的生精细胞,Giemsa染色。光镜下观察各组小鼠生精细胞减数分裂前期Ⅰ不同阶段分裂相细胞染色体形态并计数,计算各分裂相细胞的检出率。结果:对照组非分裂细胞达到55.63%,随着十一酸睾酮的应用及其剂量的提高,各干预组非分裂细胞比例逐渐降低,分别较对照组显著减少了9.71%、20.58%和26.64%。分裂各期细胞统计结果显示,750mg/kg十一酸睾酮干预组偶线期细胞达到22.05%,分别较对照组和500mg/kg十一酸睾酮干预组显著增多4.84%和4.70%;各十一酸睾酮干预组粗线期细胞分别较对照组显著增多了10.74%、14.73%和20.09%,差异均有统计学意义;各组间细线期、双线期、终变期细胞未见显著性差异。结论:采用十一酸睾酮与秋水仙素联合应用的方法,可显著提高生殖细胞减数分裂前期Ⅰ染色体标本分裂相细胞的检出率,改善标本制作质量和观察效果。
- 苏爱李艺帆毋亚仙刘颖徐宏伟
- 关键词：生殖细胞减数分裂十一酸睾酮小鼠
- 下调VEGF表达对人乳腺癌细胞凋亡相关基因的影响
- ＜正＞血管生成与肿瘤生长、侵袭、转移密切相关。血管内皮生长因子（vascular endothelialgrowth factor）VEGF除了促进肿瘤新生血管生成外,还通过自分泌作用于肿瘤细胞自身的（vascular ...
- 许秀娥徐宏伟葛银林
- 文献传递
- 大剂量维生素E、C补充对大鼠生物大分子氧化损伤及细胞功能影响的研究
- 目的观察不同剂量维生素E、C（VE、 VC）补充对大鼠生物大分子氧化损伤及细胞功能的影响。方法采用Wistar大鼠随机分成8组,4组 VE干预:对照组、VE1、VE2和VE3,对照组给予普通饲料,三个干预组均喂饲添加维生...
- 徐宏伟张秀珍汪求真薛美兰孙永叶马爱国
- 关键词：SCGE淋巴细胞转化GSH-PX红细胞膜流动性
- 文献传递
- 下调VECF基因表达对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用被引量：7
- 2005年
- 目的利用RNA干扰技术特异性抑制乳腺癌细胞MCF-7的VEGF基因表达,研究乳腺癌的治疗新方法。方法体外合成带有T7启动子的VEGF基因DNA片段,转录针对VEGF mRNA的siRNA,使用脂质体转染的方法导入细胞,观察转染后乳腺癌细胞MCF-7的增殖变化,MTT法检测细胞存活率,RT-PCR检测转染后VEGF mRNA表达水平的变化,ELISA检测蛋白表达的下降效果。结果所设计的两个靶位点siRNA能有效抑制乳腺癌细胞生长；VEGF mRNA的表达也受到有效抑制,明显减少；同时,对应的VEGF蛋白水平也显著降低。阴性对照的错义序列组siRNA则没有这种效果。结论应用RNA干扰技术可以有效抑制肿瘤细胞的增殖。
- 李霞徐文华曹明智侯琳徐宏伟杜卫葛银林
- 关键词：SIRNAMCF-7基因治疗
- KDR siRNA对乳癌细胞凋亡和NES1与RUNX3基因甲基化影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨体外水平利用化学修饰的小干扰RNA(siRNA)敲减含激酶插入区受体(KDR)基因治疗乳癌的可行性和特异性。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000TM作为转染试剂,将针对人KDR基因的siRNA转染人乳癌细胞株MCF-7敲减KDR基因的表达。通过Hoechst 33258染色观察MCF-7细胞的凋亡情况;采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测NES1基因和RUNX3基因甲基化状态和mRNA的转录水平。结果靶向KDR的siRNA转染MCF-7细胞后可诱导细胞凋亡,NES1基因和RUNX3基因甲基化程度降低,出现非甲基化条带,同时mRNA表达上调。结论KDR siRNA在体外能逆转MCF-7细胞的NES1基因和RUNX3基因甲基化,并诱导细胞凋亡。
- 许秀娥徐宏伟葛银林张金玉冯翠萍
- 关键词：MCF-7细胞血管内皮生长因子受体2甲基化
- 狭鳕鱼皮胶原肽对过氧化氢诱导的人成骨细胞氧化损伤作用被引量：1
- 2016年
- [目的]复制过氧化氢诱导人成骨细胞氧化损伤模型,探讨狭鳕鱼皮胶原肽保护作用机制。[方法]以人成骨细胞为研究对象,将对数生长期的细胞分为6组:正常对照组、H_2O_2损伤组、胶原蛋白肽低(100μg/m L)、中(300μg/m L)、高(600μg/m L)浓度组、阳性对照组(300μg/m L维生素E),CCK-8法检测成骨细胞的存活率,酶联免疫法检测细胞培养液中SOD、MDA的含量,PCR技术检测Foxo3amRNA的表达水平,Western blot技术检测Sirt1、Foxo3a的蛋白表达水平。[结果]与模型组相比,胶原肽组细胞存活率及SOD的水平升高,MDA含量下降,Foxo3amRNA及蛋白表达水平下降,Sirt1蛋白表达水平上升。[结论]300μmol/L H_2O_2可成功复制成骨细胞氧化损伤模型;一定浓度的胶原蛋白肽能降低MDA的含量,提高SOD水平,并具有抗氧化损伤功能,胶原肽对成骨细胞的保护作用可能与下调Foxo3a和上调Sirt1的表达水平有关。
- 薛玲芳陈雪红徐宏伟韩彦弢王春波
- 关键词：胶原蛋白肽过氧化氢人成骨细胞
- 海兔素对酒精性肝损伤大鼠肝脏保护作用及机制被引量：3
