李建宁
- 作品数:49 被引量:84H指数:4
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- Bcl-2、Bax、Insulin在高脂诱导C57BL/6J小鼠胰岛损伤中的表达被引量:2
- 2018年
- 目的探讨细胞凋亡因子在高脂引起的小鼠胰岛损伤中的表达。方法雄性C57BL/6J小鼠分高脂饮食组(HFD)和低脂饮食对照组(LFD),每组6只,喂养12周时尾部取血进行葡萄糖耐量实验(GTT)及胰岛素耐量实验(ITT)检测胰岛功能。持续喂养至20周时处死取胰腺组织用于透射电镜,苏木素-伊红(haematoxylineosin,HE)染色观察胰岛形态;免疫组化(immunohistochemical,IHC)检测Bcl-2、Bax及Insulin蛋白表达水平。结果喂养12周后,小鼠GTT和ITT显示,HFD组小鼠葡萄糖负荷时的血糖水平高于LFD组(P<0.05)。注射胰岛素后,HFD组小鼠血糖下降缓慢且血糖水平仍较LFD组高(P<0.05)。HE结果显示HFD组小鼠胰岛数量和体积较LFD组减少,形态损伤严重。电镜下观察HFD组胰岛β细胞超微结构受损较LFD组严重,HFD组β细胞形态不规则,细胞核固缩,染色质边集,有大量电子密度较小的脂滴堆积,其中胰岛细胞胞浆内胰岛素分泌颗粒减少。免疫组化的结果显示:HFD组Bcl-2表达低于低脂组,同时HFD组Bax表达高于LFD组,而HFD组胰岛中的Insulin表达低于LFD组(P<0.01)。结论高脂导致C57BL/6J小鼠胰岛细胞结构功能损伤,影响胰岛素的合成与分泌,并且增加细胞凋亡。Bcl-2及Bax在胰岛细胞凋亡中起一定的作用,并可能与高脂饮食有关。
- 马立荣马立荣栾延松李建宁宋辉杨怡
- 关键词:高脂胰岛损伤胰岛素
- 慢性低氧及枸杞多糖干预对大鼠生理指标和血浆IL-2、IL-6及IgG含量的影响被引量:4
- 2015年
- 目的观察慢性低氧和枸杞多糖干预对大鼠生理指标及免疫因子的影响。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧组和低氧/枸杞多糖组。低氧处理为常压低氧舱,氧浓度设定为10.0%;枸杞多糖干预为200mg·(kg·d)-1。各种干预均持续4周。结果与对照组比较,低氧和低氧/枸杞多糖组从实验第2周开始体重明显下降(P<0.05或<0.01);低氧组血红蛋白含量高于对照组(P<0.01),低氧/枸杞多糖组血红蛋白含量低于低氧组(P<0.05);低氧组血浆Ig G、IL-2含量明显低于对照组(P<0.01),IL-6含量高于对照组(P<0.01);低氧/枸杞多糖组血浆Ig G、IL-2含量高于低氧组(P<0.05或<0.01),IL-6含量低于低氧组(P<0.01)。三组间红细胞、白细胞、血小板差异均无统计学意义(P>0.05)。结论枸杞多糖能够改善低氧大鼠的基本状况,调节其免疫功能。
- 关文霞仝雪霞任飞李建宁郑西卫李芳
- 关键词:低氧枸杞多糖生理指标免疫因子
- 慢病毒介导的犬WRD细胞p53基因沉默及稳定感染细胞系的建立被引量:2
- 2014年
- 目的构建靶向犬p53基因慢病毒干扰载体,建立稳定沉默p53基因的WRD/p53-细胞系。方法设计并构建4条针对犬p53基因的特异性shRNA干扰质粒。将构建的慢病毒表达载体(p GMLV-p53)和包装质粒(packaging mix)组成的包装系统共转染293T细胞,包装病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,并测定滴度。包装好的慢病毒感染WRD细胞,Western blot和实时荧光定量PCR方法检测不同靶点RNA干扰载体对p53基因的干扰效果,确定有效靶点。针对有效靶点慢病毒颗粒以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染WRD细胞,puromycin抗生素筛选稳定感染细胞系WRD/p53-。结果结果显示p53 RNAi慢病毒载体构建成功,成功包装四种不同靶点的p53基因RNA干扰慢病毒,病毒滴度均达到1×109TU/ml。四种干扰载体慢病毒均具有较好的干扰效果,选用沉默效果最好的p GMLV-p53A1为最优靶点,成功建立p53 RNAi慢病毒载体稳定感染细胞系WRD/p53-。结论成功构建p53 RNAi慢病毒载体,并有效干扰WRD细胞中p53 mRNA和蛋白表达,同时成功筛选并建立p53RNAi慢病毒稳定感染WRD/p53-细胞系。
- 李芳闫琰张茜李建宁姚青高玉婧杨怡孙玉宁
- 关键词:P53慢病毒载体P53
- CCI大鼠坐骨神经损伤区内中终球与重链神经微丝蛋白的检测
- 2012年
- 为探寻CCI大鼠坐骨神经损伤区内终球的存在,了解其与重链神经微丝蛋白(heavy neurofilaments,NF-H)分布、表达的联系.通过对雄性SD大鼠的坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)组与对照组(对侧正常坐骨神经)进行不同时间点电镜、免疫组化及Western-blotting等方法的观察与检测.研究发现,与对照组相比,CCI模型组大鼠术后4 d损伤坐骨神经中NF的分布较非手术侧有明显变化,术后7、14 d电镜观察到损伤区中枢侧终球样结构,术后4、7、14、28 d CCI模型组大鼠坐骨神经中NF-H表达水平有动态变化(P<0.01).结果表明CCI大鼠模型损伤坐骨神经中NF-H其分布有明显变化,且分布于终球样结构中,其表达随损伤时间有动态变化,这些变化可能参与终球的形成以及与病理性疼痛机制相关联.
- 李建宁巨文峰钱召强刘一辉任维
- 关键词:慢性压迫损伤
- BK、SK通道参与慢性损伤坐骨神经异常自发放电节律的调控被引量:3
- 2014年
- 通过运用相对特异的钙激活钾通道阻断剂蝎毒和蜂毒明肽分别阻断BK和SK通道,观察对损伤神经自发放电模式的影响,并将其与非特异性钾通道阻断剂四乙基铵的作用进行比较,以揭示参与调节放电节律的钙激活钾离子通道的亚型.结果显示,蝎毒和蜂毒明肽均可以使放电节律呈现分岔转迁.这些结果提示在坐骨神经的损伤区表达有BK与SK通道,并可能参与调控损伤区神经纤维的自发放电.
- 路美玲李建宁魏春玲刘一辉任维
- 关键词:自发放电钙激活钾通道
- 核辐射致小鼠急性肾损伤模型的建立及损伤机制的探讨
- 2024年
- 目的:建立核辐射致小鼠急性肾损伤的模型,利用代谢组学探讨其发病机制。方法:选取C57小鼠18只分对照组和模型组,模型组行15Gy照射辐照6 h、24 h取材。结果:(1)模型组体重下降、肾脏指数增高、血尿素氮及尿微量白蛋白提高,与对照组相比差异均有统计学意义;(2)病理显示辐照后肾组织皮髓质分界不清,伴不同程度的肾小管扩张;(3)代谢组学筛出差异代谢物,并与铁死亡、谷胱甘肽代谢等通路相关。结论:15Gy辐照6 h、24 h可诱导急性肾损伤,并发现与铁死亡相关的代谢物变化。
- 李燕辰李建宁李峰生涂晓文
- 关键词:核辐射急性肾损伤代谢组学
- 一种人呼吸道博卡病毒半巢式PCR检测试剂盒及其非诊断性检测方法
- 本发明公开了一种人呼吸道博卡病毒半巢式PCR检测试剂盒及其非诊断性检测方法。该试剂盒包括:1)病毒保护液,其成份为青霉素200U/ml、链霉素200U/ml、两性霉素B200U/ml和BSA0.125%;2)病毒裂解液,...
- 孙玉宁姚青李建宁张茜杨怡高玉婧
- 文献传递
- 博卡病毒属基因组特征与致病的分子机制被引量:15
- 2013年
- 博卡病毒是细小病毒科细小病毒亚科的成员之一。目前已知博卡病毒成员有牛博卡病毒、犬博卡病毒、人博卡病毒、以及新鉴定的猪博卡病毒,猩猩、猫、犬以及加利福尼亚海狮体内发现的新博卡病毒成员。作为新发病原,博卡病毒成为各国科研人员的研究热点。本文结合前人的文献和我们近期的研究成果,对博卡病毒的家族成员分类、基因组结构与复制、临床致病特点、致病分子机制等方面进行了阐述,为广大科研人员对博卡病毒的研究提供一定的帮助。
- 李建宁姚青孙玉宁
- 关键词:博卡病毒细小病毒
- 论文式实验报告在生物化学实验教学中的应用被引量:7
- 2011年
- 通过对学生实验报告采用论文式的书写方式,激发学生进行生物化学实验的兴趣,提高生物化学实验教学的质量。方法学生分为对照组和实验组,对照组学生按常规的要求书写实验报告,实验组学生按论文的格式书写实验报告。实验结束后对两组学生进行考试。结果:实验组学生的实验报告成绩和实验考试成绩均较对照组有显著提高。结论:论文式实验报告的书写可以增强学生参与实验研究的兴趣,提高生物化学实验的教学质量。
- 姚青张继荣李燕李建宁张茜赵薇裴秀英
- 关键词:生物化学教学
- p53抑制剂PFT-α对犬博卡病毒感染致靶细胞病变的影响
- 2015年
- 目的探讨p53抑制剂(pifithrin alpha,PFT-α)对犬博卡病毒(minute virus of Canine,MVC)感染致WRD细胞(walter reed canine,WRD)病变的影响。方法首先MVC感染WRD细胞72h后,DAPI染色并观察靶细胞的形态学变化;给予不同浓度梯度的PFT-α处理WRD细胞,MTS法检测PFT-α对WRD细胞的毒性作用,以确定PFT-α的安全使用剂量;利用安全剂量的PFT-α分别采取提前(MVC感染前1h)或同时与病毒感染靶细胞,MTS试剂法检测PFT-α加入的不同方式对博卡病毒MVC感染致靶细胞病变的影响;以不同MVC感染复数(multiplicity of infection,MOI)处理WRD细胞,观察PFT-α在安全剂量和最佳处理方式作用下对MVC感染致靶细胞WRD病变的影响。结果 MVC感染致WRD细胞发生明显的凋亡等病理性改变;20μmol·L-1的PFT-α浓度是WRD细胞的安全使用剂量;安全剂量的PFT-α加入能够明显提高受感染细胞的细胞活力,与对应感染组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 PFT-α能够降低犬博卡病毒感染致WRD细胞病变的程度。
- 张薇何丽萍李建宁孙玉宁
- 关键词:博卡病毒细胞病变