李芳
- 作品数：17 被引量：104H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 艾迪注射液及联合应用化疗药物抑制人卵巢癌细胞株A2780增殖的研究被引量：13
- 2005年
- 目的 :探讨艾迪注射液对人卵巢癌细胞株A2 780增殖的影响及与多种化疗药物的协同作用。方法 :采用MTT法测定艾迪注射液与 4种化疗药物单独及联用对A2 780细胞的增殖抑制作用 ,运用流式细胞仪测定艾迪注射液对A2 780细胞周期的影响及凋亡率。结果 :艾迪注射液可抑制A2 780细胞增殖 ,其抑制作用呈剂量和时间依赖性 ,并可诱导细胞凋亡。低浓度的艾迪注射液与化疗药物联用 ,可产生较强的抑制细胞增殖的作用。结论 :艾迪注射液具有直接抗肿瘤作用 ,对化疗药物协同作用的机制可能与其诱导细胞凋亡有关。
- 刘德艳李辅军王常玉黄磊李芳张萍卢运萍马丁
- 关键词：艾迪注射液卵巢肿瘤抗增殖
- 卵巢癌拓扑替康耐药细胞株的建立及其生物学特性被引量：4
- 2004年
- 目的 :建立卵巢癌拓扑替康 (TPT)耐药细胞株 ,研究其生物学特性。方法 :用浓度梯度递增法建立卵巢癌TPT耐药细胞株。用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测此耐药株对多种化疗药物的耐药指数 ;用细胞计数法描绘两株细胞的生长曲线并计算群体倍增时间 ;用流式细胞仪检测两株细胞的凋亡率及周期分布 ;荧光显微镜及透射电镜下观察亲本细胞、敏感细胞及耐药细胞的超微结构。结果 :历时 6个月建立了卵巢癌TPT耐药细胞株A2 780 /TPT。此细胞株对TPT及米托蒽醌 (MX)耐药 ,耐药指数分别为 2 5及 19,对喜树碱 (CPT)轻微耐药 ,耐药指数为 3,对其他多种化疗药物不交叉耐药。耐药细胞的生长速度比亲本细胞慢 (P <0 .0 5 ) ,且细胞凋亡率及G2 M期细胞比例较亲本细胞高 (P <0 .0 5 )。敏感细胞呈典型的凋亡形态特征 ,而耐药细胞凋亡核的数量明显减少 ,凋亡程度明显减轻 ,且仍有较多的细胞核形态正常。结论 :所建立的卵巢癌TPT耐药株具有耐药细胞的基本生物学特征 ,且该耐药模型稳定。
- 贾平李芳吴明富廖国宁卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤拓扑替康耐药细胞流式细胞术
- 卵巢癌趋化因子受体CXCR4的表达及意义被引量：13
- 2003年
- 目的 探讨趋化因子受体及配体CXCR4 /CXCL12 (SDF - 1)在上皮性卵巢癌细胞中的表达及在肿瘤转移中的作用。方法 采用RT -PCR和WesternB1ot对 15例上皮性卵巢癌组织、卵巢癌细胞系CAOV3中CXCR4和腹膜后淋巴结组织中SDF - 1在mRNA和蛋白水平的表达进行检测 ,并比较趋化因子作用前后CXCR4的变化。ELISA检测上皮性卵巢癌腹水中趋化因子CXCL12的含量。以Boyden小室检测重组人SDF - 1、上皮性卵巢癌腹水对卵巢癌细胞的趋化活性。结果 (1)在上皮性卵巢癌组织及CAOV3细胞中CXCR4在mRNA及蛋白水平显著表达 ,趋化因子作用后CXCR4的含量明显减少 ,差异有显著性 (P<0 0 5 )。 (2 )卵巢癌性腹水及腹膜后腔淋巴结组织均含较高水平的CXCL12。 (3)重组人CXCL12、卵巢癌性腹水均可诱导上皮性卵巢癌细胞的迁移 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 CXCR4 /CX CL12受体配体系统可通过诱导癌细胞的迁移在上皮性卵巢癌的转移中起重要作用。
- 李芳朱怀仕马丁
- 关键词：趋化因子受体CXCR4上皮性卵巢肿瘤细胞迁移
- 磁性纳米颗粒介导基因治疗乳腺癌实验研究被引量：6
- 2005年