- 2020年
- 本实验旨在观察海兔素对酒精性肝损伤大鼠的保护作用,并从内毒素介导的Kupffer细胞toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路角度探讨海兔素可能的保肝机制。雄性Wistar大鼠随机分为3组,包括正常对照组、酒精模型组和海兔素干预组。其中,酒精模型组和海兔素干预组大鼠分别灌胃给予8 g/(kg mb·d)乙醇2周后,再给予12 g/(kg mb·d)乙醇6周。海兔素干预组在给予乙醇前1h,灌胃给予海兔素150 mg/(kg mb·d),持续8周。末次灌胃后,禁食不禁水12 h,处死大鼠。采用苏木精-伊红染色进行肝组织病理学观察,采用透射电子显微镜进行肝组织超微结构观察,采用酶学实验检测肝脏损伤血清生物标志物水平,采用显色底物鲎试剂盒检测血清内毒素水平;采用门静脉胶原酶Ⅳ原位灌注及密度梯度离心获得大鼠原代Kupffer细胞。采用墨汁吞噬试验评价Kupffer细胞吞噬活性;采用逆转录聚合酶链反应测定Kupffer细胞中CD14、TLR4和NF-κB的mRNA表达水平;采用蛋白印迹实验测定Kupffer细胞中TLR4、MyD88、NF-κB p65和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附实验测定Kupffer细胞上清液中TNF-α和白细胞介素(interleukin-1β,IL-1β)含量。结果显示,海兔素补充可减轻乙醇引起的肝组织损伤,降低肝脏损伤血清生物标志物水平(P<0.05)。进一步研究发现,海兔素补充可减少血浆内毒素含量(P<0.05),有效恢复Kupffer细胞吞噬活性,显著降低Kupffer细胞中TLR4及其下游CD14、TLR4、MyD88、NF-κB p65等相关蛋白表达水平(P<0.05),并使TNF-α和IL-1β等炎性因子释放受到抑制(P<0.05)。结果表明,海兔素对酒精性肝损伤大鼠肝组织具有保护作用,其作用机制可能与海兔素抑制内毒素介导的MyD88依赖性TLR4信号通路活化有关。
- 常志尚刘颖苏爱王文成徐宏伟姜雨杉梁惠
- 关键词：酒精性肝损伤内毒素TLR4信号通路KUPFFER细胞
- 青岛地区食品中铬含量的测定及意义被引量：3
- 1999年
- 利用石墨炉原子吸收分光光度法测定了青岛地区３１ 种食品中铬含量，测定回收率为９２８％ ～９８０８％ ，相关系数ｒ＝ ０９９７８，回归方程 Ｙ＝ ００１１８ Ｃ＋ ００７７６，结果表明，食品中铬含量以动物性食品最高，谷类食物居中，蔬菜、水果较低。该结果为青岛地区不同人群铬的摄入量提供了依据。
- 杜卫张秀珍姜文洁徐宏伟
- 关键词：铬食品原子吸收法分光光度法
- VEGF基因表达抑制对胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:研究siRNA(small interfering RNA)对人胃腺癌细胞SGC-7901的VEGF基因表达的影响．方法:选择血管内皮生长因子(VEGF)基因为靶基因,设计两组针对VEGF mRNA的小干扰RNA,合成DNA寡核苷酸链,体外转录合成siRNA．以人胃腺癌细胞系SGC-7901为靶细胞,应用脂质体转染的方法,将siRNA导入细胞．采用Hoechst33258染色观察siRNA作用于SGC-7901细胞中出现凋亡小体的情况．流式细胞仪检测细胞周期的改变,RT-PCR法比较转染前后VEGF mRNA表达水平的变化, ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白分泌量的变化．结果:两组siRNA转染后均能有效地抑制 SGC-7901细胞的生长,诱导细胞凋亡产生凋亡小体．siRNA作用于SGC-7901细胞．其细胞周期均发生了明显的变化,主要表现为G0／G1 期细胞增多,S期细胞减少,并使细胞周期阻滞于G0／G1期(siRNA1组,siRNA2组G0／G1期VS 对照组G0／G1期:75．04％,76．52％ vs 58．37％, P<0．01;siRNA1组,siRNA2组S期vs对照组S 期:17．82％,16．73％ vs 39．52％,P<0．01),而其他组则无明显变化．VEGF mRNA的表达量大幅度减少(siRNA1组,siRNA2组vs对照组: 0．638±0．078,0．656±0．085 vs 0．941±0．046, P<0．01),相对应的VEGF蛋白水平也显著降低(164．7±22．7,166．3±26．6 vs 414．0±61．5, P<0．01),而其他组siRNA转染后则无上述作用．结论:应用靶向VEGF基因RNA干扰技术可以有效抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖．
- 徐文华葛银林徐宏伟王秀丽耿芳宋
- 关键词：SGC-7901RNA干扰血管内皮细胞血管内皮生长因子
- 维生素A、E增强叶酸防畸效果的研究
- 观察维生素A、E能否增强叶酸的防畸效果.采用环磷酰胺所致大鼠的胎鼠发育畸形的动物模型,孕期对孕鼠分别补充叶酸,叶酸和维生素A、E,观察其防畸效果.结果显示对孕鼠单独补充叶酸使胎鼠脑膨出率由87.27%降至42.03%（P...
- 马爱国徐宏伟梁惠杜卫刘颖
- 关键词：维生素E视黄醇叶酸环磷酰胺致畸
- 文献传递
