李亚南
- 作品数：58 被引量：131H指数：7
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- 人血清中A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 目的建立人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖Ig G抗体含量的ELISA定量检测方法,并进行验证。方法筛选适用的酶标板,优化抗原包被浓度,确定ELISA检测过程的关键条件,对建立的ELISA方法的特异性、线性、准确性、精密度、最低检测值和稳定性进行验证,并建立实验室质控血清的质控检测范围。结果酶标板的板内CV为9.8%,板间CV为16.4%,符合检测使用要求。免疫血清经多糖吸收后,群特异性抗体含量与同群多糖吸收剂量呈明显的剂量依赖关系。12份美国CDC质控血清中各群Ig G抗体含量与血清的稀释度呈负相关,相关系数（r）和斜率（slope）均接近-1,线性关系良好;检测结果与CDC公布数据一致性良好,一致性相关系数A、C、W135、Y群分别为0.912 5、0.939 6、0.963 7和0.920 6,准确度较好。实验室内部质控血清Men20中各群Ig G抗体含量试验内和试验间精密度分别小于10%和20%,精密度较好;各血清群别的CV值均〈30%,稳定性较好;A、C、Y、W135群多糖Ig G抗体含量最低检测值分别为0.092、0.118、0.067和0.035μg/ml,质控血清的检测范围分别为：92.49~36.53、37.29~17.69、66.18~25.54和50.15~23.31μg/ml。结论建立了标准化的检测人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖Ig G抗体含量的定量ELISA方法,并确定了实验室日常用质控血清Men20的质控检测值范围。
- 王欣茹赵志强李亚南刘方蕾于旭博孔素娟范锋锋林纪胜叶强谢贵林
- 关键词：脑膜炎球菌荚膜多糖酶联免疫吸附试验
- AC群脑膜炎球菌与b型流感嗜血杆菌联合疫苗多糖含量免疫速率比浊检测方法的建立及验证被引量：3
- 2017年
- 目的建立AC群脑膜炎球菌与b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)联合疫苗(Men AC-Hib)多糖含量免疫速率比浊检测方法,并进行验证。方法采用免疫速率比浊法测定联合疫苗中A群、C群脑膜炎球菌及Hib多糖含量,绘制不同多糖抗原含量的标准曲线,并对方法的检测低限、精密度、准确度和特异性进行验证。结果 3种不同多糖抗原浓度在2~8μg/ml之间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.98;建立的方法检测A群、C群脑膜炎球菌和Hib多糖的检测低限分别为0.847、0.043和0.507μg/ml;检测各组分多糖抗原含量的批内和批间变异系数均小于5%,平均回收率在88.30~104.40%之间;各组分特异性多糖抗体仅与各自多糖抗原反应,且各组分多糖抗原共同存在时无相互干扰。结论成功建立了准确、特异的AC群脑膜炎球菌与Hib联合疫苗的多糖含量检测方法。
- 李亚南朱向国毛琦琦陈苏京赵丹王珊珊徐颖华叶强李茂光
- 关键词：A群脑膜炎球菌C群脑膜炎球菌B型流感嗜血杆菌多糖含量
- A群C群脑膜炎球菌结合疫苗上市后免疫学效果观察
- 目的：考核和评价A群C群脑膜炎球菌结合疫苗大规模使用的免疫原性.方法：将6月龄～3 周岁的婴幼儿分成6～23月龄、24～35月龄两组,两组分别接种两针和1针,于接种前、接种后1月和1年采 血,测定血清中A群、C群流脑抗体...
