施华萍
- 作品数：24 被引量：55H指数：5
- 供职机构：杭州市红十字会医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金杭州市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 系统性红斑狼疮患者树突状细胞对Th_1/Th_2细胞分化的影响
- 2013年
- 目的探讨系统性红斑狼狼疮(SLE)患者树突状细胞对Th_1/Th_2细胞亚群分化的影响。方法淋巴细胞分离液分离获得SLE患者外周血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD14细胞,联合应用rhGM-CSF、rhlL-4和rhTNF-o诱导分化树突状细胞成熟。在培养的第9天,流式细胞术检测表型,细胞增殖/毒性剂盒分析树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。ELISA法检测培养上清液中lL-12和lL-10的表达。诱导的成熟树突状细胞与健康对照组淋巴细胞共培养5d后,佛波酯+离子霉素+莫能霉素刺激培养4h,进行T淋巴细胞表面抗原及胞质内细胞因子染色,流式细胞仪检测Th_1、Th_2的比例。结果 SLE患者诱导培养的树突状细胞其CD1a的表达降低(P<0.05),HLA-DR、CD80、CD86的表达均明显升高(P<0.05)。活动组与非活动组的树突状细胞HLA-DR、CD80、CD86的表达有统计学差异(P<0.05)。SLE患者诱导培养的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强(P<0.05)。活动组与非活动组的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞也有所差异(P<0.05)。SLE患者诱导培养的树突状细胞分泌IL-12的水平均明显降低(P<0.05);分泌IL-10的水平明显升高(P<0.01),活动组与非活动组的树突状细胞分泌IL-12和lL-10的水平差异无统计学意义(P>0.05)。活动组的树突状细胞与对照组淋巴细胞共培养后Th_1的比例明显降低(P<0.01),Th_2的比例差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SLE患者诱导的树突状细胞表型增加,刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力增强,分泌IL-12降低,IL-10升高。SLE患者树突状细胞功能的异常可能导致了Th_1细胞分化不足,在SLE发生、发展过程中起重要作用。
- 周红娟施华萍蔡龙郑红霞马纪林陶筱娟
- 关键词：系统性红斑狼疮树突状细胞TH1TH2
- 系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞与Th17细胞失衡的研究被引量：7
- 2013年
- 目的通过检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(regulaory T cells,Treg)与Th17细胞的比例,来探讨Treg/Th17细胞的失衡在SLE发病中的作用。方法采用流式细胞仪检测52例SLE患者(其中活动组38例)及22名健康对照者的外周血CD4+CD25highT细胞、Th17细胞的比例,并分析与疾病活动指数(sys-temic lupus erythematosus activity index,SLEDAI)的相关性。结果 SLE患者外周血CD4+CD25highT细胞和Th17细胞占CD4+T细胞的比例与对照者相比,差异无统计学意义(P>0.05),且与SLEDAI无相关性。CD4+CD25highT细胞与Th17细胞的比率在活动组SLE中下降尤为明显(P<0.05),且与SLEDAI呈明显的负相关(P<0.05)。结论 活动性SLE患者外周血Treg与Th17细胞的比率明显下降,并与疾病活动密切相关,说明两群细胞的失衡可能在SLE的发生和发展中起重要作用。
- 马纪林蔡龙施华萍周红娟刘小贤汪卫郑红霞于健宁
- 关键词：系统性红斑狼疮调节性T细胞TH17细胞
- PI3K-Akt信号通路在维甲酸促进调节性T细胞诱导的作用机制
- 马纪林周红娟施华萍汪卫蔡
- 该项目采用体外细胞培养和流式细胞技术及动物实验观察PI3K-Akt信号通路在维甲酸促进调节性T细胞(Treg)诱导的作用及机制，以期利用靶向PI3K-Akt通路促进Treg分化来治疗自身免疫病。
该项目取得如下结果：1...
- 关键词：
- 关键词：动物实验自身免疫病
- 狼疮方对体外扩增小鼠CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞的影响
- 2012年
- 目的:狼疮方对体外扩增小鼠CD4+CD25+调节性T细胞数量的影响。方法:免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4+CD2+5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4+CD25+调节性T细胞;用CFSE法检测CD4+CD25+调节性T细胞体外抑制CD4+CD2-5T细胞的增殖情况。结果:经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4+CD25+T细胞数量明显升高,扩增后的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4+CD25+T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异(P<0.05)。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4+CD2+5T细胞和扩增的CD4+CD25+T细胞对CD4+CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论:狼疮方有助于提高小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4+CD25+调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。
- 于健宁施华萍马纪林蔡龙陶筱娟
- 关键词：调节性T细胞CD4+CD25+FOXP3体外扩增狼疮方
- 系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞的检测和意义被引量：1
- 2007年
- 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)的百分比,并分析其与疾病活动的相关性。方法采用流式细胞仪检测28例SLE患者(其中活动组18例)及22名正常对照组的外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg的百分比,同时评估SLE疾病活动指数(SLEDAI)及检测血抗dsDNA水平,分析相关性。结果SLE患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg占CD4^+ T细胞的百分比较对照组降低(P<0.05),以活动组尤为明显,CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg的百分比与SLEDAI呈明显的负相关(P<0.01),同时显示血抗dsDNA阳性组较阴性组患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg的百分比显著下降(P<0.01)。结论SLE患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg的百分比在活动期下降为明显,其在SLE的发病机制中可能起到重要的作用。
- 马纪林蔡龙施华萍王璞于健宁陶筱娟郑颂国
- 关键词：T淋巴细胞CD4^+CD25^+T细胞FOXP3
- mRNA定量法检测结核分枝杆菌药物敏感性的应用评价被引量：6
- 2008年
- 目的评价应用mRNA定量法进行结核分枝杆菌利福平、异烟肼药物敏感性分析的临床应用价值。方法应用定量聚合酶链反应(PCR)方法检测三株结核分枝杆菌标准株在利福平、异烟肼处理24小时后85B mRNA表达水平的变化;并以不同的结果判断标准,比较本方法和绝对浓度法对87株临床分离菌株利福平、异烟肼药敏试验检测结果的差异性。结果利福平或异烟肼敏感株在相应的药物处理24小时后85B mRNA表达水平明显下降,分别为无药对照的0.01%和0.35%以下,而耐药株无明显变化。以85B mRNA的表达水平下降到无药对照的1%以下为敏感,大于10%为耐药,1%～10%之间为可疑进行判断,本方法与绝对浓度法有一致的检测结果。结论85B mRNA可以作为结核分枝杆菌药物敏感性试验的分子标志,应用85B mRNA检测结核分枝杆菌的耐药性是一种快速有效的检测方法。
- 蔡龙施华萍马纪林程建玲张艳
- 关键词：结核分枝杆菌信使核糖核酸逆转录聚合酶链反应药敏试验
- Foxp3+CD4+CD25+T细胞在狼疮性肾炎的发病机制研究
- 马纪林陶筱娟郑颂国蔡龙于健宁程军王璞陈立红施华萍
- 该项目分别通过动物实验和临床研究来阐明Treg在狼疮性肾炎中的作用机制。在动物实验中，课题组选择采用MRL/lpr狼疮小鼠为研究对象。MRL/lpr小鼠24只，按周龄分为未发病组(4w)轻度病变组(12w)重度病变组(2...
- 关键词：
- 关键词：狼疮性肾炎发病机制T细胞免疫治疗
- 采用逆转录PCR技术检测结核分支杆菌耐药性的研究
- 蔡龙陶筱娟程建玲施华萍张艳于健宁马纪林
- 1、最佳培养时间为24小时，异烟肼培养基药物浓度为1ug/ml，利福平培养基药物浓度为4ug/ml。2、结果判断标准：85BmRNA的表达水平与无药对照管相比，小于1%为敏感，大于10%为耐药；介于1-10%之间的为可疑...
- 关键词：
- 关键词：结核分支杆菌耐药性
- 初发系统性红斑狼疮患者调节性T细胞和Th17细胞的检测及意义被引量：2
- 2013年
- 目的观察初发系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)和Th1 7细胞的变化,探讨其临床意义。方法检测15例初发SLE患者(活动组1 1例,非活动组5例)及10例健康对照者(对照组)的外周血CD4^+CD25^(high)Treg、Th17细胞占CD4^+的比例,分析两种细胞的比率与疾病活动指数(SLEDAI)的相关性。结果初发SLE患者外周血CD4^+CD25^(high)Treg和Th17细胞的比例与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),与SLEDAI无相关性(均P>0.05)。CD4^+CD25^(high)T细胞与Th17细胞的比率在活动组患者下降尤为明显(P<0.05),且与SLEDAI呈明显的负相关(P<0.05)。结论初发的活动性SLE患者外周血Treg与Th17细胞的比率明显下降,并与疾病活动密切相关,两群细胞的失衡可能在SLE发病机制中起重要的作用。
- 马纪林刘小贤汪卫郑红霞蔡龙施华萍周红娟于健宁
- 关键词：红斑狼疮调节性T细胞TH17细胞
- 全反式维甲酸促进调节性T细胞诱导和抑制Th17细胞分化的机制研究
- 马纪林郑颂国于健宁刘小贤施华萍
- 立项背景：调节性T细胞（Treg）是一群具有免疫抑制功能和维持机体免疫稳定的CD4+T细胞亚群，而Th17细胞是能产生促进炎症细胞因子IL-17A的细胞，两群细胞间的失衡在自身免疫病的发展和重症感染中发挥重要的作用。全反...
- 关键词：
- 关键词：重症脓毒症
