- 沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ表达降钙素基因相关肽基因重组载体的构建与鉴定被引量：5
- 2014年
- 目的 构建与鉴定沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）同时表达降钙素基因相关肽（CGRP）基因重组载体.方法 选用pGFP-V-RS载体,将PPARγ小干扰RNA（siRNA）寡核苷酸靶序列连接入pGFP-V-RS载体,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ;将CGRP片段与Mlu Ⅰ酶切,并与末端羟基化的线性质粒pGFP-V-RS重组连接,得到重组载体pGFP-V-RS-exCGRP.将获取的CGRP基因片段连接入线性化重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP.收集第3代HEK-293细胞,将细胞分为4组：CON组：转染空载体pGFP-V-RS质粒,作为对照；SI组：转染重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ质粒；EX组：转染重组pGFP-V-RS-exCGRP质粒；DOU组：转染重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP质粒.每组电极杯中加入5x106个细胞,并分别加入上述质粒2.5μl,给予直流电低压脉冲1次,时间15 ms.培养48 h后收集各组细胞,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）与Western blot检测细胞内PPAR、CGRP mRNA及蛋白的表达.结果 重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP经酶切鉴定及测序结果与设计完全一致.电转染HEK-293细胞后,DOU组细胞PPARγ基因呈低表达,PPARγmRNA与其蛋白的相对表达量为0.036±0.003、0.108 ±0.031,与EX组（0.156±0.014、0.778±0.103）及CON组（0.148±0.014、0.742 ±0.143）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,与SI组（0.054±0.005、0.135 ±0.039）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.DOU组细胞CGRP基因呈高表达,CGRP mRNA与其蛋白的相对表达量为1.144±0.106、1.244±0.184,与SI组（0.320±0.030、0.370±0.089）及CON组（0.444 ±0.041、0.274±0.062）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,与EX组（1.021 ±0.095、1.221±0.181）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 成功构建出沉默PPARγ基因并表达CGRP基因的重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP,能够有效阻断PPARγ基因表达,同时促
- 王义生李宁博李劲峰施佳辰孙俊魁李月白赵国强
- 关键词：RNA干扰降钙素基因相关肽
- 靶向survivin基因小干扰RNA设计及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:利用生物信息学技术预测设计特异抑制survivin蛋白表达的siRNA序列,瞬时转染食道癌细胞KYSE-70,并观察对survivin蛋白表达的沉默效果。方法:依据NCBI数据库获得的survivin mRNA序列,利用Whitehouse,Sidirect和Rational SiRNA Design软件预测设计siRNA干扰序列,并利用BLAST分析干扰序列与人类全基因组的同源性;转染食管癌细胞KYSE-70,Western blot法鉴定蛋白表达。结果:初步预测出3条含21个核苷酸的survivin干扰序列,瞬时转染食道癌细胞KYSE-70后survivin蛋白表达明显下降。结论:运用生物信息学技术可快速便捷预测出抑制survivin表达的siRNA序列,为研究survivin在食管癌发生发展中的作用奠定了基础。
- 施佳辰李懿范丹丹李建辉安继辉汲振余
- 关键词：小干扰RNASURVIVIN基因食管癌
- 大剂量甲氨碟呤治疗骨肉瘤的临床疗效分析被引量：2
- 2015年
- 目的分析大剂量甲氨蝶呤治疗骨肉瘤的临床情况。方法骨肉瘤患者30例均行大剂量甲氨蝶呤治疗,分析患者临床治疗具体情况。结果 30例骨肉瘤患者近期疗效总有效率为73.3%(22/30),不良反应主要包括消化道不适、骨髓抑制、肝功能损害、皮肤黏膜损伤。结论大剂量甲氨蝶呤治疗骨肉瘤具有良好效果,但大剂量甲氨蝶呤有较强化疗药物毒性,不良反应高,需密切监测患者血药浓度,积极处理各种并发症,保证患者可以顺利化疗。
- 郑惠良杨莹郑斐洋施佳辰
- 关键词：大剂量甲氨蝶呤骨肉瘤
- 不同年龄段人血清中酸性肽的HPLC分析被引量：3
- 2013年
- 目的:了解不同年龄人群血清中酸性肽的含量,以寻找神经退行性改变的早期预警的生物标志物。方法:采用内标法和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析法。结果:分析结果显示:1～10岁组(A组),20～30岁组(B组),40～59岁组(C组)和60～80岁组(D组)人群血清中酸性肽的含量分别为2.943±1.340、2.338±0.371、2.052±0.328、(2.778±0.499)mg/ml。A组与B组相比P=0.082,A组与C组相比P=0.012,A组与D组相比P=0.628。结论:20～30岁组和40～59岁组人群血清中酸性肽的含量比1～10岁组和60～80岁组人群血清中酸性肽的含量低,具有统计学意义。