- 李亚南莫少军梁丽周富昌农艺唐静杜宗利叶强
- 关键词：流脑结合疫苗免疫原性
- A群C群脑膜炎球菌结合疫苗的免疫效果被引量：10
- 2014年
- 目的 观察A群C群脑膜炎球菌结合疫苗对6～23月龄、24～35月龄婴幼儿的免疫原性和免疫持久性。方法 选择广西壮族自治区崇左市400名婴幼儿,其中6～23月龄和24～35月龄两个年龄段各200名,分别接种A群C群脑膜炎球菌结合疫苗2剂和1剂。分别于免疫前、全程免疫后1个月、1年采血,血清体外杀菌试验（serum bactericidal assay,SBA）检测血清抗体水平,评价其免疫原性和免疫持久性。结果 免后1个月和1年,两个年龄组婴幼儿A群、C群抗体阳性率和GMT均较免疫前显著提高（P均＆lt;0.001）;免后1年,两个年龄组婴幼儿A群、C群抗体GMT低于免后1个月,但仍高于免前;免后1个月和1年,24～35月龄组婴幼儿A群、C群抗体GMT和增长倍数均但,仍高于免前高于6～23月龄组;两个年龄组龄婴幼儿易感者和非易感者A群、C群抗体阳性率和GMT均显著提高。结论A群C群脑膜炎球菌结合疫苗对6～35月龄婴幼儿具有良好的免疫原性和免疫持久性。
- 李亚南莫少军周富昌梁丽农艺唐静杜宗利叶强
- 关键词：脑膜炎球菌结合疫苗免疫原性
- HPSEC-MALS法检测多糖并与Sepharose CL-4B法关联的方法
- HPSEC‑MALS法检测多糖并与Sepharose CL‑4B法关联的方法，利用高效分子排阻色谱柱，采用高效分子排阻色谱‑多角度激光散射仪(HPSEC‑MALS)方法，测定多糖分子大小及其分布，并将其转化为琼脂糖凝胶(...
- 李茂光李亚南毛琦琦陈苏京王春娥赵丹许美凤叶强
- 文献传递
- 我国ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗趋势分析及质量评价被引量：3
- 2015年
- ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗是我国于21世纪新研制的疫苗,用于预防由相应群脑膜炎球菌引起的疾病[1-2]。我国对疫苗实行批签发监管制度,2007年签发了第1批ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗,迄今为止,由2007年的1家企业至今已有5家企业获得了生产文号,共签发近500批制品约4 000万人份。仅2013年,该疫苗批签发85批次,共计7 484 833人份。
- 唐静李亚南赵丹李茂光李红梁丽叶强陈翠萍
- 高效阴离子交换色谱-脉冲安培法检测A、C、Y和W135群脑膜炎球菌多糖含量
- 2018年
- 目的用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定A、C、Y和W135群脑膜炎球菌多糖含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法采用Carbo Pac~?PA-1 4×250 mm分析柱与Aminotrap 4×50 mm保护柱;使用氢氧化钠/醋酸钠梯度洗脱,以多糖抗原标准溶液质量浓度为横坐标,其相应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,并对建立的方法进行专属性、精密度和准确性验证;同时与传统方法的检测结果进行比较分析。结果 A、C、Y和W135群脑膜炎球菌多糖质量浓度在0.5～27.0μg/m L范围内与峰面积均具有良好线性关系,r=0.999。该方法专属性高,分析结果重复性良好,RSD均<5%;回收率均在95%～105%范围内;与传统的火箭免疫电泳法相比,检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HPAEC-PAD准确、可靠,重复性好,可用于检测脑膜炎球菌多糖原液及疫苗成品中的多糖含量。
- 李亚南赵丹徐颖华毛琦琦陈苏京李茂光叶强
- 关键词：脉冲安培检测器
- 8、10A、11A及15B型肺炎链球菌荚膜多糖血清IgG抗体定量ELISA检测方法的验证被引量：3
- 2017年
- 目的对8、10A、11A及15B型肺炎链球菌荚膜多糖血清Ig G抗体定量ELISA检测方法进行验证。方法以第二代国际参考血清007sp为标准,检测国际参考血清89SF的8、10A、11A及15B型Ig G抗体值,绘制标准曲线,确定检测范围、线性(R^2)及最低检测限;以第二代国际参考血清007sp为标准,测定肺炎国际质控血清盘(12/278)共12份血清的各型抗体水平3次,以第一代国际参考血清89SF为标准,测定第二代国际参考血清007sp的各型抗体水平10次,计算回收率;连续测定质控血清2009S、QC5、QC6及第二代国际参考血清007sp的各型Ig G抗体各10次,计算变异系数(CV);利用质控血清920进行抑制试验,验证方法的特异性。结果国际参考血清89SF的8、10A、11A及15B型Ig G抗体的最低检测限分别为0.58、0.85、0.46及0.67 ng/ml,检测范围分别为0.15~35.60、0.13~32.50、0.05~12.70及0.17~42.40 ng/ml,线性R^2均>0.99;除10A型的准确度较低外(46.15%),8、11A及15B型均较高(分别为76.92%、84.62%及84.62%);连续10次测定质控血清2009S、QC5、QC6及国际参考血清007sp各型Ig G抗体的CV值为6.44%~18.19%;多糖抗原与血清抗体的反应具有特异性。结论该方法具有良好的准确性、精密性及特异性,可用于肺炎球菌疫苗临床血清的检测。
- 李红李亚南石刚陈琼王春娥唐静陈翠萍叶强
- 关键词：肺炎链球菌荚膜多糖血清抗体酶联免疫吸附试验
- 高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗的多糖含量被引量：6
- 2013年
- 目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(high performance anion exchange chromatography withpulsed amperometric detector,HPAEC-PAD)测定b型流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗的多聚磷酸核糖基核糖醇(polyribosylribitol phosphate,PRP)多糖含量。方法用终浓度为0.3 N的NaOH溶液将待测疫苗中的PRP多糖或分离得到的游离多糖在室温下振荡水解(16±8)h,采用CarboPac誖PA-10阴离子交换柱在NaOH/醋酸钠溶液梯度洗脱条件下分离水解产物,用脉冲安培检测器检测信号,根据样品的峰面积计算得到待测疫苗中的PRP多糖含量及游离多糖含量,样品均重复检测2次,计算2次检测结果的相对标准偏差(RSD)。同时采用《中国药典》三部(2010版)附录ⅧJ中的地衣酚法测定相同批次样品的PRP多糖含量及游离多糖含量,并对两种方法得到的结果进行比较。结果相同样品重复检测2次,结果间的差异非常小,RSD不超过4.6%。HPAEC-PAD法测得的总PRP结果与地衣酚法测得的结果接近,前者测得的S01～S03样品的PRP浓度值分别为后者的105%、104%和106%;HPAEC-PAD法测得的游离PRP结果与地衣酚法测得的结果差别较大,前者测得的S01～S03样品的游离PRP浓度值分别为后者的126%、109%和115%。结论 HPAEC-PAD法测定Hib结合疫苗的PRP多糖含量灵敏度高,重复性和分离效果好,样品不需要衍生处理,可同时测定多组分,可作为传统地衣酚法的替代方法用于Hib结合疫苗中多糖含量的测定。
- 贺鹏飞唐静李亚南李茂光叶强
- 关键词：阴离子交换色谱脉冲安培检测B型流感嗜血杆菌结合疫苗多糖
- b型流感嗜血杆菌荚膜多糖定量~1H-NMR法的建立及验证被引量：2
- 2019年
- 目的建立测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖绝对含量的定量1H核磁共振法(nuclear magnetic resonance,NMR,即1H-NMR法),并进行验证。方法精密称取Hib荚膜多糖粉末,重水溶解,配制一定浓度的供试品多糖溶液;采用Bruker Avance-600型超导核磁共振波谱仪,设置NMR实验参数条件,以重水为溶剂,二甲基砜为内标物建立定量1H-NMR法进行多糖含量测定;对该方法进行专属性、准确度、线性、精密度及耐用性验证;应用建立的定量1H-NMR法及化学法测定5批Hib荚膜多糖含量。结果经1H-NMR谱、13C-NMR谱、1H-1H COSY谱及1H-13C HSQC谱归属显示,Hib荚膜多糖的定量峰(δH5. 06)及内标物二甲基砜的定量峰(δH3. 14)分离良好,互不干扰,且不受样品内其他谱峰的干扰,方法专属性良好;供试品溶液加入100、150及200μL国际标准品,加标回收率在101%~102%;Hib多糖质量浓度在1~20 mg/mL范围,线性方程为y=0. 234 3 x-0. 002 6(R2=1. 000 0);供试品溶液6次重复性及中间精密度测定的定量峰积分面积比值的RSD分别为0. 78%及0. 60%,精密度良好;5 mg/mL的供试品溶液在不同脉冲角度及不同延迟时间定量峰积分面积比的RSD分别为0. 07%及0. 13%,耐用性良好。5批荚膜多糖经定量1H-NMR法及化学法检测,核糖含量均在《中国药典》三部(2015版)规定合格范围内(320~410 mg/g)。结论成功建立了测定Hib荚膜多糖含量的定量1H-NMR法,该方法具有良好的专属性、准确度、线性、精密度及耐用性,为Hib疫苗的质量控制研究奠定了基础。
- 许美凤毛琦琦赵丹陈苏京李亚南李茂光叶强
- 关键词：B型流感嗜血杆菌荚膜多糖