- 目的探讨新型基因载体PEI包裹的磁性纳米颗粒polyMAG-1000介导TRAIL基因治疗乳腺癌的可行性,观察TRAIL基因转染乳腺癌细胞后的治疗作用。方法以polyMAG-1000为基因载体,联结TRAIL质粒DNA后转染人乳腺癌细胞株MCF-7细胞,用Tunel法检测细胞的凋亡,用流式细胞仪检测细胞的凋亡率,以空载体作为阴性对照;脂质体转染TRAIL基因作阳性对照。结果Tunel法可见MCF-7细胞经polyMAG-1000和脂质体转染TRAIL基因后均可见发生凋亡的细胞,流式细胞仪检测polyMAG-1000转染的细胞凋亡率为25.11%±2.85%,脂质体转染的细胞凋亡率为18.31%±2.44%(P<0.05)。结论TRAIL对乳腺癌细胞MCF-7具有凋亡效应,PEI包裹的磁性纳米颗粒介导的TRAIL基因治疗在肿瘤的基因治疗中具有应用前景。
- 韦卫中吴华李芳
- 关键词：氧化铁磁性纳米颗粒TRAIL乳腺癌基因治疗
- 拓扑替康胞内浓度降低——卵巢癌细胞耐药的一种新机制
- 2004年
- 目的 探讨卵巢癌拓扑替康 (TPT)耐药细胞株中TPT胞内浓度的变化。方法 建立卵巢癌TPT耐药细胞株 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测该细胞株对多种化疗药物的耐药指数 ,流式细胞仪检测 2株细胞在不同条件下的TPT胞内浓度。结果 该细胞株对TPT及米托蒽醌 (MX)耐药。耐药细胞的TPT泵出速率明显快于亲本细胞的泵出速率 ,胞内TPT浓度约为亲本细胞的 1/ 6 (P <0 0 5 ) ;低温时 2株细胞的TPT泵出均受抑制 ;能量不足时 ,耐药细胞的TPT泵出减少 ,胞内浓度由 13 78增加到 2 0 13(P <0 0 5 )。结论 能量依赖性的拓扑替康胞内浓度降低是卵巢癌细胞耐药的一种机制。
- 贾平吴少波李芳奚玲廖国宁卢运萍马丁
- 关键词：耐药细胞株拓扑替康四甲基偶氮唑蓝流式细胞仪检测米托蒽醌
- 卵巢癌细胞中小分子G蛋白Rho的表达及其意义被引量：4
- 2003年
- 目的 研究小分子G蛋白Rho家族中RhoA、RhoC及其效应分子ROCK -1在不同卵巢癌细胞中的表达水平 ,探讨它们与卵巢癌转移的相关性。方法 RT -PCR检测RhoA、RhoC及ROCK -1在卵巢癌细胞SW62 6、Skov-3、A2 780和Caov-3中mRNA的表达水平 ;WesternBlot检测RhoA和ROCK -1蛋白的表达情况 ;Boyden小室体外侵袭试验检测四株卵巢癌细胞的体外侵袭能力。结果 RhoA、RhoC和ROCK -1在不同的卵巢癌细胞中均有表达 ,但仅RhoC的表达水平与癌细胞侵袭力能力呈正相关 (r =0 .95 ,P <0 .0 1 )。此外RhoA在转录水平和蛋白水平并不呈同步变化。四株卵巢细胞的体外侵袭能力 ,其中SW62 6最强 ,Caov-3最弱 ,Skov -3和A2 780居中 ;结论 RhoC的表达与卵巢癌细胞的体外侵袭能力相关 ,可能作为一个癌基因在卵巢癌中起作用 。
- 韩志强李芳朱怀仕张阿丽卢运萍马丁
- 关键词：卵巢癌G蛋白RHO肿瘤转移癌基因
- 低氧对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞A278凋亡的影响及其机制被引量：10
- 2005年
