李景鹏
- 作品数：133 被引量：806H指数：14
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省科技攻关计划黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 衰变加速因子结构基因及调控被引量：1
- 1998年
- 衰变加速因子DAF是补体激活调节剂(RCA)家族中重要成员之一,在体内的存在形式有3种:分泌型DAF、跨膜型DAF和GPI锚链型DAF。DAF的分子结构、基因结构、合成及基因表达调控等方面的进展近年颇为迅速。DAF分子的研究,使人们了解了在细胞表面控制补体活性的分子基础。DAF基因克隆表达及转基因动物研制成功,为DAF的研究和应用开辟了广阔的前景。
- 李景鹏何成强
- 关键词：衰变加速因子基因表达基因调控糖蛋白
- 全文增补中
- 南、北五味子ISSR鉴别研究被引量：49
- 2003年
- 目的 :为准确鉴别南五味子和北五味子寻找一种新的鉴别手段。方法 :采用ISSR(InterSimpleSequenceRepeats)技术对南、北五味子基因组DNA进行PCR扩增。结果 :9个ISSR引物中有 3个扩增出多态性好的条带 ,根据其琼脂糖凝胶电泳上显示的DNA带型差异可迅速区分南、北五味子。结论 :ISSR技术是在分子水平上鉴别南、北五味子的一种行之有效的方法。
- 孙岳李景鹏金元昌矫洪涛
- 关键词：南五味子北五味子ISSR基因组DNAPCR扩增
- 耐草甘膦菜豆耐性酶学机理的研究被引量：5
- 2000年
- 感性、耐性菜豆从萌芽到 2 4 d的 EPSP合成酶比活性是不同的 ,但变化规律相似。出苗时比活性较高 ,10 d时降至最低点 ,随后上升 ,16 d时达到最高点 ,然后缓慢下降 ;两种菜豆在生长的同一天酶比活性差异小 ,最大倍数仅为 1.1;用草甘膦处理两种三出复叶时的菜豆 1d后酶比活性上升 15%～ 2 5%。实验测定了经 4步纯化 ,比活性达 6 2 19.4nmol· min-1· mg-1蛋白以上的两种菜豆 EPSP合成酶的一些酶学性质。 PEP是酶的最适底物 ,感性、耐性 K m(PEP)分别为 3.5和 7.1μmol· L-1,两者相差 2倍 ;亲和力 Ki(草甘膦 )分别是 6 .2和 16 .7μmol· L-1,两者相差 2 .7倍。两种菜豆对草甘膦耐性不同的酶学机理在于耐性菜豆的 EPSP合成酶与草甘膦的亲和力小 ,与酶底物亲和力大 ;而感性菜豆 EPSP酶则与草甘膦的亲和力大 ,与其底物亲和力小。
- 向文胜陶波王相晶王萍李景鹏苏少泉张文吉
- 关键词：菜豆EPSP耐性机理草甘膦
- 鲁西黄牛α干扰素基因的原核表达及其抗血清的制备
- 2009年
- 采用PCR方法从鲁西黄牛基因组DNA中克隆了α干扰素(BoIFN-α)基因,并插入到pET32a+中,构建成重组原核表达质粒pET32a+/BoIFN-α,进行测序和诱导表达。测序结果表明,鲁西黄牛IFN-α基因全长498个核苷酸,含1个开放阅读框(ORF),编码166个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的牛α干扰素C亚型氨基酸组成同源性为97.6%。表达产物经SDS-PAGE分析,表达出40 ku的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的26.7%。表达产物经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化,纯化产物进行复性后免疫昆明系小鼠2次,制备高滴度的牛IFN-α抗血清。结果从鲁西黄牛中克隆了IFN-α基因的一种新亚型,即BoIFN-αC2,实现了高效表达和纯化,并制备了鼠抗牛IFN-α,为重组牛干扰素的开发奠定了基础。
- 张永红王长法李景鹏
- 关键词：黄牛抗血清
- 植物几丁质酶的研究进展被引量：14
- 2001年
- 韩放李景鹏
- 关键词：真菌病害植物几丁质酶抗真菌活性基因工程
- 牛MC1R基因——新的SNP被引量：2
- 2007年
- 本实验克隆测序了中国荷斯坦牛、鲁西黄牛和渤海黑牛三个品种的MC1R基因。运用Blastn工具对本实验得到的序列及所有发表的牛MC1R基因序列进行比对分析,发现牛MC1R基因编码区725bp处存在一新的单核苷酸多态性(SNP)。基于此SNP我们对现发表的所有牛MC1R基因做了总结。
- 甘海云张秀红李景鹏
- 关键词：SNP中国荷斯坦牛鲁西黄牛渤海黑牛
- 同源重组法构建枯草芽孢杆菌224 yugS基因缺失突变株被引量：6
- 2007年
