徐鸿绪
- 作品数：87 被引量：298H指数：9
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 细粒棘球绦虫亲环素A的重组表达产物的纯化及免疫学鉴定
- 2014年
- 目的克隆细粒棘球绦虫亲环素A（EgCypA）基因并体外表达纯化该蛋白以评价EgCypA的血清学免疫检测价值。方法利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫cDNA文库中的EgCypA的理化及生物学特性并设计引物，以细粒棘球绦虫cDNA为模板进行PCR扩增得到EgCypA基因，将该基因克隆到原核表达载体pET28a中，将重组载体导入大肠埃希菌，IPTG诱导该重组菌株表达EgCypA，使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）明确重组蛋白表达情况；利用Western blot法进行纯化的重组蛋白对细粒棘球绦虫感染血清及其他寄生虫感染血清免疫反应性的鉴定，以此评价该重组蛋白的免疫检测价值。结果SDS—PAGE显示重组菌株在相对分子质量18400～25000表达了大量蛋白，该蛋白的分子量同生物信息学分析的EgCypA的分子量吻合。Western blot结果显示细粒棘球绦虫相关血清与重组蛋白作用后于17000～26000之间出现了特异性的反应条带，其他寄生虫血清则无此反应。结论EgCypA具有良好的抗原性，是很有前景的细粒棘球绦虫特异性诊断抗原，可以作为免疫学检查细粒棘球绦虫早期感染的候选分子。
- 刘敏李玉哲徐鸿绪胡旭初
- 关键词：细粒棘球绦虫亲环素A重组蛋白质类印迹法蛋白质
- 下肢静脉性溃疡与白细胞浸润和新生血管的关系被引量：20
- 2005年
- 目的探讨白细胞浸润和新生血管与下肢静脉性溃疡的关系。方法采用不同体位下肢血常规白细胞计数和免疫组织化学法测定微血管密度,比较溃疡组、无溃疡组和对照组的白细胞计数和微血管密度。结果溃疡组中,患肢下垂位血白细胞计数比平卧位减少23.7%,与其他组相比差异有统计学意义(P<0.05);患肢皮肤中白细胞和微血管密度比其他组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);白细胞与微血管密度呈显著正相关(r=0.73,P<0.05)。结论白细胞浸润和新血管生成是下肢静脉性溃疡发生发展的重要因素。
- 刘大钺王深明钱结胜黄雪玲徐鸿绪
- 关键词：下肢静脉性溃疡白细胞浸润新生血管微血管密度
- 人乳头瘤病毒DNA检测与液基薄层细胞学检查在宫颈疾病筛查中的应用被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨液基薄层细胞学与高危型HPV-DNA检测在妇科宫颈疾病筛查的应用及其临床意义。方法:分析733名妇女宫颈刷出物中13种高危型HPV-DNA检测结果,其中227例同时进行TCT细胞学检查。根据细胞学诊断结果分为4组,同时对各组HPV DNA检测结果进行统计学分析。结果:733名妇女高危型HPV感染率为16.2%。227例TCT结果显示各年龄组TCT阳性率差别没有统计学意义(P=0.203)。各分组的高危型HPV检出率分别为9.5%(17/179)、63%(17/27)、90.9%(10/11)和80%(8/10),差别具有统计学意义(P=0.000),在TCT阳性的病例中(A0以上),高危型HPV DNA检出率随着细胞异常级别的升高而升高的趋势并不明显。结论:联合应用高危型HPV检测和液基薄层细胞学(TCT)检查可以提高宫颈疾病筛查阳性率。
- 徐鸿绪黄晓夏余俐
- 关键词：人乳头瘤病毒细胞学宫颈病变
- 肿瘤型M2丙酮酸激酶表达水平与非小细胞肺癌患者近期疗效及预后的关系被引量：1
- 2009年
- 目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者治疗前后血浆中肿瘤型M2丙酮酸激酶（TuM2-PK）的表达水平及其与肿瘤的近期疗效及预后的关系。方法用ELISA法分别检测83例NSCLC患者（其中31例NSCLC患者手术治疗，52例患者失去外科手术机会而行内科治疗）和106例健康对照者血浆中的TuM2-PK表达水平，并进行24个月的随访。结果NSCLC手术后血浆TuM2-PK浓度（13．5U／ml）与术前（25．4U／ml）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。经内科治疗后，缓解组血浆TuM2-PK浓度（11．5U／ml）与治疗前（22．6U／ml）相比显著下降（P〈0．05）；进展组血浆TuM2-PK浓度（60．8U／ml）与治疗前（23．7U／ml）相比显著升高（P〈0．05）；稳定组血浆TuM2-PK浓度治疗前后差异无统计学意义（P〉0．05）。手术后TuM2-PK阳性率显著下降，而化疗后阳性率下降不明显。在随访期间，手术后TuM2-PK阳性患者肿瘤复发或转移率（67％，6／9）高于术后阴性患者（5％，1／20）。结论检测NSCLC患者血中肿瘤标志物TuM2-PK表达水平对预测肿瘤微转移有一定的临床意义，有助于疗效的评估以及预后的预测。
- 徐鸿绪王东陈连周周娟钟佛添曾文涛
- 关键词：非小细胞肺癌丙酮酸激酶肿瘤标志
- 旋毛形线虫分泌抗原P53的序列分析及重组表达产物的免疫学鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的 分析旋毛形线虫分泌抗原P53的免疫学特性,评价其免疫诊断价值.方法 克隆并测序分析旋毛形线虫P53的编码区序列,应用生物信息学分析其与其他蠕虫同源蛋白的相似性以及潜在的线性B细胞和T细胞表位;并将成熟肽编码区克隆至pET28a（＋）原核表达质粒中,纯化的重组蛋白用旋毛形线虫感染血清和其他寄生蠕虫感染血清经Western印迹法鉴定其免疫反应性.结果 生物信息学分析未发现其他寄生蠕虫的P53同源基因,表明TsP53具有多个T细胞和B细胞识别表位,Western印迹法显示TsP53抗原只与旋毛形线虫感染血清反应,与其他几种蠕虫感染血清无反应.结论 P53具有良好的抗原性,是非常有前景的旋毛形线虫特异性诊断抗原.
- 徐鸿绪武伟华毛玉玲梁健谌嘉嘉胡旭初
- 关键词：旋毛形线虫肿瘤抑制蛋白质P53
- NASBA技术在异基因外周血干细胞移植术后受者HCMV感染诊断的应用
- 目的探讨NASBA技术检测mRNA对异基因外周血干细胞移植受者术后人类巨细胞病毒(HCMV)感染的诊断价值。并观察该法对抗病毒治疗的指导意义。方法以128例移植术后患者为研究对象.采集移植术后外周血352份。利用核酸基础...
- 徐鸿绪刘雅峰曾文涛王东傅茜蔡建宇
- 关键词：异基因外周血干细胞移植人类巨细胞病毒信使核糖核酸
- 文献传递
- H-2K^b基因转移诱导小鼠心肌移植免疫耐受被引量：7
- 2000年
- 目的探讨H-2Kb基因转移诱导小鼠心肌移植免疫耐受的可行性。方法通过逆转录病毒载体介导的基因转移技术,将供体小鼠(C57BL/6)的H-2Kb基因(小鼠MHC-类基因)导入到受体小鼠(BALB/c)的造血细胞。结果H-2Kb基因可以稳定地整合进小鼠造血细胞的基因内,并在受体内表达较长时间。正常对照小鼠的心肌移植物平均存活时间(MST)为9.4±1.84d。诱导耐受组小鼠的心肌移植物MST为45.7±6.001d,比对照组明显延长(P<0.05)。结论H-2Kb基因转移诱导了供体特异性的免疫耐受。
- 李蓁李树浓徐鸿绪曾文涛陈规划朱振宇
- 关键词：小鼠免疫耐受心肌移植
- 肾移植HLA分型试验影响因素的探讨
- 2000年
- 目的：为了探讨快速准确地进行肾移植供受体的ＨＬＡ分型。方法：采用单克隆抗体免疫磁珠法分离Ｔ、Ｂ淋巴细胞；以软加法技术加样后，将反应板置于 ３７℃孵箱中孵育 ５０ｍｉｎ。结果：免疫磁珠分离出的 Ｔ、Ｂ细胞纯度均为１００％，细胞活性 ９６％以上；软加法可避免相邻孔间反应的相互污染，分型结果易于指定；提高反应温度、缩短反应时间，获得以原方法一致的分型结果。结论：采用免疫磁珠分离Ｔ、Ｂ淋巴细胞、以软加法技术加样、提高反应温度、缩短反应时间，有助于准确快速地进行ＨＬＡ分型。
- 陈连周徐鸿绪赵继宗王长希肖露露
- 关键词：肾移植免疫磁珠HLA分型影响因素
- 荧光定量PCR与荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤细胞IgH基因重排的应用研究被引量：3
- 2015年
- 目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)与免疫磁珠分选联合荧光原位杂交(MACS-FISH)在检测多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓细胞Ig H基因重排的应用价值。方法收集中山大学附属第一医院2014年1-9月初治或治疗后MM患者骨髓标本,分别以荧光定量PCR和MACS-FISH两种方法检测Ig H基因重排情况。结果利用Ig H基因通用引物荧光定量PCR检测23例标本,其中阳性4例,阳性率为17.4%;MACS-FISH法利用Ig H基因断裂点分离探针检测23例标本,其中阳性10例,阳性率为43.5%。MACS-FISH检测的阳性率高于FQ-PCR,二者差异有统计学意义(P=0.04)。对应用MACS-FISH法检测Ig H基因重排阳性的10例标本进一步检测3种融合基因:IGH/CCND1、IGH/FGFR3、IGH/MAF,其中检出IGH/CCND1融合基因阳性3例,IGH/FGFR3融合基因阳性5例,未检出IGH/MAF融合基因。结论在检测多发性骨髓瘤Ig H基因重排方面,MACS-FISH检测阳性率高于荧光定量PCR,对Ig H重排阳性病例还可以进一步检测多种涉及Ig H重排的融合基因,对多发性骨髓瘤患者的预后判断具有重要的临床意义。
- 陈少谦陈培松江晓冰余展鹏何秋莹陈渡波徐鸿绪
- 关键词：多发性骨髓瘤IG荧光定量PCR荧光原位杂交
- 基于多重PCR靶向测序技术建立临床病原菌检测方法
- 2023年
- 目的针对不同临床样本(肺泡灌洗液、痰液、血液)中常见的22种病原菌,建立一种基于多重PCR靶向二代测序(mPCR⁃NGS)的高通量检测方法。方法选取2018年10月至2019年2月中山大学附属第一医院和广州军区广州总医院共84例临床样本和5种病原菌混合的模拟感染样本,对检测方法进行测试,并根据测序序列区分病原菌种类。通过生物信息学方法筛选和设计三种临床样本中常见22种病原菌的特异性引物,并通过多重PCR和二代测序调整引物扩增效率,建立多重PCR靶向二代测序高通量检测体系。结果PCR验证结果表明,针对22种病原菌所设计的44对引物均具有良好特异性;引物终浓度经调整,扩增均一值在0.33~2.37之间。本研究建立的mPCR⁃NGS方法对鲍曼不动杆菌、白色念珠菌、肺炎链球菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌5种菌混合的模拟样本进行验证,其检测下限是3 copies。在11例血液样本中,有6例样本属于单一感染,与临床结果完全一致;5例样本属于混合感染,其中样本1、3、7、10的病原菌感染种类与临床结果不完全一致。在84例临床样本检测中,mPCR⁃NGS共检测出16种病原菌,其中检出最多的病原菌是鲍曼不动杆菌(28/84),次之是缓症链球菌(13/84),第三位是嗜麦芽窄食单胞菌(12/84);mPCR⁃NGS检测阳性率为69.05%,高于临床培养结果的阳性率(53.57%);两种检测方法结果完全一致的样本共39例,总一致率为46.43%。结论多重PCR靶向二代测序检测技术是一种快速、准确、高效的检测方法,可用于肺泡灌洗液、痰液、血液中22种临床常见病原菌的快速、高通量检测。
- 黄晓园郑凯文张俊杰徐鸿绪王菊芳
- 关键词：多重PCR临床病原菌
