朱晓娟
- 作品数：3 被引量：25H指数：2
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- 红景天苷通过Wnt/β-catenin信号通路影响小鼠骨髓间充质干细胞向神经元细胞定向分化
- 目的:红景天苷作为红景天的有效成分,具有较强的神经保护和抗氧化的功能。本研究利用红景天苷诱导小鼠MSCs,探讨红景天苷对MSCs分化为神经细胞的影响及Wnt/β-catenin信号的作用机制,揭示红景天苷促进干细胞向神经...
- 朱晓娟
- 关键词：红景天苷骨髓间充质干细胞神经元细胞定向分化信号通路
- 文献传递
- 红景天苷通过Wnt/β-catenin信号通路影响小鼠骨髓间充质干细胞向神经元细胞定向分化被引量：8
- 2012年
- 目的:以小鼠骨髓间充质干细胞系D1细胞为研究对象,探讨Wnt/β-catenin信号通路介导的红景天苷诱导D1细胞向神经细胞的定向分化。方法:实验分为对照组(D/F12完全培养基)和红景天苷诱导组(100μg/mL+D/F12完全培养基).将细胞分别诱导12、24、48和72 h后,采用细胞免疫荧光化学染色方法检测β-catenin和Gsk-3β的阳性细胞率。利用红景天苷分别诱导MSCs 1,2,8,12,24,48和72 h后,利用实时PCR技术检测Wnt/β-catenin信号通路的关键信号分子wnt3a、Axin2、Lrp6和Gsk-3βmRNA的表达;采用Westernblot方法分析D1细胞诱导12、24、48和72 h后,β-catenin和Gsk-3β蛋白的表达;运用Wnt/β-catenin信号通路特异性阻断剂DKK1阻断Wnt/β-catenin信号通路,Western blot方法分析红景天苷对β-catenin和NSE蛋白表达的影响。结果:红景天苷诱导24 h时β-catenin的阳性率可达55.76%,与其他组和对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01),诱导24 h后Gsk-3β的阳性率与其他时间和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实时PCR检测结果显示,红景天苷诱导MSCs不同时间能促进Wnt/β-catenin信号通路中关键信号分子Wnt3a、Ax-in2、Lrp6和Gsk-3βmRNA的表达,诱导不同时间Wnt3a、Axin2、Lrp6和Gsk-3βmRNA的表达不尽相同。Westernblot结果表明,红景天苷诱导D1细胞12 h和24 h时β-catenin蛋白的表达明显上调,且与其他组比较差异具有统计学意义(P<0.05);随着作用时间的延长,Gsk-3β蛋白的表达增加且差异具有统计学意义(P<0.05),阻断Wnt/β-catenin信号通路后,β-catenin和NSE蛋白的表达水平明显下调。结论:红景天苷能诱导D1细胞定向分化为神经元样细胞,红景天苷通过激活Wnt/β-catenin信号通路实现其诱导MSCs向神经细胞定向分化。
- 朱晓娟耿排力赵红斌张全伟陈亚男白洁
- 关键词：红景天苷Β-CATENIN信号通路神经元细胞
- 红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的机制研究被引量：17
- 2013年
- 探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)和PI3K/AKT/mTOR信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞定向分化中的作用。以小鼠BMSCs细胞系(D1细胞)为研究对象,实验分为对照组和红景天苷诱导组。红景天苷(5、25、50、100和200μg.mL 1)作用于细胞24 h和红景天苷(100μg.mL 1)作用细胞0.5、1、3、6、9、12、24、48和72 h。采用细胞免疫荧光染色方法、实时定量PCR(real-time PCR)和Western blotting技术分别检测细胞NSE、MAP2、β-Tubulin III、NES和GFAP的阳性率和β-Tubulin III、NSE、ERK1/2和AKT的表达;PD98059和LY294002分别阻断ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路后,检测ERK1/2和NSE的表达。结果表明,随着红景天苷诱导时间的延长,NSE、MAP2、NES、β-Tubulin III和GFAP的阳性率明显增加,NSE和β-Tubulin III蛋白的表达显著上调(P<0.01)。随着红景天苷水平和作用时间的增加,ERK1/2、AKT mRNA和蛋白的表达明显上调;PD98059和LY294002分别阻断EKR1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路后,显著抑制红景天苷促进NSE、NES和β-TubulinIII mRNA和NSE蛋白表达。结果提示,红景天苷通过激活ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进BMSCs向神经细胞定向分化。
- 陈亚男刘辉赵红斌刘阳白洁朱晓娟王玉
- 关键词：红景天苷骨髓间充质干细胞信号通路