- 谢江涛安玉会王洁琼贺司宇毛红利施佳辰徐霞
- 关键词：酸性肽人血清高效液相色谱
- 河南地区CKD-5期患者HTLV-Ⅰ病毒抗体的检测被引量：1
- 2014年
- 目的筛查CKD-5期患者Ⅰ型人类T淋巴细胞白血病病毒(HTLV-Ⅰ)的感染情况。方法选取322位患者血样应用双抗原夹心ELISA法测定标本中人T淋巴细胞白血病病毒(HTLV AB)抗体表达,检测发及判定标准严格按照产品说明书进行,对阳性患者进行双孔测试,结果为双孔测试阳性者表明存在HTLV-Ⅰ抗体。结果 322例受试者初次阳性的为28例,弱阳性的为8例。双孔测试后阳性的为12例,阳性率为3.7%。结论本次筛查发现了河南地区CKD-5期患者存在HTLV-1型病毒抗体。
- 高仕霖施佳辰赵林王桂叶
- 高效液相色谱检测甲氨喋呤方法的改进被引量：1
- 2015年
- 目的探讨高效液相色谱检测甲氨喋呤方法的改进。方法对血浆样品进行处理,色谱分离所用色谱柱为Chromegabond BASC18,柱温35℃,流动相：0.15 mol/L,流速1.5 ml/min。结果在血药浓度为0.2~50 mg/L时,甲氨喋呤具有良好的线性关系,其最低检测浓度为5 ug/L。结论高效液相色谱检测甲氨喋呤的方法具有简便、快捷、精确的特点,适用于甲氨喋呤的血药浓度监测。
- 郑惠良杨莹郑斐洋施佳辰杨萍
- 关键词：高效液相色谱甲氨喋呤
- 2003-2013年河南省三级医院食管癌住院患者特征分析被引量：3
- 2014年
- [目的]分析2003-2013年河南省三级医院食管癌患者病种构成及变化趋势,为食管癌的预防、诊治及专科建设提供参考依据。[方法]收集2003年1月至2013年6月河南省29家三级医院收治的食管癌患者资料,以患者ID号采集病案信息,统计分析患者特征。[结果]①食管癌住院患者共81 659例,占总住院人数的1.21%。男性52 529例,女性29 130例,男女比1.8∶1。②十年间食管癌住院患者数总体趋势平缓,男性患者增加稍快于女性患者。③食管癌住院患者中,食管恶性肿瘤,未特指（C15.9）患者数居首位（55.53%）,其次为食管中三分之一恶性肿瘤（C15.4）,占26.83%,食管腹部恶性肿瘤（C15.2）患者数最少,占0.02%。病理分型以鳞状食管癌为主（88.44%）。④患者平均年龄为63.14岁,以55-65岁年龄组患者最多（28.29%）。⑤患者主要来自河南省境内,其中河南北部安阳市居首位（18.79%）。[结论]河南省食管癌住院患者在肿瘤类别、性别、年龄、地域分布、病理类型等方面具有一定的规律,应根据这些信息深入开展防治策略研究。
- 吕恭进施佳辰马楠郭磊磊王石曹小琴宋春花刘莺聂伟王凯娟
- 关键词：食管癌住院患者
- 姜素对CD34^+肝癌SMMC-7721细胞增殖及CD34表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨姜素对CD34+肝癌SMMC-7721细胞增殖及其CD34蛋白表达的影响。方法:培养人CD34+肝癌SMMC-7721细胞并用姜素处理,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞术测定SMMC-7721细胞中CD34+细胞含量,Western blot法测定CD34蛋白的水平。结果:姜素对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制率随姜素浓度和作用时间的增加而升高(P<0.05)。姜素处理组CD34+细胞的含量与正常组中CD34+细胞的含量差异具有统计学意义(P<0.05),且抑制率随浓度升高而升高。Western Blot检测CD34的表达情况,组内及组间条带灰度值比较:CD34的表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:姜素能抑制人CD34+肝癌细胞的增殖,但对CD34蛋白的表达无影响。
- 贺靖周明霞王洁琼李浩巴塞施佳辰安玉会
- 关键词：CD34肝癌增殖SMMC-7721细胞
- 重组人血管内皮抑制素联合mFOLFOX化疗方案在晚期肝癌中的疗效观察被引量：1
- 2017年
- 目的探讨重组人血管内皮抑制素联合m FOLFOX化疗方案在晚期肝癌中的应用效果。方法将我院2014年5月—2016年1月收治的60例晚期肝癌患者根据计算机SPSS 19.0统计学软件随机、均等分组,对照组(30例)患者予以m FOLFOX方案化疗,观察组(30例)患者在此基础上静脉滴注重组人血管内皮抑制素进行疾病干预,观察两组患者的治疗效果。结果对照组总有效率为46.7%,观察组总有效率为73.3%,观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑制素联合m FOLFOX化疗方案在晚期肝癌中的应用效果突出。
- 杨莹郑斐洋杨萍施佳辰
- 关键词：重组人血管内皮抑制素晚期肝癌
- 自体DC-CIK细胞联合培美曲塞对老年非小细胞肺癌的疗效及安全性分析
- 2017年
- 目的探讨自体DC-CIK细胞联合培美曲塞对老年非小细胞肺癌的疗效及安全性。方法选取我院收治的老年非小细胞肺癌患者71例进行统计分析,定义单纯接受培美曲塞化疗方案的35例患者作为对照组,采用自体DC-CIK细胞联合培美曲塞治疗方法的36例患者则作为观察组,观察比较两组患者的治疗效果。结果观察组总有效率、不良反应发生率均明显优于对照组(P<0.05)。结论自体DC-CIK细胞联合培美曲塞治疗老年非小细胞肺癌的疗效确切,安全性高,值得推广。
- 杨莹郑斐洋杨萍施佳辰
- 关键词：培美曲塞非小细胞肺癌