- 从枯草芽孢杆菌224的基因组DNA中分别扩增出溶血样基因yugS的上、下游片段,并利用携带新霉素抗性基因(neor)的重组质粒pMD18-T-neo作为骨架,构建了基于yugS基因位点的基因阻断质粒pMD18-T-neo-yugS,线性化后电转化入枯草杆菌224,从新霉素抗性平板上挑取转化子,通过对基因组的PCR鉴定和核苷酸测序证明,确定转化子yugS156为yugS基因缺失突变株。
- 刘杰房春红李琬矫洪涛喻江李景鹏
- 关键词：同源重组
- 应用聚合酶链反应技术检测沙门氏菌被引量：3
- 1998年
- 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测沙门氏菌，使用了２对引物ＨＩ和ｐｈｏＰ。ＨＩ引物对各长２０ＮＴ，根据鞭毛Ｉ相抗原基因自行设计，扩增序列长２６９ｂｐ；ｐｈｏＰ引物对各长２１ＮＴ，根据ｐｈｏＰ／ｐｈｏＱ基因设计，扩增片段长２９９ｂｐ。ＰＣＲ采用５０μＬ反应体系。ｄＮＴＰＳ各１００μｍｏｌ／Ｌ，引物各１μｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ２＋２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，酶２Ｕ。三温段ＰＣＲ循环条件为：９７℃预变性７ｍｉｎ；９４℃变性６０ｓ、５５℃复性４０ｓ、７２℃延伸６０ｓ，３５个循环；７２℃延伸７ｍｉｎ。检测８株标准阳性菌，结果都出现了ＨＩ引物和ｐｈｏＰ引物特异带，标准阴性菌３株只出现ｐｈｏＰ特异带，说明ＨＩ引物特异性很强。
- 李景鹏李成梅虞塞明何成强丁乃峥吴丹
- 关键词：聚合酶链反应沙门氏菌PCR兽医诊断学
- 猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NS1基因的克隆与原核表达被引量：6
- 2003年
- 根据猪细小病毒 (porcineparvovirus ,PPV)NADL 2株非结构蛋白基因NS1序列设计引物 ,扩增出了PPVSY 99株的NS1基因 ,将其克隆到原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组质粒SYNS1/pET2 8a。将SYNS1/pET2 8a转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,经IPTG诱导 ,使PPVNS1基因获得了表达 ,运用ELISA和Westernblotting证实了表达产物的特异性。经表达产物细胞定位分析 ,表达的NS1蛋白是以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变诱导时间或诱导剂IPTG的浓度 ,确定了表达NS1蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 .6mmol·L-1,诱导时间为 3h ,在大肠杆菌中最高表达含量为 17.8%。亲和层析后 ,得到了纯化的NS1蛋白 ,在Westernblotting检测中 ,纯化蛋白大大降低了反应背景。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂来检测PPV的发生 。
- 吴丹童光志仇华吉薛强周艳君李景鹏
- 关键词：细小病毒非结构蛋白原核表达
- GST-GnRH/TRS融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究被引量：2
- 2006年
- 以人工合成的促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)/转运肽(TRS)基因与表达载体pGEX-6p-1相连的重组子(pGE-G)作为研究对象,转化大肠杆菌BL21(ED3)plyS。本文对GST-GnRH/TRS/BL21(DE3)plyS工程菌的GST-GnRH/TRS重组产物进行了诱导表达和分离纯化的研究,结果表明,该工程菌用LB培养基在30℃扩增至OD590为0.6左右,加IPTG(终浓度为0.2 mmol/L)诱导3.5h,此时GST-GnRH/TRS的表达量可占菌体总蛋白的33.3%。重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中。工程菌经溶菌酶破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再用8 mL 1%(V/V)Triton X-100变性溶解IBs,离心取上清,进行Glutathione Sepharose 4B柱一步法亲和层析,得到了纯度较高的GST-GnRH/TRS融合蛋白,为进一步研究和实际应用奠定基础。
- 金元昌陈春岚苏晓艳李会东令玉林李景鹏
- 关键词：GNRH融合蛋白