- 背景与目的:低氧作为实体瘤的特征和重要的生存微环境,可能与化疗耐药相关。我们认为低氧与卵巢癌化疗耐药可能相关。本研究建立低氧模型,探讨低氧、低氧诱导因子1α(HIF鄄1α)对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞A2780凋亡的影响。方法:体外培养的A2780细胞中加入化学性低氧诱导剂氯化钴(CoCl2),诱导并制作低氧模型。将细胞分为4组:A组(对照)、B组(常氧培养加紫杉醇)、C组(低氧培养加紫杉醇)、D组(低氧培养加Decoy加紫杉醇)。用诱骗法(Decoy)阻断HIF鄄1α功能,Westernblot、RT鄄PCR、TUNEL和流式细胞术分别检测各组细胞HIF鄄1α蛋白、mRNA的表达水平及细胞凋亡情况。结果:CoCl2能明显增加A2780细胞HIF鄄1α蛋白的表达,而对其mRNA的表达无明显影响,Decoy法阻断HIF鄄1α的功能,对其蛋白和mRNA的表达无明显影响。TUNEL检测发现,B组凋亡指数[AI:(41.12±25.65)%]显著高于C组[AI:(24.12±15.19)%](P<0.05);低氧阻断了HIF鄄1α功能后,D组凋亡指数[AI:(35.19±21.73)%]较C组明显增加(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果与TUNEL检测结果类似。结论:低氧能保护A2780细胞抵抗化学治疗,HIF鄄1α可能在紫杉醇诱导的细胞凋亡中发挥重要的抗凋亡作用。
- 黄磊敖启林李芳邢辉卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤低氧低氧诱导因子-1Α凋亡
- 卵巢癌患者自体肿瘤细胞疫苗的临床应用被引量：5
- 2004年
- 李芳朱怀仕贾平高庆蕾徐茜刘德艳王世宣卢运萍马丁
- 关键词：卵巢癌自体肿瘤细胞疫苗
- 妇科肿瘤的特异性主动免疫治疗进展
- 2003年
- 肿瘤的特异性主动免疫治疗(SAIT),即用肿瘤疫苗刺激机体产生针对肿瘤特异性抗原的免疫反应,作为癌症患者手术、化疗或放疗的一种辅助治疗,目的是克服因肿瘤产物造成的免疫抑制状态,增强肿瘤相关抗原(TAA)的免疫原性,以刺激特异性免疫来攻击肿瘤细胞。肿瘤疫苗包括细胞疫苗。
- 李芳
- 关键词：妇科肿瘤肿瘤疫苗细胞疫苗分子疫苗基因疫苗
- 短发卡状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的研究被引量：4
- 2007年
- 目的:构建AKT2基因特异性短发卡状RNA(shRNA)真核表达载体,观察RNA干扰(RNAi)技术,对人卵巢癌A2780和SKOV3细胞中AKT2蛋白激酶表达的抑制作用,并探讨其促进细胞凋亡的机制。方法:运用基因工程技术,设计合成针对AKT2 mRNA的特异性shRNA,构建真核表达载体pAKT2-shRNA。将pAKT2-shRNA经脂质体(LipofectamineTM2000)包裹转染人卵巢癌A2780和SKOV3细胞,荧光显微镜观察细胞内DsRed红色荧光蛋白的表达,计算转染效率,半定量RT-PCR(Semi-quantitativeRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测AKT2的表达及干扰效率,流式细胞学检测法(FACS)检测细胞凋亡率,比较抑制AKT2基因前后卵巢癌细胞抵抗凋亡能力。结果:成功构建了pAKT2-shRNA载体。A2780和SKOV3细胞转染pAKT2-shRNA后,荧光显微镜下观察转染效率约40%;Semi-quantitativeRT-PCR和Western blot检测结果示,转染后AKT2 mRNA和蛋白表达均显著降低。FACS检测结果显示,转染pAKT2-shR-NA后,紫杉醇25nmol/L处理细胞12h,与空白对照组和阴性对照组相比,细胞凋亡率显著增加,P<0.05。结论:构建的pAKT2-shRNA真核表达载体能有效抑制AKT2基因表达;运用RNAi技术,降低卵巢癌细胞中AKT2基因表达水平,能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,促进肿瘤细胞凋亡。
- 翁丹卉邢辉邓友星梁逢奇黄磊李芳马丁卢运萍
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰
